乳腺癌免疫毒素的协同抗癌作用

Three anti-breast carcinoma monoclonal antibodies 317G5, 260F9 and 741F8 linked to ricin A chain (rRTA) were selected for the present investigation. Attempts were made to understand the relative efficiency of these immunotoxins in relation to: a) binding, b) internalization, and c) clonogenic suppression of breast cancer cells in vitro. The results indicated that 317G5-rRTA combined with 260F9-rRTA had synergistic antitumor activity against SKBr3 breast carcinoma cell line. Individually, 10 micrograms/ml 260F9-rRTA or 317 G5-rRTA alone could only eliminate 2-3 logs of clonogenic SKBr3 cells. When used in combination, 260F9-rRTA and 317G5-rRTA, 1 microgram/ml each, could kill 4 logs of clonogenic tumor cells. The mechanism of the synergistic action is discussed.     

靶向uPAR 的免疫毒素对人胶质母细胞瘤及其血管生成的影响( 英文)

目的：观察靶向尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR) 的免疫毒素DTAT 和DTATEGF 对人胶质母细胞瘤体外和祼小鼠脑内生长的影响。方法：MTT 法检测靶向毒素DTAT,DTATEGF 对体外培养的人胶质瘤U87-luc 细胞系及人脐静脉细胞系(HUVEC) 的增殖影响。建立祼小鼠脑内荧光素酶标记的人胶质母细胞瘤模型。加强对流给药(CED) 方式瘤内泵入1 μg 的DTAT,DTATEGF 或对照液,生物荧光显像(BLI) 检测肿瘤生物荧光信号强度变化,免疫组织化学检测肿瘤微血管密度(MVD)。结果：体外实验显示DTAT 和DTATEG 高效抑制uPAR 表达阳性的U87-luc 和HUVEC 细胞系增殖,DTATEGF 和DTAT 抑制U87-luc 的IC50 值分别<0.01 nmol/L 和<1 nmol/L。裸小鼠肿瘤荧光信号检测显示两治疗组的信号强度较对照组增长缓慢,差异有统计学意义(P<0.05);DTATEGF 和DTAT 组肿瘤标本的MVD 分别为 (25.1±6.5) /mm2 和(31.6±5.2) /mm2,明显少于对照组(51.3±7.4) /mm2 (P<0.01)。结论：靶向uPAR 的 DTAT 和DTATEGF 能明显抑制胶质瘤U87-luc 肿瘤细胞增殖,抑制祼小鼠脑内胶质瘤生长及其新生血管的形成。     

重组免疫毒素对同种小鼠皮肤移植排斥反应的抑制作用

目的 观察重组免疫毒素hIL-2-Luffin P1对小鼠皮肤移植排斥反应的抑制作用.方法 采用同种异体小鼠皮肤移植模型,观察hIL-2-Luffin P1对移植物存活的影响、移植后外周血T细胞亚群变化以及移植物的组织病理学观察.结果 hIL-2-Luffin P1组小鼠皮肤存活时间延长(13.86±2.11)d,与空白对照组比较相差显著(P<0.01),且与hIL-2-Luffin P1的剂量呈正相关;而Luffin P1处理组与对照组相比无明显差异.同时,移植后外周血T细胞亚群活化程度减轻,病理显示hIL-2-Luffin P1处理组移植皮肤淋巴细胞浸润较轻.结论 hIL-2-Luffin P1能够抑制T细胞的异常活化,从而抑制免疫排斥反应,达到延长移植物存活时间的目的 .     

人胰腺核糖核酸酶的基因克隆、蛋白表达与活性测定

目的：构建人胰腺核糖核酸酶（hpRNase）原核表达载体、获得纯化hpRNase蛋白,为构建乳腺癌单链免疫毒素奠定基础。方法：针对编码hpRNase成熟蛋白基因的cDNA序列设计相应的引物,通过反转录PCR技术,从一例胰腺切除患者的组织标本中,扩增出编码hpRNase成熟蛋白的cDNA序列,亚克隆入表达载体pPROEX—HTb;在大肠杆菌BL21中经1PTG诱导融合蛋白表达,并用镍离子交换树脂进行蛋白纯化;通过RNA水解实验验证hpRNase重组蛋白的活性。结果：经PCR、酶切、测序等方法鉴定,hpRNase cDNA正确克隆人pPROEX—HTb表达载体;IPTG可诱导载体表达分子量约20kD的蛋白产物,经Westerm blot验证可与抗hpRNase抗体发生特异性反应;经镍离子交换树脂纯化后的重组蛋白可有效降解RNA。结论：成功构建hpRNase原核表达载体,并获得有RNA降解活性的hpRNase重组蛋白,为进一步构建乳腺癌单链免疫毒素奠定了基础。     

天花粉(TCS)-5A(10)2免疫毒素裸鼠体内的导向抑瘤作用

单抗具有高度的特异性和多样性,因此以单抗为导向载体的抗肿瘤导向药物的研究在不断发展,并取得了良好的治疗效果。研究表明,单抗毒素偶联物对肿瘤细胞的杀伤活性比无关抗体偶联物的活性强,在体内具有靶向性,使毒素更易于与肿瘤细胞结合,大大提高了游离毒素对肿瘤细胞的杀伤率,降低了其对正常细胞的毒副作用。因此,单抗作为治疗的导向载体具有巨大的潜力。随着抗癌药物研究的发展,新型抗体与新型药物的结合为研制抗肿瘤导向药物展示了广阔的前景。材料与方法ＴＣＳ－５Ａ（１０）２免疫毒素由本室研制［１］,人肺腺癌细胞和Ｂａｌ…     

免疫毒素清除人骨髓中克隆化白血病细胞的研究——Ⅰ.抗CD_7免疫毒素的制备及其细胞毒性质研究

本实验采用优化的方法通过SPDP交联抗CD_7单克隆抗体与蓖麻毒素制成免疫毒素。经MTT方法检测其对表达CD_7抗原的Molt-4及HPB-ALL细胞系均有显著特异性杀伤作用。克隆杀伤实验结果表明,该免疫毒素在10~(-10)mol/L浓度时达3个杀伤log(即清除99.9%的molt-4细胞),而在此浓度时,其只抑制21.6%的粗-单系造血祖细胞生长,从而初步证明其在自体骨髓移植中可用于清除骨髓中残留白血病细胞。     

3A1-柔红霉素对急性T细胞白血病的效果与安全性初探

应用单克隆抗体３Ａ１－柔红霉素结合物（３Ａ１－ＤＭ）临床治疗８例急性Ｔ淋巴细胞白血病患者。经初步验证，鼠源性单克隆抗体制备的导向药物输入人体内未发生严重过敏反应与毒副作用。疗程完毕后，以骨髓象为标准评价临床治疗效果，获完全缓解者３／８例（３７．５％），部分缓解４／８例（５０％），无效１／８例（１２．５％）例，总有效率达８７．５％。初步验证了微量导向药物在临床治疗中的效果。     

免疫毒素CMU15A—TCS对裸鼠移植人肺腺癌靶向杀伤效果的光 …

目的：探讨免疫毒素对裸鼠移植人肺腺癌的抗癌机理与形态变化的关系，方法：对ＣＭＵ１５Ａ－ＴＣＳ治疗后的肺腺癌标本进行了光电镜观察，结果：ＣＭＵ１５Ａ－ＴＣＳ对肺腺癌有明显的靶向杀伤作用，受损靶瘤细胞的分布与用药途径有关，肿瘤内用药的杀伤效果优于腹腔用于药，免疫毒素作用于细胞内核糖体，但在超微形态结构上很难确认出核糖体的病理改变，而以线粒体的病理变化出现的最早，最明显，结论：受损细胞内游离核糖体减少，