GST-snail融合蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备

目的制备snail多克隆抗体,为深入研究其功能和探讨其与肿瘤等疾病的相关性提供工具。方法PCR扩增编码人snail 264个氨基酸的cDNA全长片段,DNA重组入原核表达质粒pGEX-4T-1,转化大肠杆菌BL21菌株,异丙基-β—D-硫代半糖苷（IPTG）诱导表达GST／Snail融合蛋白。经电泳纯化的融合蛋白免疫新西兰白兔,制备抗血清。通过ELISA、免疫荧光和免疫印迹法鉴定血清特异性和效价。结果成功构建了pGEX-4T-1／snail原核表达载体,转化BL21后可高效表达融合蛋白GST—snail,免疫产生的snail多抗可特异检测snail真核表达载体转染COS-7细胞后snail的表达及定位情况。结论获得了效价和特异性都良好的snail抗体,适合对snail的检测应用。     

全波段紫外线照射对人T细胞亚群计数影响的体外研究

应用间接免疫荧光Ｔ细胞亚群标记技术，研究全波段紫外线（ＵＶ）照射人体外周血对Ｔ细胞亚群计数的影响。ＵＶ照射使ＣＤ和ｃｄ细胞显著减少，其作用在一定程度上与剂量有关；ＣＤ４／ＣＤ８比值也显著降低，ＣＤ细胞在ＵＶ照射后有所增加，但无统计学意义．结果表明，ＵＶ照射能选择性地作用于人Ｔ细胞不同亚群，提示ＵＶ照射可能影响Ｔ细胞不同亚群的功能，从而调控机体的免疫功能．     

抗中性粒细胞胞浆抗体及其抗原的研究进展

抗中性粒细胞胞浆抗体是近年发现的一种自身抗体。根据间接免疫荧光技术可将其分为P-ANCA和C-ANCA,相应抗原主要为MPO和丝氨酸蛋白酶3(PR_3)。C-ANCA对韦格纳肉芽肿的诊断及病情判断有重要意义。P-ANCA天特异性。ANCA可能参与血管炎的发病过程。     

时间分辨免疫荧光法定量检测癌胚抗原(CEA)试剂临床应用研究

目的对自制时间分辨免疫荧光法定量检测癌胚抗原(CEA)试剂盒进行临床应用研究,为该试剂盒临床应用及临床疗效评价提供科学依据。方法收集血清标本326份,用自制试剂盒按试剂盒操作说明书对血样进行测定,并以化学发光法(R oche)为对照方法,W ALLAC公司的CEA时间分辨免疫测定药盒(A u toDELF IATMhCEA)作为复核试验,获取相关目标实验数据,并计算得“真实性”和“可靠性”等统计学数据。结果以化学发光法为对照试验,其阳性符合率为95.83%,阴性符合率为98.73%,检验无显著性差异;自制试剂盒的定量测定值与化学发光法的测定值较为一致,相关系数达0.93,相关性好。结论试剂盒检测性能与现在临床广泛应用的方法相仿,能满足临床应用的需要。     

周期性压力作用下椎间盘细胞中整合素α3的表达

目的 探讨整合素在体外培养的椎间盘细胞力学传导中的作用。方法采用猪的椎间盘进行体外细胞的分离和培养，对细胞施加周期性液压负荷，通过对细胞的形态学观察、Western免疫印迹、免疫细胞化学染色和免疫荧光，分别检测整合素α3和肌动蛋白在周期性压力下椎间盘细胞中的表达。结果经加压后，纤维环细胞和髓核细胞均可见体积缩小，由多角形转变为细长形，α3和肌动蛋白在AF和NP细胞中的表达均明显减少。结论压力抑制了整合素α3的产生，整合素α3将力的信号转换到细胞内时，进一步影响到与其关系密切的肌动蛋白。     

ELISA和IFA法检测SARS患者病毒抗体IgG和IgM的比较

目的探讨SARS患者体内SARS病毒抗体产生的规律及比较IFA和ELISA法的特点。方法采用间接免疫荧光技术(IFA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)对43例SARS患者双份血清及10例正常人双份血清的SARS病毒IgM／IgG抗体进行检测。结果43例患者中新近感染SARS病毒40例(93．02％)，3例未检出其感染。发病10天内检出率较低，发病10天后检出率较高。阳性率随发病时间而上升。在SARS病毒IgG的检测中，ELISA法较IFA法敏感。结论IFA法和ELISA法均适合于SARS发病10天后实验室辅助诊断方法，ELISA法较IFA法敏感。     

间接免疫荧光法ANCA测定的临床应用

抗中性粒细胞胞浆抗体( antineutrophilic cytoplasmic antibodies, ANCA)是一组与人中性粒细胞胞浆成分反应、与临床一些炎症疾病密切相关的自身抗体.自从 Davies等在坏死性肾小球肾炎和系统性血管炎患者循环物中首先发现 ANCA以来,在国际上逐渐引起人们的重视.目前常用测定 ANCA的方法有间接免疫荧光法(Ⅱ F)和酶联免疫吸附法( ELISA).作者对 2001年 6月～ 2002年 6月应用Ⅱ F法测定 ANCA呈阳性结果的 26例病例进行分析,探讨其临床意义.     

三维牵引治疗骶髂关节半脱位的临床研究

目的：观察用DEK-IIIC型三维腰椎牵引床治疗骶髂关节半脱位临床效果。方法：把在临床上确诊且骨盆CR片采用五线骨盆测量法进行量化分析后,确诊为骶髂关节半脱位的86例患者随机分成两组,其中治疗组43例,对照组43例,治疗组采用三雏牵引进行骶髂关节半脱位的整复治疗,对照组采用推拿手法对骶髂关节半脱位进行整复治疗,并用两组的结果进行对比。结果：治疗组有效率为90．70％,对照组有效率为53．49％。经统计学处理,X^2=14．80,P〈0．01,具有统计学意义。说明治疗组的疗效优于对照组。结论：通过临床对比观察,采用三维腰椎牵引治疗骶髂关节半脱位不但效果好,而且安全可靠,对合并有腰椎间盘突出症的患者更具优越性。另外,五线骨盆测量法不但直观地反映了骨盆的移位,还通过比值完美地揭示了骶髂关节半脱位的方向,采用五线骨盆测量法对骨盆平片进行量化分析,不但为诊断骶髂关节半脱位提供了诊断标准,也为判断骶髂关节半脱位的整复提供了疗效标准,五线骨盆测量法有望在今后成为诊断骶髂关节半脱位的金标准,值得在临床中进一步推广应用。     

Icare回弹式眼压计的应用与护理

目的探讨Icare回弹式眼压计的临床应用以及测量时的护理。方法选取受试者112人112只眼,使用Icare回弹式眼压计分别对患者右眼角膜中央、距角膜缘2mill的0～180。子午线颞侧和鼻侧进行测量。结果Icare回弹式眼压计测得的眼压值在角膜中央、颞侧和鼻侧分别为（15．4±3．4）,（15．8±3．6）,（15．6±3．4）mmHg,角膜中央眼压和水平子午线的鼻侧、颞侧眼压数值比较差异无统计学意义（F=0．325,P〉0．05）,有显著的一致性。结论在正常眼压范围内,Icare回弹式眼压计在角膜中央、颞侧和鼻侧有明显的一致性。测量时的护理是取得准确测量结果的有效保证。