抑制IGF2基因的siRNA表达载体对肝癌Huh-7细胞增殖的抑制作用

目的:研究抑制人胰岛素样生长因子2(IGF2)基因的siRNA表达载体对肝癌Huh-7细胞增殖的抑制作用。方法:将重组人甲胎蛋白(hAFP)和人端粒酶逆转录酶(hTERT)双启动子调控抑制IGF2基因的siRNA表达载体pGL3-h AFP-hTERT-siRNA3(简称siRNA3)转染Huh-7细胞和正常肝L-02细胞,另设阴性对照(载体p GL3-hAFP-hTERT)组和空白对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组细胞转染48 h后IGF2 mRNA表达;酶标仪检测转染0、24、48、72 h后的细胞活性;流式细胞仪检测转染48h后细胞周期、细胞凋亡;Western blot法检测细胞IGF2、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白(Cyclin)E2、Cyclin D2、Cdc2、Bcl-2蛋白表达水平。结果:与阴性对照组和空白对照组比较,转染siRNA3的Huh-7细胞中IGF2 mRNA表达明显减弱,转染48、72 h后Huh-7细胞活性明显降低,G1期Huh-7细胞明显增加,S期Huh-7细胞明显减少;Huh-7细胞早期、晚期及总凋亡百分比均明显增加,IGF2、PCNA、Cyclin E2、Cyclin D2、Cdc2和Bcl-2蛋白表达均明显减弱,以上差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。转染siRNA3表达载体的L-02细胞上述指标均无明显变化(P>0.05)。结论:重组hAFP和hTERT双启动子调控针对IGF2基因的siRNA可特异性抑制Huh-7细胞IGF2表达及细胞增殖,其可能与下调IGF2 mRNA及蛋白表达,进而引起细胞增殖相关基因PCNA、细胞周期调控相关基因Cyclin E2、Cyclin D2、Cdc2及细胞凋亡调控相关基因Bcl-2蛋白表达下调有关。     

蕲蛇抗栓酶注射液稳定性的研究

为获取对蕲蛇抗栓酶(acutobin)注射液的酶活有保护作用且使制剂稳定的保护剂配方，本实验设计了7个单方及四组正交实验共16个保护剂处方．以加入保护剂的蕲蛇抗栓酶为样品，未加保护剂的为空白对照．在37℃温度加速实验下，间隔一定时间观测蕲蛇抗栓酶制剂的酶活及澄明度的变化。结果，单方氨基酸和小肽类的加入使酶活力保存率提高，而多元醇类的加入使澄明度得到改善；复方保护剂的加入对蕲蛇抗栓酶的保护作用不明显。     

糖尿病患者血清IGF-1水平与骨质疏松的相关性分析

目的探讨糖尿病患者血清胰岛素样生长因子-1（IGF-1）与骨质疏松的相关性。方法选取该院2011年1月-2013年12月收治的糖尿病患者220例,根据骨密度检测值,将120例糖尿病合并骨质疏松患者作为观察组,将100例糖尿病无骨质疏松患者作为对照组。计算糖尿病患者骨质疏松的检出率。比较2组空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）、IGF-1水平。结果 220例糖尿病患者骨质疏松的检出率为54.55%（120/220）。2组FBG及FINS水平比较差异无统计学意义（P〉0.05）。观察组IGF-1水平低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论IGF-1在骨的形成过程中起重要的作用,糖尿病患者血清IGF-1水平的降低与骨质疏松的形成有关。     

甲状腺髓样癌 5例临床病理分析

目的 探讨甲状腺髓样癌(medullary thyroid carcinoma,MTC)的临床病理学特点.方法 对清远市人民医院2010年1月至2019年9月发生的5例甲状腺髓样癌的临床资料、组织形态、免疫组化及特殊染色进行回顾性分析和研究,结合文献了解其最新进展.结果 5个病例均以颈部肿物入院治疗.肿瘤呈实性,边界较清,无包膜,切面灰黄色或灰褐色;低倍镜下见肿瘤细胞呈泡巢状、器官样、乳头状或梁状排列,细胞质少,核增大、深染,间质见多量纤维组织及血管分隔,并见较多无定形粉染物;高倍镜见细胞核呈圆形或椭圆形,核仁明显,可见核分裂象.免疫组化显示癌胚抗原(CEA)、嗜铬素A(CgA)、突触素(Syn)、白细胞分化抗原56(CD56)均阳性,甲状腺球蛋白(TG)阴性,增殖指数Ki-67约2％～5％.最后诊断均为甲状腺髓样癌,其中2例淋巴结见癌转移,余3例未送检淋巴结.随访13个月至10年,其中1例带瘤生存,余4例尚无复发迹象.结论 甲状腺髓样癌发病率较低,容易误诊;结合HE形态、免疫组化及特殊染色,可明确诊断.     

胰岛素样生长因子、瘦素与胎儿生长受限的相关性研究

目的探讨胰岛素样生长因子一1(Insulin-like growth factor-1,IGF-1)、瘦素与胎儿生长发育的关系,分析小于胎龄儿及宫内发育迟缓儿的原因。方法血清及脐血瘦素水平测定采用放射免疫法(RIA),血清及脐血IGF-1水平测定采用免疫放射法(IRMA),比较两组孕妇血清及脐血中IGF-1、瘦素水平。结果 FGR组孕妇血清瘦素为(24.56±2.37)ng/L,IGF-1为(136.45±10.46)ng/L;脐血瘦素为(5.68±0.34)ng/L,IGF-1为(66.37±3.42)ng/L,与对照组[(25.01±1.96)ng/L]比较两组孕妇血清瘦素比较无统计学意义(P>0.05)。FGR组脐血瘦素水平明显低于对照组[(9.25±1.22)ng/L],差异有统计学意义(P<0.05)。FGR组血清及脐血IGF-I水平低于对照组,两组比较有统计学意义(P<0.01)。结论瘦素与IGF一1在胎儿宫内生长和发育过程中起重要的调节作用,可评价胎儿的生长发育及营养状态。     

宫颈环形电切术联合重组人干扰素α-2b栓治疗宫颈上皮内瘤变

目的 探讨宫颈环形电切术(LEEP)联合重组人干扰素α-2b栓治疗宫颈上皮内瘤变(CIN)的临床效果.方法 选择经液基细胞学检查(TCT)、宫颈活检病理检查明确诊断为CIN Ⅰ～Ⅲ级患者82例,均于LEEP治疗前应用导流杂交法检测21种亚型人乳头瘤病毒(HPV DNA),均行LEEP治疗,观察组(41例)为LEEP术后加用重组人干扰素α-2b栓治疗3个疗程患者,分别于治疗后6、12个月行TCT及HPV DNA检测以判断两组的疗效.结果 观察组术后6个月治愈率90.2％,术后12个月治愈率100.0％;对照组术后6个月治愈率43.9％,术后12个月治愈率61.0％;两组6、12个月治愈率差异均有统计学意义(x2=19.93、19.89,均P＜0.05).结论 宫颈环形电切术联合重组人干扰素α-2b栓治疗CIN疗效优于单纯宫颈环形电切术,提高HPV清除率.     

3-脱氧葡萄糖醛酮测定方法的建立及其在临床样本中的初步运用

目的:建立3-脱氧葡萄糖醛酮(3-DG)高效液相色谱定量分析方法并初步运用于临床样本.方法:应用2,3-二氨基萘柱前衍生,采用C18色谱柱,流动相为50 mmol·L-1 Na2·HPO4·12H2O-NaH2PO4·2H2O缓冲液(pH 7.4)-甲醇-乙腈(7.0∶0.5∶2.5),检测波长为Ex/Em=271/503 nm.结果:3-DG峰呈尖峰,分离度良好;在12.5～250"μg·L-1范围内成线性关系(r=0.998 9);精密度RSD为1.79%,日内稳定性RSD为1.60%,日间稳定性RSD为3.70%;平均加样回收率为97.22%,RSD为4.58%.正常人血清中3-DG的含量为(73.5±13.1)μg·L-1,(n=6),糖尿病患者血清中3-DG含量均值为(305.9±89.1)μg·L-1,(n=6).结论:该检测方法稳定、可靠,并应用于临床,可初步定量测定人血清中的3-DG含量.     

颅内巨大动脉瘤的手术治疗

目的：颅内巨大动脉瘤虽然少见,但手术治疗困难,手术病死率和致废率仍较高。本对我院1980年以来手术治疗的30例颅内巨大动脉瘤作一回顾性分析。方法：动脉瘤瘤颈夹闭术13例,动脉瘤孤立后切除术11例;动脉瘤切除或孤立后载瘤动脉重建术2例;颈部颈内动脉结扎术2例;动脉瘤包裹术2例。结果 术后早期恢复良好为73．3％,中、重残为20％,死亡2例,病死率6．6％。动脉瘤瘤颈夹闭组的13例病人中、除1例术前Ⅳ级的前交通动脉瘤病人术后重残外,均恢复顺利。动脉瘤孤立或孤立后切除的11例病人中,4例术后早期出现不同程度的对侧肢体瘫痪,其中2例在术后3周内恢复正常,另2例分别在术后3个月和28个月恢复正常;1例大脑中动脉（MCA）动脉瘤术后因术野血肿再次手术清除血肿后,病人出院时能独立行走。单纯行颈部颈动脉结扎的2例病人出院时病情无明显变化。而仅行动脉瘤包裹术的2例病人均在术后因再出血死亡。结论 为消除巨大动脉瘤的占位效应和出血的潜在性,对颅内巨大动脉瘤提倡积极的直接手术治疗。动脉瘤瘤颈直接夹闭并保留载瘤动脉通畅是首选治疗,对必需行动瘤孤立且交叉循环不良的病例,应尽可能重建载瘤动脉。     

聚乙二醇化蛋白质阳离子树脂色谱行为的研究

以溶菌酶(LYS)作为模式蛋白,对聚乙二醇化蛋白质在不同阳离子交换填料中色谱行为进行了比较研究。考察了不同分子质量的聚乙二醇化溶菌酶(PEG-LYS)在4种阳离子树脂中的动态载样量的差异,同时比较了不同上样量对纯度和洗脱盐浓度的影响。研究结果显示PEG修饰能降低蛋白质和离子交换树脂的结合力,且随着PEG的分子质量的增加,PEG-LYS动态载样量降低。对相同分子质量的PEG-LYS,产物纯度以及PEG-LYS的洗脱盐浓度随着上样量的增加而降低,研究结果显示,PEG分子质量和上样量对纯化工艺的研究有重要意义。     

鼻烟窝动静脉内瘘在血液透析中的临床应用

目的 探讨鼻烟窝动静脉内瘘(AVF)在血液透析中的临床应用.方法 413例自体动静脉内瘘的患者分两组.其中行鼻烟窝动静脉内瘘组241例(占58.35%),前臂动静脉内瘘组172例(占41.65%),比较不同部位的内瘘使用情况.结果 和前臂远端腕部AVF(cimino 瘘)相比较,其平均血管吻合口内径,透析时的平均血流量,内瘘的平均成熟时间,内瘘用于透析的平均时间内瘘4周、1年通畅率,血栓形成和窃血综合征发生率均无显著差异(P>0.05);Cimino瘘患者动脉瘤的发生率和肿胀手综合征的发生率较鼻烟窝内瘘显著增加(P<0.05),鼻烟窝AVF对患者心功能的影响较小(P<0.05).结论 鼻烟窝AVF较Cimino瘘有更多优点,其远期通畅率高,并发症少,配合正确的使用方法及细致的护理,可达到长期、安全使用的目的 ,并可提高患者生活质量.