蛋白质组学探索乳腺癌相关差异表达蛋白的研究进展

乳腺癌是全球女性中最常见的癌症,蛋白质组学的应用可以帮助我们更全面地认识乳腺癌的发生发展过程.通过对不同临床样品包括组织、血清、乳房抽吸液、唾液和尿液等进行蛋白质组学检测,可以筛选出不同的差异表达蛋白,并作为乳腺癌早期诊断、预后判断的生物标志物和有效的治疗靶点.作者对近年来蛋白质组学在乳腺癌研究中取得的进展作一综述     

斑马鱼sh3d19基因的结构和表达分析

目的 探索斑马鱼sh3d19基因生物信息学分析和基因表达模式。方法 利用生物信息学方法对斑马鱼sh3d19的基因结构和物种间进化等进行分析,并运用逆转录PCR技术和胚胎原位杂交技术分析斑马鱼sh3d19在胚胎早期发育中的表达。结果 斑马鱼sh3d19位于1号染色体（ZDB-GENE-050522-481）上,全长85994bp,能编码958个氨基酸,斑马鱼Sh3d19蛋白与其他物种的Sh3d19同源物具有较高保守性。逆转录PCR结果显示,斑马鱼sh3d19在胚胎发育的各个时期表达,但在bud时期表达量较低。原位杂交结果显示,sh3d19在4细胞到3.5h在胚胎所有细胞中广泛表达,在bud时期虽然表达但是表达量较低,在18体节时期该基因在体节中丰富表达,在24h时与非成熟的肌节表达。结论 sh3d19在胚胎发育早期各个时期均表达,但在体节发生时期在体节中丰富表达,该研究结果为今后探究sh3d19基因在组织器官发育中的功能及机制奠定基础。     

反向重复序列法构建神经病靶标酯酶RNA干涉表达质粒

目的构建基于通用真核表达载体的人神经病靶标酯酶双链RNA的稳定表达载体。方法在正义和反义引物两端分别加上EcoRⅠ和BamHⅠ的识别位点扩增得到神经病靶标酯酶活力域序列,构建含有目标基因的倒置重复序列的双链RNA表达载体pcDNA.NTE.dsRNA,酶切分析鉴定重组载体。脂质体法转染到Hela细胞中瞬时表达重组载体,酶活力测定其对细胞内神经病靶标酯酶活力的影响。结果成功构建了NTE双链RNA稳定表达载体pcDNA.NTE.dsRNA,表达该载体细胞内NTE活力明显下降至对照细胞的20%左右。结论采用反向重复序列法将靶标基因的编码序列正反向插入到通用真核细胞表达载体中,是构建哺乳细胞基因双链RNA稳定表达载体的有效方法。     

Cyclin D1在非霍奇金淋巴瘤中的表达和意义

细胞周期素(Cyclin D1)作为细胞周期重要的正性调节因子,在肿瘤发生发展中所扮演的角色日益成为人们关注的焦点。我们采用免疫组织化学检测Cyclin D1蛋白表达,探讨如何合理应用形态组织学,免疫组织化学为日常病理诊断MCL提供帮助。     

外源蛋白在CHO细胞株中高效表达的策略

目的:随着基因工程技术的不断发展,目前已有多种表达系统可用于生产具有医疗价值的人或动物来源的蛋白质.真核细胞中CHO细胞与其他表达系统相比具有许多优点,是目前重组糖基蛋白生产的首选体系.本文着重阐述外源蛋白在CHO细胞中高效表达的策略.     

膀胱肿瘤组织中K-ras基因表达及临床意义

Ras基因家族分H-ras、K-ras和N-ras三种基因。P21蛋白是ras基因的编码蛋白质。当K-ras基因激活后,可导致其基因产物P21蛋白过量表达。应用免疫组织化学方法检测27例膀胱肿瘤中P21蛋白表达水平,探讨K-ras基因与膀胱肿瘤发生及预后的关系。1资料和方法1.1标本收集:收集1989～1999     

乳腺导管内增生性病变和乳腺癌中CCN5蛋白的表达及其意义

目的:探讨CCN5蛋白在乳腺导管内增生性病变和乳腺癌中的表达情况及其意义.方法:应用免疫组化SP法分别检测20例乳腺正常组织(NBT),110例乳腺增生性病变包括20例普通型导管增生(UDH)、30例不典型导管增生(ADH)、60例导管原位癌(DCIS),以及90例浸润性病变(IL)包括60例浸润性导管癌(IDC)、3...     

抗菌肽SMAP-29衍生物的原核表达及纯化

目的利用大肠杆菌表达系统表达具有抗菌活性的SMAP-29衍生物,一步亲和层析法进行纯化。方法化学合成经改造的抗菌肽SMAP-29衍生物,纸片扩散法检测抗菌活性后,人工并用合成抗菌肽SMAP-29衍生物基因序列,克隆到表达载体pTYB11上,转化大肠埃希菌BL-21（DE3）,酶切和测序鉴定后,用异硫代β—D-半乳糖昔（isopropyl β—D—thiogalactoside IPTG）诱导表达融合蛋白。经几丁质亲和层析柱纯化。结朵化学合成的抗菌肽SMAP-29衍生物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和绿脓杆菌具有一定的抑菌作用,SMAP-29衍生物的编码基因按正确方向和序列插入表达载体,融合蛋白的表达量达到大肠杆菌蛋白总量的40％,几丁质亲和层析后获得了可溶性SMAP-29衍生物。结论成功构建了以融合蛋白形式表达的抗菌肽SMAP-29衍生物大肠杆菌基因工程菌,克服了抗菌肽对宿主菌的毒性,实现了用大肠杆菌高效表达和一步亲和层析纯化,为进一步检测活性及临床应用奠定了基础。     

基于加权基因共表达网络分析识别抑郁症的差异表达基因模块

目的·采用加权基因共表达网络分析(weighted gene co-expression network analysis,WGCNA)探索抑郁症相关的差异基因模块及其枢纽基因,并对差异基因模块进行生物功能注释.方法·在之前对8例抑郁症患者及8名健康对照者(对照组)的外周血mRNA微阵列分析实验的基础上,应用t检验筛选...     

沙库巴曲缬沙坦治疗阵发性心房颤动合并心力衰竭患者的疗效观察

目的 观察血管紧张素受体脑啡肽酶抑制剂（ARNI,化学名：沙库巴曲缬沙坦）治疗阵发性心房颤动（PAF）合并慢性心力衰竭（CHF）患者的临床疗效。方法 选取2021年1至6月金华市人民医院PAF合并CHF的患者168例,采用随机信封法分为ARNI组和依那普利组,各84例,两组均在常规治疗基础上加用ARNI和依那普利。连续治疗3个月,评价两组疗效,比较两组患者治疗前后心功能指标[左心室舒张末期内径（LVEDd）、左心室收缩末期内径（LVESd）、左心室射血分数（LVEF）]及血清可溶性生长刺激表达基因2蛋白（sST2）、半乳糖凝集素-3(Gal-3)水平,观察不良反应发生情况。结果ARNI组总有效率98.81%,高于依那普利组80.95%(P<0.05);治疗后两组LVEDd、LVESd下降,LVEF升高,血清sST2、Gal-3水平降低,且ARNI组改善更明显（均P<0.05）;两组不良反应发生率比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论 常规治疗基础上联合ARNI可提高PAF合并CHF治疗效果,下调血清sST2、Gal-3表达,改善心功能,且安全性良好。