PTEN下调paxillin的表达抑制胃癌转移

目的检测PTEN(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome10,10号染色体缺失的磷酸酶与张力蛋白同源物)及桩蛋白(paxillin)在胃癌细胞系BGC823中的表达,并探讨PTEN对paxillin的调节作用及其在胃癌的发生、发展中的意义。方法体外培养胃癌细胞BGC823,利用脂质体介导法瞬时转染pEAK8及pEAK8-PTEN质粒,获得pEAK8-BGC823(pE-B)和pEAK8-PTEN-BGC823(pE-P-B)细胞,采用免疫印迹法检测PTEN、paxillin及actin蛋白水平的表达,免疫荧光检测paxillin在细胞内的定位。结果 Western blot显示,pE-P-B细胞PTEN蛋白表达水平(1.013±0.074)明显高于pE-B细胞(0.513±0.006)和BGC823细胞(0.506±0.015),而paxillin的蛋白表达水平(0.883±0.032)明显低于后两者(2.747±0.047,2.663±0.096),BGC823与pE-B相比,PTEN和paxillin蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05),Sperman等级相关分析证明PTEN蛋白与paxillin蛋白的表达呈负相关(r=-0.12,P<0.05);免疫荧光显示,paxillin在pE-B细胞伸出伪足处聚集,在pE-P-B细胞中较少。结论过表达PTEN可能通过下调paxillin的表达从而抑制胃癌的转移。     

猕猴下丘脑-垂体-肾上腺轴组织结构学特征观察

目的 观察猕猴下丘脑-垂体-肾上腺轴组织结构形态学特征,为模拟人的下丘脑-垂体-肾上腺轴的生理功能、病理反应提供参考。方法 猕猴安乐死后,完整取出下丘脑、垂体、肾上腺组织,经多聚甲醛(PFA)固定,制作石蜡切片及冰冻切片;HE染色观察基本结构及细胞分布状态;免疫组化法检测分泌的激素及受体;比较冰冻切片和石蜡切片染色的效果,对下丘脑组织的部分细胞组成进行鉴定。结果 下丘脑区域呈中空漏斗状,垂体状似豌豆,左右肾上腺位于两侧肝肾之间;HE染色显示下丘脑区域主要分布神经元和小胶质细胞,垂体分神经垂体、腺垂体,肾上腺由皮质和髓质构成;免疫组化检测到下丘脑分泌促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)并表达糖皮质激素受体(GR),垂体分泌促肾上腺皮质激素(ACTH)并表达促肾上腺皮质激素释放激素受体1(CRHR1)和GR,肾上腺表达促肾上腺皮质激素受体(ACTHR);冰冻切片免疫荧光的结果更好的显示出下丘脑中包含神经元和小胶质细胞。结论 本研究成功制作了猕猴下丘脑、垂体、肾上腺组织切片,并观察了其相关解剖学、形态学特征,为模拟人类下丘脑-垂体-肾上腺轴生理和病理反应提供参考方法。     

不同固定液固定豚鼠视网膜效果的比较

<正>近视是常见的眼科疾病^[1],高度近视眼底病变是致盲的主要原因,随着近视屈光度的增加和眼轴的增长,眼底病发生率升高,如后巩膜葡萄肿、黄斑劈裂、黄斑出血、豹纹状眼底等^[2]。因此近视防控是社会关注的焦点,也是研究的热点。而豚鼠是建立近视模型中最常用的实验动物,其视网膜组织的病理切片在实验中有着重要作用,但因视网膜结构复杂,在制作视网膜组织病理切片时,易出现视网膜断裂折叠、细胞固缩、胞核不清等问题,影响实验研究。     

甲型肝炎病毒灭活试验方法的研究 Ⅰ、甲型肝炎病毒在不同细胞株中的增殖及其免疫荧光法检测

为解决使用细胞培养法进行甲型肝炎病毒灭活试验,经实验证明NJ-3株甲型肝炎病毒可在人肝癌细胞PLC/PRF/5株中快速复制增殖。用免疫荧光法检测,在维持培养5天时即可观察到细胞内典型的HAV特异性荧光颗粒,维持培养10天,TCID_(50)达10~(5.5)。该培养系统适用于消毒学试验。     

过氧化物酶-抗过氧化物酶复合物(PAP)检测血清抗核抗体

目的 探讨过氧化物酶－抗过氧化物酶复合物（PAP）检测血清抗核抗体（ANA）的实用性。方法 以小鼠肝细胞为基质,对PAP方法测定血清ANA的滴度、核型进行了方法学检测,并同时与间接免疫荧光法相比较,测定了203例正常人及46例风湿病患者的血清ANA。结果 PAP法敏感性高于IIF法,滴度是IIF法的10－640倍。PAP可提高血清ANA的阳性检出率,还可提高核型的清晰度。结论 PAP法适用于缺乏荧光显微镜的基层医院开展ANA的检测。     

中国人群中甲型肝炎总抗体水平及其免疫性的研究

目的研究我国健康人群中甲型肝炎总抗体水平及其免疫性,以便更好地做好甲型肝炎的防治工作.方法采用法国梅里埃(BioMerieux)公司mini VIDAS全自动免疫荧光分析仪检测296例来我院移民体检的健康人甲型肝炎总抗体水平.分析其阳性率.结果296例标本中,218例HAV总抗体浓度≥20IU/L,阳性率为73.6%;其中有134例＞400IU/L,占阳性人数的61.5%,占总人数的45.3%.结果分析显示,老年组中HAV总抗体水平阳性率最高,达91.4%.成人组次之,为74.9%,少儿组阳性率最低,为49.2%.结论我国健康人群中曾获得HAV感染的比率非常高,大多数人都产生了很高浓度的特异性抗体,接受了甲肝病毒被动免疫.此现象应引起足够的重视,做好其防治工作.     

蓝光照射对小鼠视网膜形态和功能的损伤作用

目的通过观察蓝光照射对C57BL/6J小鼠视网膜形态和功能的影响,探讨非渗出性年龄相关性黄斑变性(AMD)的模型。方法采用投币法将20只8周龄清洁级C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常对照组和蓝光照射组。蓝光照射组小鼠暗适应24 h后暴露于10000 lx蓝光下5 d,正常对照组小鼠按12 h/12 h正常光照/黑暗的周期饲养于正常光照环境5 d。采用光相干断层扫描成像(OCT)活体检查各组小鼠视网膜厚度变化,采用视网膜电图(ERG)检查各组小鼠视网膜功能变化。于光照结束后24 h采用颈椎脱臼法处死小鼠并制备眼球壁标本,采用免疫荧光染色法测定小鼠视网膜中视紫红质(Rho)、紧密连接蛋白(ZO-1)和β-catenin蛋白表达。结果蓝光照射组小鼠视网膜上部和下部距视盘200、400、600、800和1000μm处视网膜外核层厚度均较正常对照组变薄,差异均有统计学意义(均P<0.05)。蓝光照射组小鼠暗适应和明适应b波振幅分别为(305.50±41.52)μV和(119.50±6.67)μV,分别低于正常对照组的(415.50±28.77)μV和(139.75±8.26)μV,差异均有统计学意义(均P<0.05)。正常对照组小鼠RPE细胞呈正六边形,视网膜各层形态规则,Rho、ZO-1和β-catenin荧光较强;蓝光照射组小鼠RPE细胞形态不规则,ZO-1染色减弱或消失,β-catenin染色和Rho蛋白荧光强度减弱。结论蓝光照射小鼠视网膜变薄,视网膜功能减弱。     

超微超顺磁性氧化铁粒子增强磁共振成像在骨质疏松症的初步实验研究

<正>目前对于骨质疏松症(OP)的影像学研究主要集中于双能X线吸收测量法(dual-enery X-ray absorptiometry,DEXA)和定量CT(quantitative computed tomography,QCT)。DEXA反映的是骨的面积密度,不能准确分析骨松质和骨皮质对骨强度和骨代谢的不同影响。QCT敏感性高,准确性好,是目前唯一能分别测量松质骨和皮质骨密度的方法[1]。近年来磁共振成像(MRI)研究骨质疏松骨微结构逐渐增多,有报道显示[2],利用高分辨率MRI对骨小梁微细结构的显示优于低场强