伏马毒素B1时间分辨免疫荧光检测试剂盒的研制

目的： 为快速检测食品中的伏马毒素B1 (fumonisin B1,FB1),制备抗FB1的单克隆抗体并利用该抗体研制基于时间分辨免疫荧光分析方法的检测试剂盒。方法：在建立抗伏马毒素B1单克隆杂交瘤细胞株的基础上,采用小鼠腹腔注射法生产大量腹水,经Protein A亲和层析柱分离纯化、透析后得到单克隆抗体,利用所得抗体建立间接竞争性时间分辨免疫荧光分析试剂盒并优化各参数：线性范围、检出限及与黄曲霉毒素 (aflatoxins,AFB1)、呕吐毒素 (deoxynivalenol,DON)和载体蛋白BSA等的交叉反应性;对试剂盒稳定性采用37 ℃破坏实验;采用3个浓度的加标回收试验确定回收率;对19份样品及FB1玉米盲样进行检测,并同时用市售ELISA试剂盒进行验证。结果：所研制试剂盒的最低检出浓度为2 ng/mL,检测线性范围为2～512 ng/mL,线性方程为Y=-0.644X+12.872 (R2=0.998),50%抑制浓度为10.07 ng/mL,加标提取后,玉米样品3个加标水平的回收率在78.32%～116.76%之间,与AFB1、DON和BSA均无交叉反应性,试剂盒常温下可保存315 d以上。结论：本研究建立了快速、敏感检测FB1的时间分辨免疫荧光检测试剂盒。     

半导体量子点-Smad2单克隆抗体荧光探针的制备及其相关性质检测

目的制备半导体量子点-Smad2单克隆抗体荧光探针（QDs-Smad2单抗荧光探针）,并对其相关光学性质和特异免疫性识别能力进行检测。方法1）用半导体量子点和Smad2单克隆抗体通过化学偶联法制备水溶性的QDs-Smad2单抗荧光探针并纯化;2）用紫外分光光度计和荧光分光光度计分别测定QDs-Smad2单抗荧光探针的吸收光谱、发射光谱,在激光共聚焦显微镜下观察并检测QDs-Smad2单抗荧光探针的形态、荧光强度和光化学稳定性;3）转化生长因子-β1（TGF-β1）和大鼠牙乳头细胞共同孵育24 h后,采用SP免疫细胞化学法和QDs-Smad2单抗荧光探针直接免疫荧光成像法观察比较Smad2信号蛋白分子在大鼠牙乳头细胞内的分布,并检测细胞内QDs-Smad2单抗荧光探针的相关光学性质。结果半导体量子点与Smad2单抗通过共价结合形成稳定的QDs-Smad2单抗荧光探针,QDs-Smad2单抗荧光探针对大鼠牙乳头细胞内Smad2分子具有特异性的识别能力;QDs-Smad2单抗荧光探针仍具有QDs所具有的激发光谱宽,发射光谱窄,荧光度强,光化学稳定性好等优良光学特征。结论生物修饰的半导体量子点和单克隆抗体通过共价结合形成纳米分子探针后仍具有特异免疫识别能力和量子点独特的光学性质,这为半导体量子点用于活细胞内对蛋白质分子进行实时、原位、长时间动态可视化检测提供了科学基础和依据。     

胶质瘤细胞与星形胶质细胞骨架荧光成像的比较

目的探讨C6胶质瘤细胞与侵袭性相关的骨架构筑特点。方法利用免疫荧光技术对C6胶质瘤细胞及星形胶质细胞的骨架成分进行成像及比较分析,流式细胞仪检测两种细胞F-actin的荧光强度。结果C6胶质瘤细胞的三种骨架成分呈网架结构,以核为中心向外周放射,边界不齐、毛糙,此外,微丝发达密集,中间丝呈高度网络结构。星形胶质细胞三种骨架成分呈网架结构,但细胞边界整齐,微丝稀疏,中间丝发达密集,呈栏栅状排列。C6胶质瘤细胞内F-actin的荧光强度(202.54±11.06)明显强于星形胶质细胞内F-actin的荧光强度(62.64±10.23),P<0.01。结论C6胶质瘤细胞骨架呈网架结构,边界不齐、毛糙,微丝发达密集,中间丝呈高度网络结构,可能均与侵袭性相关的特征结构表现,C6胶质瘤细胞含有丰富的F-actin与侵袭性有关。     

CTNND2基因敲除对小鼠小脑发育及运动功能的影响

目的 探讨CTNND2基因敲除对小鼠小脑神经元发育和运动功能的影响及可能的机制.方法 小鼠分为2组,每组10只,均为7周龄:野生型(WT)C57BL/6J小鼠为对照组,CTNND2基因敲除纯合子(CTNND2-/-)小鼠为实验组,PCR检测CTNND2-/-小鼠的基因型.平衡木实验、悬挂实验和步态分析实验检测两组运动功...     

鬼箭羽对IgAN肾小球硬化大鼠生化及病理形态学的影响

目的：本研究通过建立大鼠IgA肾病（IgAN）肾小球硬化模型,通过生化、病理切片观察中药鬼箭羽对IgA肾病肾小球硬化大鼠的治疗作用。方法：以SD大鼠为实验动物,通过一侧肾切除,反复尾静脉注射葡萄球菌肠毒素B的方法,制作IgA大鼠肾病肾小球硬化模型。1周后,同时予以鬼箭羽水煎液灌胃治疗为中药组,苯那普利为西药对照组,从而观察生化指标、病理改变。详细内容包括：检测尿红细胞计数、24h尿蛋白定量、血肌酐、血尿素氮;应用光镜、电镜观察肾脏组织形态学的变化,运用免疫荧光技术观察模型大鼠肾小球系膜区免疫沉积;运用HPIAS-2000计算机病理图象分析系统分析毛细血管开放面积、系膜区基质沉积相对面积。结果：①生化指标结果显示,鬼箭羽组的尿红细胞计数,24h尿蛋白定量,与模型组相比明显降低（P〈0．01）,鬼箭羽还可降低IgA大鼠的血尿素氮（BuN）、血肌酐（CRE）（P〈0．05）。②病理图象方面鬼箭羽、苯那普利治疗对保护毛细血管襻开放、减少系膜基质沉积,尤其在电镜下鬼箭羽组与模型组相比显示出使。肾小球基底膜增厚减轻,内皮下及基底膜致密电子沉积物减少,上皮细胞足突融合现象减轻,都说明鬼箭羽对降低肾小球病理改变有明显作用。结论：鬼箭羽能减轻肾小球硬化大鼠的尿红细胞计数、24h尿蛋白定量,BUN、CRE,减轻肾小球的病理损害,并改善。肾功能,是防治IgA肾病性。肾小球硬化的有效中药。     

川崎病患儿血管内皮细胞抗体检测临床意义分析

探讨血管内皮细胞抗体（AECA）检测对川崎病（KD）患儿诊断及预后评价。方法　2007年8月至2008年5月在广州市儿童医院住院的5岁以下KD患儿55例,采用以人脐静脉内皮细胞和猴骨骼肌为基质的间接免疫荧光技术检测55例急性期KD患儿和43例对照组（发热对照23例,健康对照20名）血清中AECA,并通过比较AECA阴性和阳性组相应的实验室、临床指标,初步评估AECA对KD早期诊断、预后转归的临床应用价值。 结果　KD患儿中AECA阳性率为40.0%,明显高于健康对照组（5.0%, P = 0.004）,但与发热对照组差异无统计学意义（17.4%,P = 0.053）;AECA对KD诊断的灵敏度为40.0%,特异性为88.4%,阳性预测值与阴性预测值则分别为80.0%、53.5%,准确率为60.4%。抗中性粒细胞浆抗体（ANCA）、蛋白酶3抗体（抗-PR3）阳性KD患儿中AECA阳性率显著高于阴性者（P值分别为0.013、0.034）。AECA阳性组与阴性患儿组临床指标、实验室指标差异无统计学意义。AECA阳性组冠状动脉瘤发生率高于阴性组（P < 0.05）,发生动脉瘤的相对危险度为6.67（95% CI 1.2～36.1）。结论　AECA检测对KD的早期诊断价值有限,但对冠状动脉瘤的发生具有预警意义。AECA可能与抗-PR3相互协同在KD冠状动脉损伤、进展至动脉瘤过程中起一定的作用。     

本刊对来稿中组织病理学彩色图片及电子显微镜图中标尺的要求

如果作者稿件中包含有组织病理图、免疫荧光染色图、免疫组织化学图、电子显微镜图片,为了反映组织标本大小的最精确尺度,请在电子版图片的左下方附注标尺。     

抗核抗体、抗核抗体谱及其联合检测诊断自身免疫性疾病的价值比较

目的探讨抗核抗体(ANA)、抗核抗体谱(ANAs)及其联合检测对自身免疫性疾病(AID)的诊断价值。方法笔者所在医院1095例疑似AID患者作为研究对象,采集其血清标本,以间接免疫荧光法(IIF)检测其ANA,以免疫印迹法(IBT)检测其ANAs,并对结果进行统计学分析,评估ANA、ANAs及其联合检测对AID的诊断价值。结果 1095例受检者血清标本中,ANA检测阳性率为46.67%(511/1095),ANAs检测阳性率为44.75%(490/1095),两者符合率为75.80%,一致性为κ=0.511(P<0.05)。ANA阳性标本荧光核型以核颗粒型、核均质型、混合型为主,ANA(+)/ANAs(+)标本荧光核型中,着丝点型、核颗粒型、混合型阳性率较高。不同荧光滴度ANA阳性率、ANAs阳性率均存在差异,随着荧光滴度的增高,ANA阳性降低(P<0.05),ANAs阳性率升高(P<0.05)。ANAs阳性标本特异性抗体类型以Ro-52、SS-A和nRNP/Sm为主,ANAs(+)/ANA(+)标本中Ro-52、SS-A和nRNP/Sm阳性比例较高,ANAs(+)/ANA(-)标本中,Scl-70、PM-Scl、PCNA阳性比例较高。ANA+ANAs检出率显著高于ANA、ANAs检出率(P均<0.05)。结论 ANA、ANAs检测均对AID具有一定诊断价值,联合检测可提高AID检出率,降低漏检率。     

抗中性粒细胞胞浆抗体检测对临床诊断的意义

抗中性粒细胞胞浆抗体是一组以人中性粒细胞胞浆成分为靶抗原,与系统性血管炎密切相关的一类自身抗体。ANCA相关系统性血管炎(ANCA associated systemic vasculitis,AASV)是目前成人最常见的原发性血管炎。靶抗原主要为丝氨酸蛋白酶3(PR3)和髓过氧化物酶(MPO),在不同临床疾病阳性率分布不同,在累及器官的数量和程度上也有所不同。ANCA还可作为SLE病情监测的一种参考指标。ANCA的检测对临床诊断有着重要的指导意义,为了保证准确检测结果,建议实验室同时开展间接免疫荧光法(IIF)和酶联免疫吸附法(ELISA)两种方法学检测。     

正柴胡饮抗病毒作用的实验研究

对正柴胡饮的体内、体外抗病毒作用进行了研究。实验结果表明，在体外，正柴胡饮４ｍｇ／ｍｌ对所试属于ＲＮＡ型的副流感病毒等６种、属于ＤＮＡ型的单纯疱疹病毒等３种病毒的致细胞病变有抑制作用；在体内，对流感病毒ＦＭ１感染小鼠所致肺病变有显著的抑制作用，并能显著降低流感病毒在小鼠肺内的增殖量。