化学物对毛发毒性的体外评价方法

目的本研究通过建立大鼠毛囊体外游离培养方法,探讨体外毛囊培养方法作为化学物毛发毒性损害评价系统的可行性,建立快速、简便的化学物对毛发毒性评价方法。方法本研究选用SD大鼠背部皮肤毛囊和触须毛囊,在Williams’E无血清培养基中进行体外游离培养,经过研究比较和统计分析,确定不同部位毛囊的选择、不同生长阶段的毛囊选取、观察时间、评价指标和样本量等要素,建立毛发毒性体外评价系统。在此基础上,以来氟米特、阿糖胞苷、米诺地尔、神经生长因子、表皮生长因子、环孢素A为受试物对该评价系统进行测试。结果通过研究比较和分析,评价系统选用出生后8~12d的SD大鼠背部皮肤毛囊为研究材料,以毛囊培养前4天为观察时间,以每日生长长度和4d净增长度为评价指标,以15枚毛囊为每组样本量。结果来氟米特平均4d净增长长度分别为(0.839±0.111)、(0.683±0.102)、(0.412±0.073)mm,与对照组比较,除2.5μg/ml组外差异均有统计学意义(P<0.05),25和50μg/ml则完全抑制毛发生长,未见毛发生长现象。阿糖胞苷平均4d净增长长度分别为(0.719±0.127)、(0.588±0.109)和(0.413±0.141)mm,与对照组比较,4d平均净增长长度差异都有统计学意义(P<0.05),而且25、50和75μg/ml3组之间,差异也都具有统计学意义(P<0.05)。对已知可促进毛发生长的受试物米诺地尔(Minoxidil)、环孢素A(cyclosporin A,CsA)、神经生长因子(nerve growth factor,NGF)、表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)进行观察。结果发现,米诺地尔在浓度为70、140和280μg/ml的对体外培养的毛囊具有促进生长的作用,毛囊4d平均净增长长度与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),在560μg/ml时毛囊4d平均净增长长度为(0.458±0.136)mm,对毛囊具有抑制生长的作用。其他受试物环孢素A(120μg/L)、神经生长因子(100μg/L)、表皮生长因子(20μg/L)均有促进毛发生长的作用,4d平均净增长长度与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论采用SD大鼠背部皮肤毛囊体外培养建立研究化学物对毛发毒性的评价系统是可行的。该系统简单易行,针对性强,周期短,取材方便,指标客观量化,经过进一步完善和验证有望成为一个化学物对毛发生长毒性和药理作用的评价方法。     

人体细胞体外转化研究进展(综述)

在癌变原理研究的实验系统中最经典的是动物诱癌模型,但是试验周期长,人力物力花费大,而且对细胞癌变过程中发生的复杂生物学现象难以进行直观的分析。嗣后,发展了哺乳动物细胞体外转化系统。由于动物试验和动物细胞体外转化获得的结论只具有相对参考价值,不可轻易地外推到人癌的发生情况,因此,采用人     

推按运经仪治疗输尿管石街11例报告

本院自2000年1月至2003年1月运用体外液电冲击波碎石治疗泌尿系结石400例，其中11例因结石大于2．5cm，碎石治疗后在输尿管形成石街，以至肾积水及肾功能损害，经中西排石药物治疗2周后，效果欠佳，后采用推按运经仪进行排石治疗，效果良好，现报告如下：     

阴道粘膜上皮细胞的分离培养和鉴定

目的 初步建立阴道粘膜上皮细胞体外培养方法,为阴道粘膜上皮研究提供实验模型.方法 取雌性新西兰大白兔阴道粘膜组织小块,胶原酶Ⅳ和胰蛋白酶联合消化分离法收集上皮细胞,接种于角朊细胞无血清培养液中静置培养、传代.动态观察细胞生长增殖情况,扫描和透射电镜观察超微结构,流式细胞仪测定细胞增殖周期,并进行免疫组织化学鉴定.结果 体外培养的阴道粘膜上皮细胞为二倍体细胞,增殖状态良好,细胞间可见桥粒连接,免疫组化角蛋白染色阳性.细胞的超微结构和免疫组化染色均具有上皮细胞特征.结论 在本实验条件下,体外培养的阴道粘膜上皮细胞具有较好的增殖能力,可作为阴道粘膜上皮研究的理想实验模型.     

同种异体血管移植及其基因治疗

基因修饰的血管内皮细胞体外培养，种植于经冻干辐照的异体血管，可以从根本上减轻异体血管移植的排斥反应和提高其远期通畅率。     

长期吸入皮质类固醇治疗哮喘可能影响骨代谢

美国加州圣地亚哥的HeartSine技术有限公司开始在垒世界范围内回收部分Samarita(商品名撒玛利亚)全自动体外电击器，包括系列号在1270～2324之间的SAM-001型、SAM-002型和SAM-003型。这些设备可能会在递送电击前自动关闭，延误冶疗或导致本可医治的患者死亡。此次回收是在收到几位用户的意见后发起的，他们称在试图充电时发现机器关闭。HeartSine公司认为一些已损坏的设备能发出更强的充电速率，导致发出警报，出现上述设备被关闭的情况。目前还没有人员伤亡。     

低能体外冲击波和低剂量间歇人重组甲状旁腺激素1-34刺激对体外培养大鼠成骨细胞增殖分化的影响

目的探讨低能体外冲击波（ESW）和低剂量间歇人重组甲状旁腺素1-34（rhPTH1-34）对体外培养大鼠成骨细胞（ROBs）增殖和成骨分化的影响。方法分别用不同次数的低能ESW刺激、不同浓度及作用方式的rhPTH1-34刺激，以及ESW和低剂量间歇性rhPTH1-34刺激共同作用于ROBs后，用细胞计数、MTY和流式细胞术细胞周期分析检测ROBs的增殖，用酶标仪检测ALP活性，用免疫组化检测I型胶原表达来观察ROBs成骨分化。结果60～150次0．18mJ／mm^2 ESW刺激、间歇性rhPTH1-34（1×10^-11和1×10^-10 mol／L）刺激以及ESW＋间歇性rhPTH1-34（1×10^-11mol／L）刺激均可显著促进体外培养ROBs细胞增殖和成骨分化（与对照组比较，P〈0．05）；其中60～150次ESW刺激＋间歇性rhPTH1-34（1×10^-11 mol／L）刺激各组作用最强。结论适当的ESW应力刺激和低剂量间歇性rhPTH1-34刺激可显著促进体外培养ROBs细胞增殖和成骨分化，两者联合应用作用最强。     

体外冲击波碎石与输尿管镜治疗输尿管结石的比较

输尿管结石常可引起肾绞痛，未能及时治疗的患者可发展至梗阻性肾病。体外冲击波碎石术（ESWL）和利用输尿管镜检查术体内碎石，是目前最常使用的两种干预措施。ESWL具有非侵入性的特点，但复治率高，而且很多医疗中心没有配备这种设备。过去几十年的发展使输尿管镜技术的成功率大大提高，并发症的发生率降低。本文的目的在于比较有关ESWL或输尿管镜治疗输尿管结石效果的随机对照研究，探讨二者的优缺点。     

力学刺激促进骨髓基质干细胞体外软骨分化

目的探讨离心力刺激对猪骨髓基质干细胞(BMSCs)体外成软骨分化的作用,以及对三维支架上构建组织工程化软骨的影响,明确力学刺激与细胞分化及组织形成的关系,为体外软骨构建提供适当参数。方法抽取8周龄猪髂嵴骨髓,应用贴壁法分选单个核细胞,体外培养扩增后获得第2代BMSCs,以5.0×107/cm3的细胞密度接种到聚羟基乙酸(PGA)制成的圆柱形三维支架上,7d后分成4组,在不同的力学条件及诱导条件下培养。8周后取材,行相关检测。结果力学诱导组形成的组织呈白色,细腻光泽,形状规则,体积无明显改变,有良好的弹性和硬度,并具有典型的软骨陷窝结构和大量软骨特异性细胞外基质,Ⅱ型胶原及丰富的聚合蛋白多糖(GAG)成分。GAG含量为(6.0±1.2)mg/g,抗压强度为(2.2±0.8)kPa,弹性模量为(7.4±1.6)kPa。各项指标均明显优于其他各组。结论力学刺激有利于促进BMSCs成软骨分化,并在三维支架材料上构建组织工程化软骨。