IMP3恶性肿瘤的诊断及预后标志物

胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白3(IMP3)是胰岛素样生长因子RNA结合蛋白家族的一员。其所含有的2个RNA识别基序和4个同源K-域使得RNA结合蛋白更加稳固并具特殊性。IMP3是一种被公认的癌胚蛋白,主要存在于发育的胚胎组织中,其表达与一些恶性肿瘤相关。IMP3特异性表达于晚期及发生转移的恶性肿瘤中,但在其相邻接的良性组织中并未发现。另外,体外研究显示IMP3能促进肿瘤细胞的增殖、黏附、侵袭。     

高危型HPVE6/E7mRNA检测对ASC-US患者的分流价值

目的分析高危型人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)E6/E7 mRNA检测对宫颈细胞学结果为未明确意义的非典型鳞状上皮细胞(atypical squamous cells of undertermined significance,ASC-US)的患者的分流价值。方法选取311例疑似宫颈病变患者同时行高危型HPV E6/E7 mRNA检测、HPV-DNA分型检测和宫颈脱落细胞的薄层液基细胞学检查(thinprep cytologic test,TCT)和细胞学结果为ASC-US患者均行阴道镜检查和宫颈活检。以病理报告为金标准,比较两种检测方法对细胞学检查结果为ASC-US的患者的检测效率。结果共85例ASC-US患者,其中慢性宫颈炎患者42例,宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ级患者23例,CINⅡ级患者7例,CINⅢ级患者13例。诊断TCT结果为ASC-US患者高级别宫颈病变的特异度比较,高危型HPV E6/E7 mRNA检测(80.0%)明显高于HPV-DNA分型检测(58.2%),差异有统计学意义(χ~2=13.458,P0.001);两组敏感度、阳性预测值、阴性预测值比较,均无统计学差异(P0.05)。结论与HPV-DNA分型检测相比,高危HPV E6/E7 mRNA检测对宫颈细胞学检测结果为ASC-US患者具有更明确的分流意义,在TCT结果为ASC-US患者的分流管理等方面均有重要的临床应用价值。     

PT、APTT临床检测中常见影响因素调查分析

目的分析PT(凝血酶原时间)、APTT(活化部分凝血活酶时间)临床检测中常见的影响因素。方法选择放置时间不同、离心时间不同以及抗凝剂与血液比例不同的标本分别测定PT、APTT值,并分析其差异。结果与立即检测相比,放置≥4 h PT延长,差异有统计学意义(P<0.05);与立即检测相比,放置≥6 h APTT延长,差异有统计学意义(P<0.05);在相同离心力下离心时间不同APTT、PT结果相比,差异无统计学意义(P>0.05);与1∶9的比例比较,血液与抗凝剂比例<1∶9或>1∶9 APTT、PT均延长,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PT、APTT临床检测中应严格控制血液与抗凝剂比例,应在4 h内完成检测。     

Smoothened沉默胚胎成纤维细胞 NIH/3T3的mRNA表达谱分析

目的 探讨通过沉默Smoothened(Smo)基因抑制Hedgehog通路后,小鼠胚胎成纤维细胞NIH/3T3中mRNA表达谱的变化。方法 提取Smo沉默和对照NIH/3T3细胞的总RNA,并进行测序。与对照组比较,分析差异表达的mRNA,通过BLAST2GO 和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)分析和预测这些差异表达mRNA的相关功能。选取差异表达mRNA进行实时定量PCR验证。结果 通过测序在Smo沉默的NIH/3T3细胞中发现有2289个mRNA差异表达,其中1646个mRNA在Smo沉默后表达下调,而643个mRNA表达上调。荧光实时定量PCR结果与测序结果一致。生物信息学分析显示,差异表达mRNA参与细胞过程、单有机体过程、生物学调节。差异表达mRNA富集在轴突导向(ko04360)、癌症通路(ko05200)、癌症中的microRNA(ko05206)等通路。利用GEPIA数据库分析CXCL12、IL-33、TGF-β2和FGF10及其受体在食管癌和正常食管组织中的表达情况,和预后的预测分析。结论 在NIH/3T3细胞中沉默Smo抑制Hedgehog通路可能会通过细胞因子CXCL12、IL-33、TGF-β2和FGF10影响肿瘤细胞的增殖。     

激素性股骨头坏死病程中股骨头局部VEGF mRNA表达的变化及意义

目的：探讨激素性股骨头坏死病程中股骨头局部血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA）表达的变化及意义，方法：新西兰大白兔36只，随机均分成正常对照组和模型组，每组18只。模型组用内毒素加激素注射造成股骨头坏死。两组动物分别于造模后6、10、14周各处后6只行股骨头组织学检查和VEGFmRNA原位杂交观察。结果：光镜观察示模型组股骨头骨小梁变细、空骨陷窝增加，成骨细胞数量减少，这些表现随着时间的推移逐渐加重，软骨下血窦计数减少，各时段均低于正常组，差异有显著性意义（P＜0．05或P＜0．01）。原位杂交显示，模型组兔的股骨头6周时血管周围有VEGFmRNA阳性表达，10例时血管、成骨细胞的表达逐渐减少，14周时稍有所增加，结论：股骨头坏死后血管修复能力下降，血管内皮细胞的功能受到破坏影响，增加股骨头局部VEGF可能有助于股骨头坏死的修复。     

肝细胞癌微血管密度与nm23-H1 mRNA表达的研究

新生血管的形成是肿瘤浸润生长及转移的必要条件 ,肿瘤组织中ＭＶＤ反映了肿瘤细胞生长微环境的改变。ｎｍ2 3基因是人类肿瘤转移表型抑制相关的基因 ,与多种人类肿瘤的转移抑制相关。我们采用免疫组织化学染色方法及原位杂交技术 ,进一步研究了ＰＨＣ病人中ＭＶＤ及ｎｍ2 3 Ｈ1ｍＲＮＡ表达之间的关系及其临床意义。资料和方法1.资料 :取自我院 1997.7～ 1999.11手术切除肝癌标本 5 8例 ,男性 4 5例 ,女性 13例 ,平均年龄4 8 2岁 (2 1～ 6 9岁 )。所有标本均经病理证实为原发性肝细胞癌 ,其中有门静脉癌栓或肝内转移者 2 8例 (48 3%)。按…     

PDGF mRNA及TGF-β在门静脉高压症病人内脏血管重构中的表达及意义

目的　研究门静脉高压症病人脾动脉血小板源性生长因子 (PDGF)mRNA及转化生长因子 β(TGF β)的表达并探讨与门静脉高压血管病变的关系。方法　肝硬化门静脉高压病人 37例及外伤性脾破裂病人 17例 ,取脾门处脾动脉。原位杂交法检测PDGFmRNA的表达 ,免疫组化法检测TGF β的表达 ,经计算机图像处理后行统计学分析。 结果　对照组PDGFmRNA及TGF β表达为阴性或弱阳性 ,门静脉高压组PDGFmRNA及TGF β表达均明显增强 ,为中到强阳性 ,平滑肌层有明显表达。图像光密度值有显著性差异 (PDGFmRNA :73 2 6± 12 35vs 18 2 7± 5 86 ,P <0 0 5 ;TGF β:6 5 36± 9 74vs 12 17± 6 5 5 ,P <0 0 5 )。结论　门静脉高压内脏血管PDGFmRNA及TGF β的表达增加可能为高动力循环、毒血症等引起的血管损伤所诱导 ,并可加重平滑肌细胞过度增生及纤维化 ,在门静脉高压血管病变及细胞表型转化过程中有一定意义。     

烫伤合并金葡菌感染大鼠组织CD14 mRNA的改变

目的　探讨细菌脂多糖受体CD14在烫伤合并金黄色葡萄球菌 (金葡菌 )感染中的变化规律及其意义。　方法　采用大鼠 2 0 %总体表面积Ⅲ度烫伤合并金葡菌攻击造成脓毒症模型 ,动态检测心、肝、肺、肾等重要器官中CD14mRNA表达的改变 ,同时观察内毒素在动物循环及主要脏器内的分布特点。　结果　烫伤合并金葡菌脓毒症早期 ,各脏器内毒素含量即明显高于正常对照组 ,并于2～ 6h达峰值 ,其中以肝、肺组织内毒素水平升高幅度最为显著 (P <0 .0 5 )。而血浆内毒素水平亦于伤后 2h显著高于正常对照组 (分别为 0 .30 5 6EU/ml和 0 .12 5 0EU/ml,P <0 .0 5 )。与此同时 ,小肠组织中二胺氧化酶的活性明显降低 (P <0 .0 5 )。烫伤合并金葡菌感染后 ,各组织CD14mRNA的表达亦呈不同程度升高 (P <0 .0 5 ) ,其中肺脏改变尤为显著 ,伤后 6、2 4h肺脏CD14mRNA表达分别为正常对照组的 1.80和 1.81倍。　结论　烫伤合并金葡菌攻击可导致内毒素移位和组织CD14mR NA表达不同程度升高 ,CD14基因表达的上调可能与移位内毒素的刺激作用有关。     

生长激素促进烫伤鼠肝、创面组织胰岛素样生长因子-Ⅰ及其结合蛋白-3 mRNA的表达

目的　研究重组生长激素 (rhGH)在促进创面愈合过程中对烫伤大鼠肝、创面组织胰岛素样生长因子 Ⅰ (IGF Ⅰ ) /胰岛素样生长因子结合蛋白 3(IGFBP 3)mRNA表达的影响。方法制作大鼠深Ⅱ度烫伤模型 ,每日早上 9点皮下注射rhGH 0 .3IU/d ,疗程 1 0d。逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测肝、创面组织IGF Ⅰ /IGFBP 3mRNA表达 ;酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测血IGF Ⅰ /IGFBP 3浓度 ;免疫组织化学检测Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达。结果　用rhGH治疗 1 0d ,烫伤大鼠肝、创面组织IGF Ⅰ /IGFBP 3mRNA的表达、血IGF Ⅰ的水平较对照组明显升高 (P <0 .0 1 ) ;Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量较对照组明显增多 (P <0 .0 1 ) ;而创面愈合时间平均提前 3d。结论　rhGH可通过增加肝、创面组织IGF Ⅰ /IGFBP 3mRNA的表达 ,促进创面愈合。