胃癌单克隆抗体-丝裂霉素C结合物的制备及其细胞毒特征

作者报道胃癌单克隆抗体MG11-丝裂霉素C(MMC)结合物的制备及其对肿瘤细胞的杀伤作用。首先用戊二酐处理MMC,于MMC上引入羧基,MMC衍生物与N羟基琥珀酰亚胺及2,2′-二环已基碳二亚胺反应,得到MMC活性酯,后者与抗体反应将MMC引入抗体中。经测定,每克分子抗体中引入约6～7克分子药物,结合物对人胃癌细胞KATⅢ具有较强的选择性杀伤作用,在0.56μg/ml水平(药物浓度)对肿瘤细胞杀伤牢达60％,优于游离药物(51％)及无关抗体结合物(9.3％),提示选用的胃癌单抗对MMC具有较好的导向作用。     

免疫毒素的研究进展

免疫毒素用于恶性肿瘤的导向治疗经经取得了明确的疗效。本文简要综述近年来免疫毒素的一些研究进展。     

蓖麻蛋白A链免疫毒素对免疫活性T细胞和造血祖细胞产生的影响

SOKT1 -RTA immunotoxin, which consisted of an anti-pan-T cell monoclonal antibody SOKT1 and ricin toxin A-chain, decreased the peripheral blood lymphocyte transformation in response to PHA and to alloantigen by 92.9% and 84.7%, respectively. The generation of allocytotoxic T cell was also dramatically inhibited by this immunotoxin. After treatment of human bone marrow mononuclear cells with the immunotoxin, erythroid proliferation in CFU-E test preserved 62.9%. Based on these findings, we concluded that SOKT1-RTA immunotoxin can effectively inactivate human T lymphocytes in vitro without serious toxic effect on the hematopoietic progenitor cells. It may be an effective agent in aGVHD prophylaxis.     

重组嵌合毒素Dsg3EC_(1-2)PE40对寻常型天疱疮患者T、B淋巴细胞的影响

目的探讨重组嵌合毒素Dsg3EC_(1-2)PE40对寻常型天疱疮患者外周血淋巴细胞的影响。方法对重组嵌合毒素Dsg3EC_(1-2)PE40进行表达,并分离纯化；分别以不同浓度重组嵌合毒素作用于寻常型天疱疮患者外周血淋巴细胞,通过ELISPOT法、MTT比色试验及~3H-TdR掺入试验来观察重组嵌合毒素对T、B淋巴细胞的影响。结果纯化后的重组嵌合毒素纯度达80％以上,它能够特异性与天疱疮抗体IgG结合,而与正常人IgG不结合。重组嵌合毒素可使寻常型天疱疮外周血产生抗体的B细胞数量减少约40％左右；在重组嵌合毒素作用下,T细胞的增殖、代谢较重组Dsg3EC_(1-2)明显降低,两者间差异有统计学意义(P<0．01)。结论重组嵌合毒素Dsg3EC_(1-2)PE40可以抑制寻常型天疱疮外周血B细胞的抗体产生作用,对寻常型天疱疮外周血T细胞具有明显的抑制或杀伤作用。     

免疫毒素治疗恶性血液病

免疫毒素导向治疗恶性血液病、尤其是白血病和淋巴瘤是一种非常具有吸引力的尝试性研究。动物实验研究结果表明,免疫毒素导向治疗恶性血液病取得了较为理想的疗效。     

两种免疫毒素抑制大鼠角膜内皮细胞MHC抗原表达的疗效比较

目的了解正常大鼠角膜内皮细胞在体外经γ-干扰素诱导后，MHC-I、Ⅱ类抗原异常表达的情况，并观察比较IL-2-PE66、IL-2-PE40对这种异常表达的免疫抑制作用。方法采用ACAS-570黏附式细胞分析仪和免疫荧光技术，对体外原代培养经μ-干扰素诱导的大鼠角膜内皮细胞进行MHC-I、Ⅱ类抗原表达量的测定，并观察加入IL-2-PE66、IL-2-PE40后，MHC-I、Ⅱ类抗原表达量的变化。结果未加入μ-干扰素前，MHC-I类抗原的表达量为97.8±8.1、MHC-Ⅱ类抗原无表达；经μ-干扰素诱导后，MHC-I类抗原的表达量为l006.3±13.2、MHC-Ⅱ类抗原表达量为406.5±10.5，μ-干扰素加入前后MHC-I、Ⅱ类抗原比较差异均有统计学意义（P〈0.01）。IL-2-PE66组MHC-I类抗原的表达量为598.2±12.5、MHC-Ⅱ类抗原表达量为197.5±6.8，IL-2-PE40组MHC-I类抗原的表达量为618.2±13.5、MHC-Ⅱ类抗原表达量为204.5±7.8，IL-2-PE66组、IL-2-PE40组分别与注射用水比较，MHC-I、Ⅱ类抗原间差异均有统计学意义（P〈0.05），IL-2-PE66组与IL-2-PE40组比较，MHC-I、Ⅱ类抗原间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论IL-2-PE66及IL-2-PE40均能明显抑制大鼠角膜内皮细胞在体外经μ-干扰素诱导后，MHC-I、Ⅱ类抗原的异常表达。提示2种免疫毒素IL-2-PE66、IL-2-PE40均是高特异性的强效免疫毒素,是未来抗角膜移植排斥的新型基因药物。     

抗肝癌单链免疫毒素在肝癌细胞系SMMC-7721中的表达

目的 构建分泌型抗肝癌单链免疫毒素真核表达载体并在人肝癌细胞系SMMC-7721中表达。方法 采用PCR方法在抗肝癌sFv的5′端引入引导序列使其能够在真核细胞中表达并分泌，在其下游连接人TNF-α基因，构建分泌型抗肝癌单链免疫毒素基因，并将该基因克隆人带有GFP报告基因的真核表达载体，用磷酸钙共沉淀法转染人肝癌细胞系SMMC-7721进行瞬时表达。结果 DNA序列分析证实在sFv的5′端引入正确的60bp引导肽序列，酶切鉴定证明成功构建了分泌型抗肝癌单链免疫毒素融合GFP真核表达载体，并在SMMC-7721细胞中成功地表达了融合荧光蛋白。结论 成功构建并表达了分泌型抗肝癌单链免疫毒素融合GFP基因，为肝癌免疫基因治疗的进一步研究奠定了基础。     

靶向治疗后囊混浊的研究进展

后囊混浊是白内障手术的常见并发症。残留晶状体上皮细胞在后囊的增殖、移行、纤维化生是后囊混浊形成的重要因素。用于防治后囊混浊的许多约物如道诺霉素、丝裂霉素等，因眼内的毒副作用而受到限制。靶向治疗的特异性、针对性为解决这一问题带来了希塑。综述了靶向治疗后囊混浊的研究现状及对未来的研究展望。