多囊卵巢综合征患者卵母细胞超微结构观察

目的 对多囊卵巢综合征（PCOS）患者卵母细胞的超微结构和线粒体DNA（mtDNA）拷贝数进行分析,探讨PCOS患者卵母细胞质量下降的原因。方法 根据临床指征,选取2017年1～12月于中国科学技术大学附属第一医院生殖医学中心因男方因素行卵胞质内单精子注射技术（ICSI）助孕的患者115例,根据是否患有PCOS分为试验组和对照组,其中试验组为PCOS患者57例,对照组为非PCOS患者58例。所有患者均接受标准长方案控制性促排卵,共收集187枚卵母细胞用于透射电镜（TEM）的超微结构分析和mtDNA拷贝数的荧光实时定量PCR检测。其中试验组52枚用于超微结构观察,另38枚用于mtDNA拷贝数检测;对照组57枚和40枚分别用于超微结构观察和mtDNA拷贝数检测。对比观察试验组与对照组来源的卵母细胞超微结构各指标：透明带、卵周隙、微绒毛、皮质颗粒、高尔基体和内质网的形态和分布、线粒体的结构与数量。结果 与对照组相比,试验组卵母细胞的透明带、卵周隙、微绒毛、皮质颗粒、高尔基体、内质网等细胞结构和细胞器没有变化。但试验组卵母细胞内异常线粒体比例（58.7%高于对照组17.7%（P<0.05）,且线粒体数量试验组（44.3±9.6）个/切片低于对照组（65.4±12.7）个/切片（P<0.05）。同时,试验组卵母细胞所含的mtDNA拷贝数为（54 390±19 139）个,低于对照组的（88 135±44 235）个（P<0.05）。结论 PCOS患者卵母细胞内线粒体结构和数量均出现改变,可能与其卵母细胞质量受损有关。     

卵母细胞及其胚胎发育潜能相关的生物标记物

卵母细胞发育潜能是在卵泡发育过程中逐步获得的,卵丘细胞(CCs)与卵母细胞紧密接触,卵泡液(FF)为卵母细胞提供良好的微环境.因此,CCs功能及FF成分组成可以反映卵母细胞的发育潜能.CCs为卵母细胞提供代谢所需的营养物质如丙酮酸、丙氨酸、胆固醇等,并在卵母细胞的成熟、排卵、受精过程中发挥重要的作用.FF作为卵巢体壁细胞与血浆之间的媒介,其内的代谢相关分子、激素类分子、活性氧分子及一些细胞因子与卵母细胞的成熟及发育潜能密切相关.综述与卵母细胞及其胚胎发育潜能相关的生物标记物,主要是CCs、FF中的相关因子,两者结合为胚胎学家选择最佳的卵子提供参考.     

取卵日不同大小卵泡的获卵情况及卵母细胞质量差异分析

目的：探讨体外受精胚胎移植（IVF-ET）中,取卵日卵泡直径与卵子回收率、相应卵泡获得的卵子质量、受精和卵裂的关系。方法回顾性分析接受卵泡浆内单精子注射（ICSI）治疗的30个周期100个卵泡,根据卵泡大小分为五组,对五组的卵子回收率、卵母细胞的卵冠丘复合物（OCCC）评分、受精评分、卵裂评分进行比较和分析。结果将穿刺卵泡分为五组, A组〈16 mm、B组16~18 mm、C组18.5~20 mm、D组20.5~22 mm、E组〉22 mm;五组的获卵率、OCCC评分、受精评分、卵裂评分差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论取卵日目标卵泡在16~22 mm之间成熟卵子回收率高并能获得高质量胚胎。     

人卵母细胞胞浆中央颗粒化对胚胎发育潜能的影响及其分级和成因探讨

目的探讨人类辅助生殖技术中卵母细胞胞浆中央颗粒化(CLGC)对胚胎发育潜能的影响及其分级评估、形成的可能原因。方法回顾性分析荆州市中心医院生殖中心2012年6月至2014年3月卵胞浆内单精子注射(ICSI)治疗的患者,选取全部卵母细胞CLGC的30例患者作为研究组,随机选择同期卵母细胞胞浆形态无异常的200例患者作为胞浆形态正常组,比较二组间年龄、基础FSH、平均促性腺激素(Gn)使用天数、平均Gn总量,以及受精率、卵裂率、优质胚胎率、可利用胚胎率及妊娠结局的差异。并对卵母细胞CLGC的程度进行分级评估,比较轻、重度CLGC患者受精率、优质胚胎率、可利用胚胎率的差异。结果研究组与对照组之间的年龄、基础FSH无统计学差异(P0.05),而平均Gn使用天数、平均Gn总量、受精率、卵裂率、优质胚胎率、可利用胚胎率及临床妊娠率、流产率差异均有统计学意义(P0.05);轻度CLGC组受精率、卵裂率、优质胚胎率、可利用胚胎率均显著高于重度CLGC组(P0.05)。结论人卵母细胞随CLGC的程度加重其胚胎的发育潜能逐渐降低。CLGC作为一种常见的卵母细胞胞浆形态异常对胚胎发育潜能的评估有重要的参考意义。合理的临床降调节方案、合适剂量的Gn使用可能是减少所获卵母细胞CLGC的途径之一。     

PIWI蛋白相互作用RNA与生殖功能的关系

PIWI蛋白相互作用RNA(PIWI-interacting RNA,piRNA)是长度大约有24～31个核苷酸的非编码RNA,特异性表达于动物的生殖细胞中。piRNA的生成过程可分为细胞核内的转录以及细胞质内的后期加工两部分。piRNA可以在PIWI家族蛋白的协助下发挥沉默转座子基因和调控mRNA等功能,并可进一步调控生殖功能。在雄性生殖功能中,piRNA可以在PIWI家族蛋白的协助下通过控制组蛋白泛素连接酶RNF8、谷胱甘肽过氧化物酶5等蛋白的表达调控精子发生,引起无精子症、少精子症和弱精子症等影响雄性生殖功能的疾病。在piRNA最初的研究中,学者普遍认为piRNA在雌性生殖方面作用不大,但是近年对金黄地鼠的研究发现piRNA/PIWI复合物在雌性生殖功能的调控过程中也发挥着重要作用。综述piRNA的产生及其与生殖功能的相关性。     

线粒体自噬与卵巢功能

线粒体在决定卵母细胞发育能力和卵巢功能方面起重要作用。线粒体自噬是细胞选择性地清除多余或受损的线粒体,与维持细胞内线粒体稳态及细胞存活相关;但自噬被抑制或者被过度激活都可能影响细胞功能和细胞存活。当暴露于不良环境时,卵母细胞线粒体功能受损,诱发过量的线粒体自噬,导致卵母细胞质量下降。排卵后卵母细胞老化,氧化应激致线粒体损伤;应用抗氧化剂可以诱导线粒体自噬以清除受损的线粒体,降低氧化应激,改善卵母细胞的发育潜能。综述卵母细胞线粒体自噬与卵巢功能的关系,以及不良环境刺激和抗氧化剂对卵母细胞线粒体自噬的影响,为抗氧化剂应用于卵巢储备功能下降患者提高卵母细胞质量提供了理论依据。     

卵泡液代谢组学预测卵母细胞发育潜能的研究现状

卵泡液是由颗粒细胞、卵泡膜细胞等分泌物共同形成的,可作为卵母细胞生长发育的微环境或培养基。卵泡液中含有细胞、蛋白质、激素等物质,可以促进卵母细胞完成生长、发育、成熟等一系列生理活动。卵母细胞的质量是影响辅助生殖结局的关键因素,对提高临床妊娠率有重要价值。代谢组学分为靶向和非靶向分析技术,现如今通常利用磁共振成像、质谱检测技术等来检测卵泡液中的代谢物,包括葡萄糖、氨基酸、胆固醇,维生素等成份,进而评估与预测卵母细胞的发育和成熟。本文就卵泡液代谢组学预测卵母细胞发育潜能的研究现状做一综述。     

孤雌生殖技术的研究进展

孤雌生殖技术是无性生殖技术的一种,可以实现无需精子介入的卵母细胞激活分裂和发育,对间接评估卵母细胞的质量、分析早期胚胎发育中父系母系配子相互作用、研究胚胎发育初始机制具有非常重要的意义,同时孤雌生殖技术对建立胚胎干细胞系有重要的作用,是近年来生殖生物学研究的热点之一.但孤雌生殖技术在某些国家和地区还受到宗教、道德、伦理的制约,开展广泛的科学研究还存在一定难度.对孤雌生殖研究现状及存在问题做综述.     

细胞骨架在卵母细胞成熟、受精及核移植胚胎的作用

细胞骨架系统,不仅是活细胞的支撑结构,决定细胞的形状,赋予其强度,而且是对各细胞器乃至某些大分子进行空间的组织安排,并且参与细胞外信号向核的转导及核对整个细胞活动的调节。哺乳动物卵母细胞和早期胚胎细胞骨架具有其独特的分布和功能,使卵母细胞和胚胎呈现出精确的时空性变化特点。确保受精及胚胎发育按时有序地进行。本文综述了细胞骨架在卵母细胞成熟、受精、早期胚胎发育和核移植发育过程中的分布和作用。     

人类卵母细胞减数分裂进程及形态学研究

目的对人类未成熟卵母细胞进行体外培养,观察卵母细胞直径和卵周隙随卵母细胞成熟所发生的形态学改变,并按照其染色体变化确定人类卵母细胞减数分裂进程。方法穿刺收集多囊卵巢患者未成熟卵母细胞进行体外培养成熟,分别于体外培养4、8、12、16、20、24和28h进行卵母细胞直径及最大卵周隙测量,然后行染色体形态学观察并进行分析。结果未成熟卵母细胞体外培养10h约有50％发生生发泡破裂（GVBD）恢复减数分裂;减数分裂Ⅰ（MⅠ）前中期由培养8h的31．37％上升到16h的45％,然后下降;MⅠ中期（Meta-MⅠ）在培养20h进入高峰,占到40．63％,MⅠ后、末期（Ana／tel-MⅠ）维持时问相对较短,24h后多数已进入减数分裂Ⅱ（MⅡ）成熟期,28h未成熟卵母细胞体外培养的成熟率为68．85％。另外发现随着卵母细胞的体外成熟,其直径不会发生明显改变,但卵周隙（PVS）却在逐步增加。结论按照常规的体外培养方法可大致确定人类未成熟卵母细胞的体外成熟进程,且认为卵周隙的扩大可作为卵母细胞成熟分期的另一标志。