2007年新疆伤寒、副伤寒沙门菌耐药性监测分析

目的了解新疆2007年检出的伤寒、副伤寒沙门菌对药物的耐药情况。方法对全疆各肠道监测点分离的147株沙门菌按《伤寒、副伤寒防治手册》进行系统生化和血清学鉴定以及对24种抗生素敏感性测定。结果147株沙门菌对24种药物均有不同程度的耐药，对利福平的耐药率高达100％。147株菌中，100％耐受2种抗生素，耐受3种及以上抗生素的多重耐药株达到93．20％。全疆不同地区的沙门菌对抗生素的耐药有一定差异，但绝大多数对新霉素、利福平、链霉素、红霉素和青霉素耐药率较高。结论新疆2007年检出的沙门菌对常用抗生素耐药率高。多重耐药菌已成为优势菌株，对临床及预防性服药应引起高度关注并加强对其监测工作。     

夏季腹泻用药的常见误区

腹泻是夏季常见病，是消化系统疾病中的一种常见症状，是指大便次数较平时增多或大便性状发生改变，如粪便稀薄、含水量增加、脂肪增多、带有不消化食物或带有脓血。腹泻的原因很多，以肠道感染最常见。引起肠道感染的病原体包括病毒（轮状病毒）、细菌（痢疾杆菌、伤寒杆菌、霍乱弧菌、副溶血弧菌及葡萄球菌等）以及寄生虫（阿米巴原虫），它们分别引起小儿流行性腹泻、菌痢、伤寒、霍乱、食物中毒及阿米巴痢疾等病症。然而，不少人却在腹泻用药上存在诸多误区。     

伤寒杆菌O抗与H抗血清的制备及其应用

在微生物实验课教学中，肥大反应（widal stest）被列为本科临床专业学生实验的必修内容之一。近年来，由于抗生素的早期应用，临床随机采集的患者血清标本抗体含量很低，实验中很难出现典型的抗原抗体凝集现象，由于实验要用到抗血清，而抗血清又难以买到，价格也昂贵，为了节约经费，使用方便，我们尝试了自制抗血清，并且在实验教学中，通过制备抗血清进行抗原抗体之间免疫学反应，使学生获得有关抗原、抗体、抗原抗体问的免疫反应这些抽象的免疫学的基本知识，使教学获得了较好的效果。     

免疫大鼠肠道上皮内淋巴细胞的实验研究

目的研究口服伤寒杆菌后,大鼠小肠(十二指肠、空肠和回肠)和大肠(乙状结肠)上皮内淋巴细胞(IEL)的形态学特征及分布特点的变化,为探讨粘膜免疫的机制打下基础。方法采用免疫组化染色和电镜方法,对大鼠肠道上皮内淋巴细胞(IEL)表型进行分析,观察其形态特征。结果电镜观察：免疫后肠道淋巴细胞超微结构与对照组相比,有显著性差异;免疫组化观察：免疫后肠道各段IEL的各亚群数量明显增加,肠道各段IEL数量增加的情况有差异。结论服茵后,大鼠小肠和大肠上皮内淋巴细胞活性明显增强,是免疫反应细胞基础。IEL大量增加,进一步表明淋巴细胞在粘膜免疫中的重要作用。     

药物在体外消除肠道杆菌携带的耐药质粒pRsT98的研究

目的 探讨用中西药在体外消除肠道杆菌携带的耐药质粒pRST98的可能性。方法 将原存在于伤寒杆菌中的耐药质粒pRST98经接合转移分别导入大肠杆菌和鼠伤寒杆菌，选用双黄连和氧氟沙星对上述3种细菌进行亚抑菌浓度的消除试验，并对实验前后的受试菌分别进行K－B纸片扩散法和最小抑菌浓度法（MIC）药敏试验及质粒电泳检测。结果 两种药物在体外未能将受式菌携带的pRST98消除；但该质粒编码的耐药标志减少；部分菌株对原有药物的耐药程度明显下降。结论 双黄连和氧氟沙星能降低pRST98宿主菌的耐药性，但药物作用后同一质粒在不同宿主菌中耐药性变化的差异，显示该质粒表达的多样性和复杂性。     

Oral immunization of mice with attenuated Salmonella typhimurium expressing Helicobacter pylori urease B subunit

Objective To establish attenuated Salmonella typhimurium producing Helicobacter pylori (H. pylori) urease subunit B （UreB） and determine whether it could be used as an oral vaccine against H. pylori. Methods H. pylori (SS1 strain) UreB gene fragment amplified by PCR was cloned into the prokaryotic expression vector pTC01 after sequencing, and then transformed into attenuated Salmonella typhimurium SL3261 to acquire SL3261/pTC01- UreB. The expression of H. pylori UreB in SL3261 was detected by Western blot. Twelve weeks after oral immunization of mice,antibody responses were evaluated using serum and intestinal fluid by ELISA assay. Interferon- γ （IFN- γ） and interleukin- 10 （IL- 10） in the supernatant of spleen cells culture were also assessed by ELISA. In vitro stability of pTC01- UreB plasmid in SL3261 was confirmed by growing in Luria Broth (LB) medium to 80 generations.Results The UreB gene fragment amplified by PCR was consistent with the sequence of the H. pylori UreB as evidenced by sequence analysis. Enzyme digestion revealed that the correct pTC01- UreB was obtained. Western blot showed that a 61kDa protein was expressed in SL3261/pTC01- UreB, which could be recognized by anti- H. pylori UreB antiserum. After 80 generations of continuous culture, the recombinant plasmid pTC01- UreB was stable in SL3261 and had no obvious toxicity. Multiple oral immunizations with SL3261/pTC01- UreB could significantly induce H. pylori- specific mucosal IgA response as well as serum IgG response. Moreover, there were significant increases of IFN- γand IL- 10 in the SL3261/pTC01- UreB group. Finally, no obvious side effects for mice and no change in gastric inflammation were observed.Conclusion Attenuated Salmonella typhimurium expressing H. pylori UreB may be used as oral vaccine against H. pylori infection.     

以伤寒杆菌为载体制备小分子多肽抗血清

以伤寒杆菌为载体，采用物理吸附方法制备了１０个不同的合成多肽－载体免疫原，用这些免疫原对兔子进行免疫，所得抗血清经酶联免疫吸附法检测，具有高效价和强特异性，而且该方法具有较常规化学交联法制备免疫更原多的优点。     

左氧氟沙星治疗伤寒疗效观察

我院于1997年10月-1998年11月受北京302医院委托，协助完成部分四类新药左氧氟沙星治疗伤寒的临床验证，现总结报告如下。