人类卵母细胞超微结构的研究进展

随着辅助生殖技术的不断发展,如何正确的评价卵母细胞及胚胎质量对更好的了解受精失败、胚胎停滞发育的原因至关重要。卵母细胞的超微结构,与其形态和功能密切相关,卵母细胞正常的超微结构是随后正常受精、胚胎正常发育的关键。对生殖泡期、第一次减数分裂中期、正常及异常第二次减数分裂中期(MII期)、受精失败卵母细胞及颗粒细胞的超微结构进行如下综述。     

Experimental Study on Meiotic Spindles and Chromosomes of Mouse Mature （MⅡ） Stage Oocytes under Laser Scanning Confocal Microscopy

The in vitro culture,maturation and cryopr-eservation of oocytes are all the i mportant parts inthe assisted reproductive technology.Mature oo-cyte(i.e.MⅡoocytes)is arrested at the meta-phase stage of meiosisⅡ,in which chromosomesare attached to the spindle microtubles and line uponthe equatorial plateinthe normal spindles.Dis-organized structure of spindles can not onlylead tosuch morphologic changes as unwound chromo-somes but also the chromosome nondisjuction andresultant aneuploid.When t…     

小鼠窦前卵泡培养成熟后卵母细胞纺锤体的变化

目的小鼠窦前卵泡体外培养得到成熟卵母细胞,观察卵母细胞的染色体和纺锤体形态,分析其变化及原因。方法完整小鼠窦前卵泡培养12 d,得到的卵母细胞进行免疫荧光染色,共聚焦显微镜观察纺锤体和染色体的形态和分布。结果经过体外培养,得到GV、M I、MⅡ期卵母细胞分别占总数27.9%、37.2%、34.9%;GV期卵母细胞存在完整的染色质圆环,11.8%的M I期卵母细胞显示正常纺锤体和染色体;38.5%的MⅡ期卵母细胞显示正常的纺锤体和染色体。结论小鼠窦前卵泡经体外培养后能够得到成熟的MⅡ期卵母细胞,但是其效率较低。原因可能是卵母细胞骨架结构的异常使染色体分离障碍,部分卵母细胞停留于M I期;同时成熟卵母细胞的受精率低也与纺锤体异常有关。     

用全染色体涂抹探针进行卵母细胞第一极体荧光原位杂交

 【目的】建立用全染色体涂抹探针（WCP）对卵子第一极体进行荧光原位杂交（FISH）检测染色体的方法。【方法】收集单精子卵胞浆内注射（ICSI）中不成熟卵母细胞经体外培养成熟和常规试管婴儿（IVF）中未能成功受精的成熟卵母细胞，活检第一极体，固定后行13、14号染色体的全染色体涂抹探针荧光原位杂交。活检后，一部分卵母细胞固定行FISH以分析卵子自身的13、14号染色体，其余行ICSI受精，观察受精和卵裂情况。【结果】共获得成熟母细胞93个，成功活检85个，成功固定78个，共29个第一极体处于分裂中期，均有FISH结果。卵母细胞体外培养成熟后立即取极体进行固定，90．5％（19／21）的极体处于分裂中期，而取卵后30-48h和72h后活检的第一极体处于分裂中期的比例分别为27．3％（6／22）和11．4％（4／35），3组相比有统计学差异（P〈0．01）。11个卵母细胞同时获得了极体和相对应卵细胞的FISH结果，其中10个极体和相对应的卵细胞分别有1条13，14号染色体，剩余1个卵母细胞的极体有2条14号染色体和1条13号染色体，相对应的卵细胞仅有1条13号染色体，二者互补。活检后行ICSI受精的卵母细胞受精率为78．6％（11／14），优质胚胎率45．5％（5／11）。【结论】全染色体涂抹探针对卵子第一极体进行遗传分析可以有效、准确地推测相对应卵母细胞的染色体构成，从而应用于女性染色体易位患者的植入前遗传诊断。     

未成熟卵母细胞评分系统对人类未成熟卵体外成熟及发育潜能的评价

目的:建立未成熟卵母细胞评分系统,并评价其对人类未成熟卵体外成熟及发育潜能的预测作用。方法:将未成熟卵母细胞取出体外,根据卵母细胞形态及其周围颗粒细胞形态、分布进行评分,然后分别进行成熟培养和体外受精,再将卵母细胞评分与其成熟率、受精率、优质胚胎率,以及相应卵母细胞的颗粒细胞凋亡情况进行比较。结果:随着卵母细胞评分的降低,卵子的成熟率、受精率、卵裂率及优质胚胎率均下降,而颗粒细胞的凋亡率升高。结论:本研究所设计的未成熟卵母细胞评分系统能够较准确地反映卵母细胞的发育潜能,具有一定的应用价值。     

体外受精治疗周期中出现过多的多原核合子5例分析

在体外受精中异常受精的现象，已经引起越来越多胚胎学家的关注。在常规体外受精（IVF）中多原核一般认为是由于多精受精引起的，而对于卵胞浆内单精子注射（ICSI），研究者则认为多原核的形成是由于第二极体不能排出，也可能是二倍体的精子或卵母细胞参与了受精。文献报道在体外受精周期中，受精卵中出现多原核的比例约为3％-10％。然而在一些体外受精治疗周期中，受精卵中存在过多多原核形成的现象。本文对体外受精（IVF和ICSI）治疗周期中，部分患者的大部分受精卵中出现多原核的现象进行汇总分析，以更好地了解多原核形成的原因及其机制，为临床上体外受精方法的选择提供依据。     

促甲状腺激素对多囊卵巢综合征患者代谢及生殖系统的影响

目的探讨促甲状腺激素(TSH)对多囊卵巢综合征(PCOS)患者代谢及生殖系统的影响。方法选取2015年4月-2017年4月在厦门市妇幼保健院生殖医学科行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的PCOS患者146例,分为TSH≥2.5m U/L组52例、TSH2.5 m U/L组94例,检测TSH、性激素及代谢指标。记录两组获卵数、MⅡ卵数、可利用胚胎数及优质胚胎数。结果 TSH≥2.5 m U/L组甘油三酯(TG)、空腹胰岛素(FINS)、稳态模型(HOMA-IR)水平较TSH2.5 m U/L组升高明显(P0.05),TSH2.5 m U/L组优质胚胎数、MⅡ卵子率较TSH≥2.5 m U/L组高,差异有统计学意义(P0.05),TSH与TG、FINS、HOMA-IR呈正相关(P0.05)。结论 TSH≥2.5 m U/L影响PCOS患者代谢及生殖系统。     

条件基因敲除技术在卵泡发育调控机制研究中的应用进展

卵泡发育是受内分泌、旁分泌及基因调节的复杂生理过程。条件基因敲除能选择去除调控特定发育阶段特定细胞或器官的基因,是在体基因功能研究的主要手段。近年来该技术被广泛应用于卵泡发育调控机制的研究。本文综述了条件基因敲除技术在始基卵泡激活、卵母细胞成熟、排卵、黄体形成及早期胚胎发育等机制研究中的应用进展。     

ICSI联合IVM技术在卵巢低反应高龄患者中的应用

目的：探讨胞浆内单精子注射（ICSI）联合未成熟卵母细胞体外成熟（IVM）技术在卵巢低反应高龄患者中的应用价值。方法：回顾性分析2016年1月—2018年9月于郑州大学第一附属医院生殖医学中心行ICSI助孕治疗81个周期，年龄≥35岁，获卵数≤3个，且卵母细胞均未成熟。按促排卵方案分为微刺激方案组（n=37）和拮抗剂方案组（n=44），统计2组患者基础情况、实验室结果及妊娠结局。结果：①2组患者年龄、不孕时间、基础内分泌、基础窦卵泡数及抗苗勒管激素（AMH）比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；②拮抗剂方案组Gn总量较微刺激方案组高，差异有统计学意义（P＜0.05）；③微刺激方案组与拮抗剂方案组体外培养成熟率、2PN率、卵裂率、可利用胚胎率及优胚率比较差异均无统计学意义（P＞0.05）；④微刺激方案组与拮抗剂方案组的胚胎存活率、种植率和临床妊娠率比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：对于卵巢低反应的高龄患者行ICSI联合IVM培养有利于提高卵母细胞成熟率及胚胎利用率，增加妊娠机会，微刺激方案Gn用量少对卵巢低反应患者是经济有效的选择。