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81.
目的 原核表达EV-D68结构蛋白VP1,并对其抗原性进行评价.方法 以肠道病毒68型P1基因为模板,设计引物扩增出目的片段VP1,将其连接至大肠杆菌表达载体pGEX-5X-1上.将重组表达载体pGEX-5X-1-VP1转化大肠杆菌表达菌株Rosetta(DE3)pLysS,对该工程菌进行诱导表达.菌体裂解后用SDS-PAGE电泳、Western-blot鉴定融合蛋白;对表达菌体进行超声破碎和亲和层析纯化;使用酶联免疫吸附试验方法评估目的蛋白与不同种属EV-D68阳性血清的结合能力及亲和力.结果 成功构建融合表达载体pGEX-5X-1-VP1,经过双酶切及测序鉴定均正确;成功表达和纯化出EV-D68(En-terovirus D68,EV-D68)VP1融合蛋白,经过聚丙烯酰胺凝胶电泳测定,得到与预期蛋白相对分子质量为61000大小一致的目的条带;纯化蛋白与不同种属的阳性血清可以特异性结合,与兔血清、恒河猴血清、小鼠血清的亲和力常数分别为1.6×106、3.9×105、3.1×106.结论 成功表达了EV-D68 VP1融合蛋白,为研究EV-D68 VP1蛋白的结构、功能及中和抗体筛选奠定基础. 相似文献
82.
作的研究目的是开发肿瘤特异性靶抗原高亲和力和高稳定性的抗体及其片段,来尝试研制人肝细胞癌(HCC)新的治疗制剂。肿瘤相关抗原是药物和基因传送的很好靶位,具有细胞特异性的优点。作已经研究了使用抗人肝细胞癌细胞系的单克隆抗体(Mab)AF-20作为模型系统。 相似文献
83.
目的:获得一种新型靶向人Frizzled7(Fzd7)蛋白的人源化抗体。方法:首先用重组人Fzd7蛋白(rh Fzd7)免疫BALB/c小鼠,获得鼠源抗Fzd7抗体(SHH002),并用生物膜层干涉技术(biolayer interferometry,BLI)检测SHH002的亲和力;测序获得SHH002可变区序列(V区),通过与Human Germline序列库比对选择人源化设计模板,利用Discoverystudio软件对SHH002进行人源化设计,获得人源化抗Fzd7抗体SHH002-hu,并对SHH002-hu的纯度和亲和力进行验证,最后通过MTT实验初步验证其抗肿瘤活性。结果:杂交瘤筛选技术获得高亲和力(亲和力常数KD <1. 0×10-12mol·L-1)鼠源抗Fzd7抗体SHH002; SHH002 V区序列比对Human Germline序列库,选择同源性最高的IGHV1/IGKV1作为人源化设计模板,保留对抗体结构稳定性起关键作用的鼠源氨基酸,将非关键的位点突变为人源氨基酸,获得人源化程度高达98%的人源化抗体SHH002-hu;分子排阻色谱(SEC-HPLC)... 相似文献
84.
<正>心理困扰:我这到底是怎么回事?一位咨询者这样诉说自己的困扰。我是一名小学教师,快50岁的人了。应该说,我本来是个性情挺好的人,大家也都说我很有亲和力,我也感觉自己的人缘不错。可是,这两年来我发现自己的状态不对了,特别是情绪不对劲了。在学校里我最近经常情绪失控。班里的学生稍有违纪行为,我就会大动肝火。班上的学生发生一些小问题,我也常常会感到紧张不安,担心学校领导和同事对自己有看法,忧心忡忡。 相似文献
85.
目的探讨普洱地区育龄女性TORCH感染情况及流行特点,为该地区育龄女性孕期保健提供一定的参考依据。方法收集2017年3月至2019年3月来该院进行TORCH检查的育龄女性13774例,通过磁微粒发光化学免疫分析法定量检测TORCH特异性IgG和IgM抗体,依据检测结果,按受检女性的年龄段和不同季节分别统计弓形虫(TOX)、风疹病毒(RV)、巨细胞病毒(CMV)、单纯疱疹病毒(HSV)-Ⅰ、HSV-Ⅱ的IgG和IgM抗体阳性情况。分析IgG抗体亲和力结果。结果(1)TORCH-IgG抗体检测结果中,CMV-IgG抗体阳性率最高,为92.62%,TOX-IgG抗体阳性率最低,为6.33%;TORCH-IgM抗体检测结果中,CMV-IgM抗体阳性率最高,为0.86%,TOX-IgM抗体阳性率最低,为0.30%。(2)成年人TORCH-IgG抗体(除TOX)和TORCH-IgM抗体阳性率均高于未成年人(P<0.05)。(3)不同季节TORCH-IgM抗体阳性构成比差异均无统计学意义(P>0.05)。(4)TORCH-IgG抗体亲和力检测结果以高亲和力为主。结论育龄女性常规进行TORCH筛查及IgG抗体亲和力的检查,一方面可有针对性地预防TORCH感染,另一方面可为临床鉴别TORCH急性感染提供诊断依据。 相似文献
86.
目的测定姜黄素(CUR)与人过氧化物酶体增殖物激活受体γ_1(h PPARγ_1)的亲和力和内在活性,确定CUR是否为h PPARγ_1的天然配体。方法通过放射性标记配基竞争结合实验和反式激活报告基因分别检测CUR与h PPARγ_1的结合活性和功能活性。结果 CUR与h PPARγ_1结合的半数抑制浓度(IC_(50))为(8.82±0.74)μmol/L,抑制常数(Ki)为0.72μmol/L;CUR对h PPARγ_1的半数有效浓度(EC_(50))为7.3μmol/L,最大活性倍数(E_(max))为43.3。结论 CUR不仅能与h PPARγ_1受体结合,而且能激活h PPARγ_1,可能是h PPARγ_1的天然配体。 相似文献
87.
为探索苄基异喹啉化合物与α_1-受体结合的机制,对部分化合物进行CNDO/2法量化计算。计算结果作为结构参数与α1-受体亲和力进行相关分析,表明α1-受体亲和力与最高占据轨道本征值(EHOMO)正相关,与最低空轨道本征值(ELUMO)以及ΔE(EHOMO-ELUMO)负相关。该结果提示化合物与α1-受体的结合方式之一可能是形成电荷转移复合物。 相似文献
88.
目的 探讨原发性肾病综合征 ( PNS)患者发病期及缓解期的细胞免疫状态。方法 分别采用单克隆抗体致敏红细胞检测法、白介素 2 ( IL - 2 )生物活性检测法和受体的放射性配体结合法 ,对 39例 PNS患者及 2 5例正常对照的外周血淋巴细胞亚群、IL - 2活性及高亲和力白介素 2受体 ( IL - 2 R)的表达进行检测。结果 PNS组2 2例发病期患者的 T淋巴细胞 ( CD3 )、辅助淋巴细胞 ( CD4)、抑制淋巴细胞 ( CD8)以及 IL - 2、IL - 2 R均显著低于对照组 ( P<0 .0 5 ) ;17例缓解期患者的 CD3 、CD4、IL - 2、IL - 2 R高于发病期组 ,但低于对照组 ,且与后两组的上述各项指标均有显著性差异 ( P<0 .0 5 )。结论 PNS患者发病期细胞免疫功能低下 ,缓解期有所恢复 ,但仍未达正常水平。缓解期细胞免疫功能低下可能是 PNS易于复发的原因之一。 相似文献
89.
90.
麻醉药物对高亲和力谷氨酸转运体作用的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
高亲和力谷氨酸转运体是中枢神经系统中谷氨酸浓度的重要调节者,近年来的研究发现它与麻醉及麻醉药物的脑缺血保护作用有关。 相似文献