rhCNTF对Aβ损伤海马神经元的作用机制研 究简

目的：探讨重组人睫状神经营养因子（rhCNTF）对Aβ 损伤的海马神经元的作用机制.方法：分离、纯化Wistar 乳鼠海马组织,获得海马神经元并进行体外培养.采用神经元特异性烯醇化酶（NSE）免疫细胞化学进行鉴定.100 ng·mL-1 的rhCNTF和10 μmol·L-1 的聚集态Aβ 作用于海马神经元.CCK-8法检测rhCNTF对Aβ 损伤的海马神经元活力影响.流式细胞术检测rhCNTF对Aβ 致海马神经元早期凋亡的影响.结果：免疫细胞化学法成功鉴定了海马神经元.海马神经元活动度随着rhCNTF浓度增加而增大且呈指数相关.镜下观察到rhCNTF＋Aβ 组细胞形态较Aβ 组好;相对于Aβ 组,rhCNTF ＋Aβ 组和Aβ ＋ rhCNTF组的海马神经元活动度显著增高（P 〈 0.01）.rhCNTF可减少Aβ 引起的细胞早期凋亡.结论：rhCNTF对Aβ 损伤的海马神经元有保护作用,其机制与促进神经元生长和减少细胞凋亡有关.     

试论内科慢性病患者出院后的后续治疗

绝大多数内科慢性病患者出院后需要进行后续治疗以及康复训练,尤其是病人的心理治疗、饮食的合理控制、功能锻炼尤为重要,出院后的后续治疗产生了良好的社会和经济效益,明显提高了患者及家属对医院的满意度。     

血管紧张素转换酶2与糖尿病肾病

睫状神经营养因子(CNTF)属1型细胞因子超家族,结构与白细胞介素6相似。近年来发现其不仅对神经系统有重要作用,对代谢系统也有影响。CNTF可作用于中枢神经系统和外周肝脏、脂肪组织等,抑制食欲、增加能量消耗、减轻体重,尤其对瘦素抵抗型肥胖者的作用更明显;并可调节血糖和血脂代谢,改善胰岛素水平;对改善糖尿病神经病变和视网膜病变等糖尿病慢性并发症有一定疗效。     

2型糖尿病患者血清睫状神经营养因子水平的变化及其临床意义

目的 探讨血清睫状神经营养因子（CNTF）水平与T2DM及肥胖的相关性与临床意义.方法 选择44名糖耐量正常（NGT组）者和44例新诊断T2 DM（T2 DM组）患者按BMI各自分为超重（Ob）和正常体重（Nob）亚组.ELISA法测定血清CNTF水平.结果 T2DM组血清CNTF的浓度较NGT组降低（P＜0.05）.相关分析显示,T2DM组中CNTF与TC、HbA1c、FPG、HOMA-IR呈负相关.HOMA-IR是血清CNTF的独立相关因素.结论 T2DM患者CNTF水平降低,与TC、HbA1c、FPG、HOMA-IR呈负相关,HOMA-IR是CNTF.独立相关因素.     

睫状神经营养因子与2型糖尿病的关系

睫状神经营养因子(CNTF)属1型细胞因子超家族,结构与白细胞介素-6相似.近年来发现其不仅对神经系统有重要作用,对代谢系统也有影响.CNTF可作用于中枢神经系统和外周肝挝脏、脂肪组织等,抑制食欲、增加能量消耗、减轻体重,尤其对瘦素抵抗型肥胖者的作用更明显;并可调节血糖和血脂代谢,改善胰岛素水平;对改善糖尿病神经病变和视网膜病变等糖尿病慢性并发症有一定疗效.     

脂肪源性干细胞促进大鼠受损坐骨神经传导及脊髓脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子的表达

目的:探讨脂肪源性干细胞(ADSCs)对坐骨神经损伤大鼠神经传导功能以及脊髓脑源性神经营养因子(BDNF)和睫状神经营养因子(CNTF)表达的影响。方法:将第4代ADSCs移植入脱细胞神经移植物(ANA)中,构建组织工程神经。大鼠随机分为正常组、杜氏改良Eagle培养基营养混合物F12(DMEM)组和ADSC组。DMEM组和ADSC组均建立坐骨神经损伤模型,后用相应的组织工程神经桥接损伤神经的断端。术后6周采用神经电生理记录仪检测各组大鼠坐骨神经传导速度和波幅,采用免疫荧光和Real-time PCR检测各组大鼠脊髓脑源性神经营养因子(BDNF)、睫状神经营养因子(CNTF)蛋白和mRNA的表达。结果:ADSC组大鼠坐骨神经传导速度、波幅和脊髓BDNF和CNTF蛋白及mRNA表达均显著高于DMEM组。结论:ADSCs可增加坐骨神经传导速度和波幅、上调脊髓BDNF和CNTF的表达。     

手术联合药物治疗原发性视网膜色素变性疗效观察

目的 研究手术联合中西药治疗原发性视网膜色素变性(RP)的临床疗效.方法 对92例(184眼)原发性视网膜色素变性患者进行睫状前动脉-脉络膜血管吻合术.术前术后联合应用活血化瘀和营养神经等中西药辅助治疗,行矫正视力、视野、视网膜电图(ERG)、黄斑部光学相干断层成像检查(OCT)、荧光素眼底血管造影(FFA)和眼底彩色照相等检查.结果 术后复查,视力改善(P<0.05);视野48眼扩大;ERG32眼可见波形,68眼a、b波幅值增加;FFA显示64眼视盘、视网膜色泽和血管狭窄改善;OCT19眼脉络膜毛细血管层红色光带改善:无1例出现并发症.结论 睫状前动脉-脉络膜血管吻合术联合药物的综合治疗,能在一定程度上改善原发性视网膜色素变性(RP)尤其合并血管狭窄或闭塞患者的视力、视野等视功能,从而改善患者的生存质量.     

睫状神经营养因子对培养的视网膜神经细胞凋亡相关分子表达的影响

背景：视网膜色素变性（retinitis pigmentosa,RP）是具有高度遗传异质性的视网膜神经变性类疾病,其发病机制以光感受器细胞（photoreceptor cells,PRCs）凋亡为共同终末通路。睫状神经营养因子（ciliary neurotrophic factor,CNTF）在多种视网膜变性动物模型中表现出显著的视网膜神经细胞保护效应。细胞包囊技术（encapsulated cell technology,ECT）辅助的眼内植入系统能够在患者玻璃体腔内持续释放低剂量CNTF,为RP治疗带来了新的希望。但是,迄今为止CNTF神经保护效应的分子机制尚不完全清楚,尤其是对于CNTF如何参与调节视网膜神经细胞凋亡通路的研究较少。本研究通过CNTF作用于培养的视网膜神经细胞,观察短期内CNTF对视网膜神经细胞内凋亡抑制因子Bcl-2和凋亡促进因子c-Jun分子表达的影响,以期了解CNTF对视网膜神经细胞凋亡通路的可能影响,为CNTF的临床应用提供依据。 目的：观察单次性给予CNTF短期内视网膜神经细胞内Bcl-2和c-Jun分子表达变化特点以及细胞凋亡水平。 设计、时间和地点：单盲、随机、对照体外实验,于2008年5月至2009年4月在北京同仁医院中心实验室完成。 材料：新生期牛视网膜神经细胞,兔抗牛NSE、GFAP、Bcl-2、c-Jun、β-actin抗体,小鼠抗牛RPE65抗体,annexin V-FITC/碘化丙啶（propidium iodide,PI）凋亡试剂盒,real time PCR仪及流式细胞仪等。 方法：新生期牛视网膜传2代细胞通过免疫组织化学法鉴定细胞类型,按固定密度接种到规格一致的培养瓶或培养皿中,随机分为对照组和CNTF组,对照组不予处理,CNTF组在细胞接种3天后在培养基中加入CNTF蛋白使其终浓度为50ng/mL,于CNTF作用2,4,6d后的3个时间点分别进行检测,通过Annexin-V-FITC/PI染色和流式细胞仪检测细胞凋亡水平,记录处于不同凋亡阶段的细胞比例并与对照组比较,通过Real Time-PCR和Western blotting方法检测Bcl-2和c-Jun的mRNA和蛋白表达水平并与对照组比较。 主要观察指标：细胞生长曲线,在3个时间点Bcl-2和c-Jun的mRNA和蛋白相对表达量以及不同凋亡阶段细胞比例。 结果: 新生期牛视网膜传2代细胞培养体系具有较好的活力、稳定性和增殖能力。CNTF作用2,4,6d时,晚期凋亡细胞比例显著低于对照组（2d：P<0.01;4d：P<0.01;6d：P<0.01）。Bcl-2蛋白在50ng/mL的CNTF作用2d（P<0.01）和4d（P<0.01）时表达明显高于对照组。c-Jun基因转录在CNTF作用4d时出现显著下调（P<0.01）。c-Jun蛋白在CNTF作用4d时较对照组上调（P<0.01）,在作用6d时下调（P<0.05）。 结论：在50ng/mL的CNTF单次给药作用下,视网膜神经细胞内抗凋亡蛋白质Bcl-2表达明显上调,凋亡促进分子c-Jun表达呈现早期轻度上调而后期明显抑制,蛋白表达变化滞后于基因表达。CNTF参与不同凋亡通路中相关分子表达的调节。CNTF可能通过该诱导效应延迟RP等视网膜变性疾病的凋亡进程。     

脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子单独或联合体外诱导人脐带血来源的间充质干细胞向神经样细胞分化

背景：体外培养条件下脐血间充质干细胞可向神经样细胞诱导分化,一定浓度范围的脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子联合体外诱导可获得较高的神经元分化比例。 目的：观察脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子单独或联合体外诱导人脐带血来源的间充质干细胞分化成神经样细胞的可行性。 方法：取第5代的脐血间充质干细胞,分别用5,10,20 μg/L的脑源性神经营养因子和5,10,20 μg/L睫状神经营养因子单独或联合诱导脐血源间充质干细胞向神经样细胞分化,另设空白对照组无任何干预措施。倒置相差显微镜观察细胞形态变化,于实验第1,3,6天分别进行神经元特异性烯醇化酶和胶质纤维酸性蛋白免疫细胞化学染色,并计数分化为神经元样细胞及神经胶质细胞的比例。 结果与结论：①向神经细胞诱导后,人脐血源间充质干细胞形态明显改变,胞体收缩,胞核部分折光性增强,出现类似于树突及轴突样结构。②与空白对照组相比,脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子能显著提高人脐血源间充质干细胞分化为神经元的比例。其中20 μg/L的脑源性神经营养因子联合20 μg/L睫状神经营养因子诱导人脐血源间充质干细胞分化为神经样细胞的比例最高。提示人脐血间充质干细胞经脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子体外诱导,均能够分化为神经样细胞。