白血病细胞来源的树突状细胞在治疗白血病中的应用

目的:探讨免疫毒素BDI-1-PEA特异杀伤膀胱癌细胞的体外及体内研究.方法:应用MTT法检测不同浓度的BDI-1-PEA,BDI-1和PEA的混合物(BDI-1 PEA),PEA对体外癌细胞的杀伤能力.接种于裸鼠背部皮下的癌细胞长至0.3cm大小实体瘤时,于尾静脉隔日分别注入BDI-1-PEA、BDI-I、正常小鼠IgG共6次,观察不同的药物对癌的抑制作用.结果:免疫毒素BDI-1-PEA在体外抗膀胱癌细胞系E-J的作用明显优于PEA及BDI-1与PEA的混合物,在荷瘤裸鼠体内明显优于BDI-1及IgG,与对非靶细胞的细胞毒性作用相比较差异非常显著.结论:免疫毒素BDI-1-PEA是一种很有潜力的抗癌药物,为进一步临床研究奠定基础.     

直视下电切加膀胱灌注BDI-1MT治疗多发巨大膀胱癌

我院自2001年1月-2003年1月，在直视下经膀胱电切，术后膀胱灌注抗人膀胱癌免疫毒素（BDI-1MT），治疗多发巨大膀胱癌患者3例，疗效满意，现报告如下。     

新型抗癌药物：免疫毒素[英]／Lam L…∥Drug Future．-2004，29（6）．-609～612

靶向肿瘤细胞表面抗原的免疫毒素，可释放特异毒素到肿瘤细胞，而不伤害正常细胞。一旦毒素进入细胞，则通过其抑制蛋白合成或改变信号传递途径而杀死肿瘤细胞。血液系统恶性肿瘤是免疫毒素的最佳治疗对象，通常此种肿瘤表面标记呈高表达，且易于与药物结合。最早的免疫毒素之一，抗B4阻滞的蓖麻毒素，     

抗B7-H4-scFv / PE38KDEL 重组免疫毒素的表达和功能性检测

目的:构建基于抗B7-H4 单链抗体(scFv)的重组毒素anti-B7-H4-scFv-PE38KDEL,检测毒素蛋白的抗肿瘤作用。方法:通过重叠延伸PCR(SOE-PCR )技术将anti-B7-H4-scFv 基因和毒素PE38KDEL 基因进行连接,重组基因克隆到原核表达载体pET28a(+)中表达,蛋白经变复性和镍柱亲和层析(Ni-NTA)纯化后进行Western blot 鉴定;间接ELISA 和流式分析技术进行特异性鉴定。利用MTT 法和皮下移植瘤模型实验,检测毒素对体外、内肿瘤细胞的抑制作用,并对肿瘤组织进行HE染色和免疫组化分析。结果:酶联后得到重组表达载体pET28a-anti-B7-H4-scFv-PE38KDEL,纯化后的毒素蛋白对肿瘤细胞具有一定杀伤力,并且在肿瘤模型实验中能抑制体内肿瘤的生长。结论:成功构建了基于抗B7-H4 单链抗体的重组毒素表达体系,经鉴定重组毒素蛋白有良好的生物学功能活性和抗肿瘤活性。     

免疫毒素CCL25-PE38抗急性T淋巴细胞白血病实验研究

目的  探讨免疫毒素CCL25-PE38对急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）细胞系MOLT4（天然高水平表达CCR9）的杀伤作用,以期为T-ALL的靶向治疗提供基础。方法  通过流式细胞术、共聚焦显微术检测CCL25-PE38与MOLT4 细胞的结合及内化,Transwell趋化小室检测其趋化能力,细胞增殖试剂WST-1检测其细胞杀伤能力,Annexin V-FITC/PI染色检测其凋亡诱导效应,建立SCID小鼠白血病细胞异种移植肿瘤（CCR9+肿瘤）模型检测CCL25-PE38的抑瘤效果。结果  WST-1检测结果显示 CCL25-PE38 能特异性杀伤MOLT4细胞;Annexin V-FITC/PI染色显示CCL25-PE38主要通过凋亡诱导效应引起MOLT4细胞死亡;在SCID小鼠白血病细胞异种移植瘤模型中,注入CCL25-PE38能缓解CCR9+肿瘤的生长。结论  CCL25-PE38通过凋亡诱导作用引起MOLT4细胞死亡,缓解异种移植CCR9+肿瘤的生长。

     

免疫毒素治疗恶性血液病

免疫毒素导向治疗恶性血液病、尤其是白血病和淋巴瘤是一种非常具有吸引力的尝试性研究。动物实验研究结果表明,免疫毒素导向治疗恶性血液病取得了较为理想的疗效。     

免疫毒素的研究进展

免疫毒素是一组人工构建的具有特异性细胞杀伤能力的杂合分子,由毒性部分、载体部分和靶向部分三部分组成。毒性部分可以是植物、动物、微生物来源的细胞毒素,靶向部分可以是单克隆抗体或细胞因子。免疫毒素的制备有化学交联法和基因工程融合法。免疫毒素与其他抗肿瘤药物相比,具有毒性强和特异性高的优点,在肿瘤治疗中显示出巨大的应用前景。本文主要简述免疫毒素的组成及制备。     

免疫毒素192-IgG-saporin侧脑室注射建立阿尔茨海默病动物模型的实验研究

目的建立大鼠阿尔茨海默病(Alzheimer′sdisease,AD)动物模型,并观察其学习记忆能力及基底前脑胆碱能神经元改变。方法采用SD大鼠侧脑室注射192-IgG-saporin(2.5μg/5μl),21d后行Y迷宫检测,28d后处死大鼠,免疫组化观察基底前脑神经生长因子受体(NGFR)阳性神经元细胞数的变化。结果Y迷宫检测显示模型组大鼠的学习次数、记忆能力(107.38±9.34、3.75±0.71)较正常组明显下降(P<0.01)。免疫组化显示模型组损伤侧在内侧隔核(MS)和斜角带垂直支(VDB)的NGFR阳性神经元细胞数(7.50±1.77、15.00±2.27)与正常组对应侧比较分别减少81.96%和84.23%(P<0.01),MS和VDB的NGFR阳性神经元面积和周长降低(P<0.05),灰度值升高(P<0.05)。结论免疫毒素192-IgG-saporin侧脑室注射可以模拟AD行为学改变和部分病理学特征。     

PE重组免疫毒素在肿瘤导向治疗中的应用

绿脓杆菌外毒素A(PE)经过修饰后失去了与细胞结合的能力,将单克隆抗体的Fv段或细胞因子作为导向分子与修饰后的PE通过DNA重组技术融合,获得重组的免疫毒素,这种免疫毒素通过导向分子将毒素带到靶细胞,并杀伤靶细胞,因而被广泛运用于肿瘤的导向治疗。