LncRNA HAGLR靶向miR-143/Hedgehog信号通路对HPV16/18感染的宫颈癌细胞活性作用机制

目的 研究LncRNA HAGLR靶向miR-143/刺猬因子(Hedgehog)信号通路对人乳头瘤病毒(HPV)16/18感染的宫颈癌细胞活性作用机制。方法 CaSki细胞购自美国标准生物品收藏中心。选取宫颈癌患者的癌组织(符合宫颈癌确诊标准)与癌旁5 cm宫颈组织标本各10例。将LncRNA HAGLR转染到宫颈癌细胞中后分为宫颈癌组、NC组及转染组。实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)检测LncRNA HAGLR、miR-143水平。噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖。流式细胞仪检测细胞凋亡。Western印迹检测音猬因子重组蛋白(Shh)、神经胶质瘤相关基因同源蛋白(Gli)1蛋白水平。双荧光素酶报告检测LncRNA HAGLR、miR-143、Shh、Gli1靶向。结果 宫颈癌组织中LncRNA HAGLR表达明显高于在癌旁组织(P<0.05)。宫颈癌组与NC组各指标对比无明显差异(P>0.05)。与NC组相比,转染组LncRNA HAGLR、增殖能力、Shh、Gli1水平明显降低,miR-143、凋亡率明显增加(P<0.05)。结论 LncRNA HAGLR靶向...     

磷酸钙骨水泥/印第安刺猬蛋白/聚乳酸羟基共聚物微球复合物制备及体外释放性能初步研究

目的:观察不同浓度印第安刺猬蛋白(Ihh)对小鼠骨髓来源单核巨噬细胞(BMDMs)增殖分化的影响,筛选最适浓度用于后续实验,并初步探索磷酸钙骨水泥/印第安刺猬蛋白/聚乳酸羟基共聚物(CPC/Ihh/PLGA)微球复合物的制备工艺及体外释放情况。方法:选择6～8周龄SPF级C57BL/6J雄性小鼠10只,处死后分离骨髓,纯化BMDMs并进行培养。根据培养基不同分为空白对照组、100 ng/ml Ihh组、200 ng/ml Ihh组、300 ng/ml Ihh组、400 ng/ml Ihh组和500 ng/ml Ihh组。利用CCK-8法检测不同浓度Ihh对小鼠BMDMs增殖速率的影响。采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法评估不同浓度Ihh促小鼠BMDMs破骨向分化能力。采用荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同浓度Ihh对小鼠BMDMs破骨向分化相关基因mRNA表达的影响。应用复乳溶剂挥发法制备Ihh/PLGA微球。利用扫描电子显微镜观察微球形态并计算其粒径大小。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测微球中Ihh包封率。最后制备CPC/Ihh/PLGA微球复合物并对其体外释放...     

人参皂苷Rd通过SHH信号通路促进MCAO模型大鼠血管新生机制研究

目的 探讨人参皂苷Rd对大脑中动脉闭塞（MCAO）模型大鼠血管新生的影响及相关机制。方法 40只SD大鼠随机数字表法分为假手术组、模型组、人参皂苷Rd组（Rd组）、人参皂苷Rd+环靶明（CYC）组（Rd+CYC组）,每组10只。采用线栓塞法建立MCAO模型大鼠,假手术组仅分离左侧颈总动脉、颈外动脉和颈内动脉。造模成功后,Rd组大鼠按照50 mg/kg给予人参皂苷Rd,Rd+CYC组按50μg/kg给予CYC腹腔注射,假手术组和模型组给予同等剂量的生理盐水,每天给药1次,连续给药2周。各组大鼠神经功能评分,TTC方法检测脑梗死体积,显微镜下观察脑组织毛细血管密度,蛋白质免疫印记检测血管生成相关分子和声波刺猬信号蛋白（SHH）、血管内皮生长因子（VEGF）、血管紧张素-1(ANG-1)、血管紧张素-2(ANG-2)蛋白表达水平。结果 与模型组比较,Rd组大鼠神经功能评分显著降低[（1.000±0.471）分比（3.100±0.738）分,P<0.01];脑梗死体积显著减少[（18.120±3.735）%比（33.920±2.954）%,P<0.01];脑梗死区域毛细血管数量显著...     

丹参含药血清对HSCs中Smo和α-SMA表达的影响

目的:探讨丹参含药血清对瘦素刺激的大鼠HSCs(肝星状细胞)刺猬信号通路(Hedgehog信号通路)Smo(膜蛋白受体)和α‐SMA(α肌动蛋白)表达的影响。方法:大鼠60只分为3组,给予丹参水煎剂、生理盐水、秋水仙碱连续灌胃10天制备含药血清。将处于对数生长期的HSCs分为7组:空白对照组、模型组、抑制剂组、丹参组、激动剂组、激动剂+丹参组、秋水仙碱组。除空白对照组外,其余各组均予100ng/ml瘦素刺激24 h,各组经含药血清干预后置于37℃、5%CO2孵箱中培养。24 h后收集细胞,采用MTT比色法检测丹参含药血清对肝星状细胞增殖情况,RT-PCR法测定Smo mRNA、α‐SMA mRNA的表达,采用Westernblot法测定Smo、α‐SMA蛋白的表达情况。结果:经瘦素刺激的大鼠HSCs中Smo mRNA、Smo蛋白和α‐SMA mRNA、α‐SMA蛋白表达均明显增加。抑制剂组、丹参含药血清、秋水仙碱干预后,Smo蛋白和α‐SMA mRNA、α‐SMA蛋白表达明显减少。抑制剂组、丹参含药血清干预后Smo mRNA显著降低,秋水仙碱干预后Smo mRNA的表达明显降低。在模型组的基础上加入激动剂充分活化后,Smo mRNA、Smo蛋白和α‐SMA mRNA、α‐SMA蛋白表达均明显增加。用丹参含药血清干预激动剂组后,Smo mRNA、Smo蛋白和α‐SMA mRNA、α‐SMA蛋白表达显著降低。结论:丹参含药血清可以调控由瘦素诱导活化的HSCs中Smo和α‐SMA的表达,从而抑制HSCs的活化。     

联盟就像刺猬取暖

春寒料峭之际,国内药品流通领域"联盟"之声扰扰攘攘:先是五大商业巨头--北医股份、上医股份、广州医药股份、重庆医药股份、天津太平集团结盟;而为了应对五大联盟,抗生素制药企业华北制药也与太极集团牵手,借助后者的商业网络,以应对巨头们结盟可能带来的市场垄断之势。接着,由国内9家中小型连锁药店组成的PTO联盟宣告成立,而且和盘托出了较完备的组织结构、联盟章程、操作模式以至于产品。五大商业联盟是分销领域的整合,PTO是药店终端抱团求生,华北制药与太极之间则是工商联盟。难怪有人说,如果说前两年是"平价"年的话,今年则可称之为"联盟"年。     

印度刺猬蛋白调节成骨细胞中p38丝裂素活化蛋白激酶表达的研究

目的 观察印度刺猬蛋白(Ihh)对成骨细胞p38丝裂素活化蛋白激酶(p38 MAPK)的调节作用.方法 取子鼠颅盖骨分离培养成骨细胞,采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测成骨细胞中p38 MAPK的表达量,检测成骨细胞在不同浓度(0、10、50、200μg/L)及不同时间(0、1、2、3d)的Ihh作用下p38 MAPK的表达,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖.结果 成骨细胞表达p38 MAPK;Ihh促进成骨细胞增殖,促进p38 MAPK的表达(P＜0.05);阻断p38 MAPK信号转导通路后,成骨细胞增殖明显受抑制,但不能明显抑制Ihh刺激下的成骨细胞增殖(P＜0.05).结论 p38 MAPK在成骨细胞增殖分化中起作用,Ihh通过p38 MAPK通路促进成骨细胞增殖.     

不怕办公室“刺猬”

大家都知道，刺猬身上的刺是十分厉害的，假如你不经意间触碰到它，那种火辣辣的疼痛感，非亲身体验者决无法明白。而所谓办公室里的“刺猬”则是指这样一种人：他们具有的某种令人不愉快的性格特质，会让你浑身不自在。那么有没有办法捕捉住“刺猬”不让其挡住你的大好前途呢？这里我们例举了一些应对策略，或许能让正犯愁的你茅塞顿开！     

印第安刺猬蛋白信号通路与颞下颌关节改建间的关系

印第安刺猬蛋白(Ihh)属刺猬蛋白家族成员,参与调节胚胎发育和器官形成。Ihh通过调控其受体碎片蛋白和平滑蛋白以及下游的锌指转录因子Gli等不但维持着颞下颌关节胚胎期的正常发育,而且在脊椎动物或非脊椎动物出生后的下颌髁突和关节盘的生长改建中也起着重要的作用。本文就Ihh信号通路、Ihh参与软骨内成骨的分子生物学机制、Ihh对颞下颌关节生长发育的调控和Ihh对颞下颌关节的生物力作用等研究进展作一综述。     

刺猬蛋白和无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点家族在成骨细胞分化增殖中的作用

骨发生发育受到多种信号转导通路的调节,其中刺猬蛋白(HH)和无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点家族(WNT)信号转导通路协调成骨细胞的分化、增殖和成熟。本文就HH调节颞下颌关节的发生发育,核心结合因子-A1通过HH调节软骨细胞的增殖和成熟,HH调节梅克尔软骨分化,WNT信号转导通路在神经系统形成、成骨细胞分化增殖和全身骨骼发育中的作用,HH和WNT中的经典的β-连环蛋白促进成骨细胞分化和增殖,抑制软骨细胞和调节细胞分化和增殖等研究进展作一综述。