曼氏迭宫绦虫成虫与裂头蚴乳酸脱氢酶和酯酶同工酶的研究

本文应用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法分析了曼氏迭宫绦虫成虫与裂头蚴乳酸脱氢酶(LDH)和酯酶(EST)同工酶谱。结果表明,成虫LDH同工酶带和裂头蚴一样,仅有一条带,其位置差异不显著;成虫EST显示5条带,主带有2条;裂头蚴EST显示10条带,主带有3条。     

两种不同剂型四君子膏对脾气虚模型大鼠胃肠功能、AchE及NOS水平的影响

目的:观察颗粒剂四君子膏和传统四君子膏对脾气虚模型大鼠胃肠功能、Ach E及NOS水平的影响。方法:60只SD大鼠(雌雄各半)随机分为正常组对照、模型对照组、颗粒剂四君子膏组(颗粒膏组)、传统四君子膏方组(传统膏组)、四君子汤组(汤剂组)。采用耗气破气+劳倦过度+饥饱失常法连续造模3周,复制脾气虚证大鼠模型,颗粒膏组、传统膏组、四君子汤组分别给予相应药物10 mL·kg~(-1)灌胃4周。第4周末,各组大鼠腹主动脉取血,取空肠组织,HE染色观察大鼠空肠组织病理形态学变化;通过酶联免疫法、免疫组织化学法检测各组大鼠乙酰胆碱酯酶(acetylcholin esterase,AchE)、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)水平;并计算胃残留率、小肠推进率。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清及小肠组织AchE水平显著降低、模型组NOS水平显著升高、模型组大鼠胃残留率显著升高、模型组小肠推进率显著下降(P<0.05,P<0.01);经不同剂型四君子方治疗后,治疗组AchE水平显著上升、NOS水平显著下降,与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);颗粒膏组血清AchE、空肠NOS水平及小肠推进率与传统膏组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:颗粒剂四君子膏方和传统四君子膏方两种剂型均可通过提高AchE水平,降低NOS活力改善大鼠胃肠平滑肌收缩和舒张运动,达到益气健脾的功效。因两种四君子膏剂型有差异,颗粒剂四君子膏可以通过提高AchE水平和小肠推进率,降低NOS活力起到益气健脾的功效。     

复方苁蓉益智胶囊联合多奈哌齐对阿尔兹海默病的疗效

目的探讨复方苁蓉益智胶囊联合多奈哌齐对阿尔兹海默病(AD)的疗效。方法采用随机数表法将2017年8月至2018年9月太康县人民医院收治的94例AD患者分为两组,每组47例。对照组口服多奈哌齐,联合组在此基础上加服复方苁蓉益智胶囊,两组均持续治疗6个月。比较两组疗效及治疗前后简明精神状态检查(MMSE)量表、日常生活活动能力量表(ADL)评分。结果治疗后,联合组MMSE、ADL评分均高于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。对照组和联合组治疗总有效率分别为76.60%(36/47)、93.62%(44/47),联合组治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在多奈哌齐基础上加用复方苁蓉益智胶囊,可有效提高AD治疗效果,改善患者认知功能和日常生活能力。     

对氧磷酯酶基因多态性与糖尿病肾病的关系

目的探讨对氧磷酯酶2(PON2)基因A148G多态性与糖尿病肾病的关系.方法(1)用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析法探查PON2基因A148G多态性在正常对照组、单纯2型糖尿病组、糖尿病肾病组中的基因频率分布;(2)放射免疫法检测血清免疫反应性胰岛素(IRI)、C肽(C-P)水平.结果(1)糖尿病肾病组GG基因型和G等位基因频率明显高于单纯2型糖尿病组(X2=4.26 P＜0.05,X2=4.89P＜0.05)和正常对照组(X2=4.79 P＜0.05,X2=5.49P＜0.01);(2)基因型为GG的糖尿病患者空腹血糖浓度高于基因型为GA和AA的糖尿病患者的空腹血糖浓度(F=3.90 P＜0.05,F=4.23 P＜0.05);(3)Logistic回归分析表明GG基因型是糖尿病肾病的独立变异危险因素(P＜0.05).结论PON2基因多态性与糖尿病肾病的发生有关.     

多奈哌齐上调海马神经元β2烟碱型乙酰胆碱受体的表达

目的观察多奈哌齐对β淀粉样蛋白25-35片断(Aβ25-35)诱导原代培养的海马神经元损伤的保护作用及神经元β2烟碱型乙酰胆碱受体(β2-nAChR)的表达。方法在不同时间及采用不同浓度多奈哌齐提前干预培养的海马神经元,之后用Aβ25-35诱导神经元损伤。采用倒置显微镜观察神经元形态学改变,以MTT法测量神经元活性变化,利用免疫荧光法观察不同浓度和不同时间多奈哌齐干预后Aβ25-35损伤神经元β2-nAChR表达情况,并用激光扫描共聚焦显微镜免疫荧光半定量法测量其平均相对荧光强度变化。结果多奈哌齐干预组可减轻Aβ25-35对神经元的损伤。多奈哌齐预处理组神经元β2-nAChR表达明显增加,其平均相对荧光强度明显高于Aβ25-35损伤组。结论多奈哌齐对Aβ25-35诱导损伤神经元的保护作用部分与β2-nAChR的上调有关。     

Aβ1～42对不同年龄组大鼠ChAT和AchE活性变化的实验研究

目的 观察大鼠海马注射Aβ1～42后行为学习记忆和ChAT、AchE活性的变化情况。方法 采用Y迷宫测试行为学习记忆情况和比色法测定ChAT、AchE活性变化。结果 成年、老年模型组出现了行为学习记忆障碍,同时基底前脑ChAT活性降低（P〈0．05）,而海马AchE活性变化不明显（P〉0．05）。幼年模型组基底前脑ChAT活性变化不明显（P〉0．05）,但海马区AchE活性降低（P〈0．05）。结论 ChAT活性的变化在Aβ机制中起重要作用,提高ChAT活性是治疗AD的靶点之一。     

人体尺神经显微结构三维可视化研究

目的 将人体尺神经行连续冰冻组织切片,经染色、扫描后获取尺神经连续断面二维图像信息,通过3D Nerve三维可视化软件系统勾画出完整的尺神经干三维解剖图谱.方法 取自愿捐献死亡3 h内38岁男性左侧尺神经全长(自臂丛内侧束至腕横韧带)标本1例,长约50cm,经定位、包埋、连续冰冻组织切片、乙酰胆碱脂酶组织化学染色,获取尺神经连续二维图像信息,应用3D Nerve三维可视化软件系统对尺神经内部结构进行三维重建.结果 尺神经在不同断面神经束的数量、位置及内部神经纤维的性质均有变化.应用尺神经3D Nerve三维可视化软件系统可在任意断面、任意角度观察尺神经内部的显微结构,追踪各神经束的立体行径,动态地展示尺神经内部神经束的复杂结构.结论 尺神经的3D Nerve三维可视化软件系统可真实地再现尺神经干全长及其内部各神经束的三维立体行径,为医学教学与临床修复尺神经损伤提供精确的神经任意断面三维立体解剖图像,有助于提高神经修复的疗效.     

Th1/Th2细胞因子在眼肌型重症肌无力转基因小鼠模型中的作用机制

目的 观察重组人乙酰胆碱受体(H-AChR) γ亚单位免疫HLA-DQ8转基因小鼠眼肌型实验性自身免疫性重症肌无力(oEAMG)模型体外培养上清液中Th1/Th2细胞因子水平变化,探讨其与oEAMG免疫学发病机制的联系。方法 HLA-DQ8转基因小鼠用乳化于完全弗氏佐剂(CFA)的重组H-AChR γ亚单位,或E. Coli提取物,或纯CFA分别免疫,分别于第0天、第30天和第60天共免疫3次。第3次免疫后28 d,处死小鼠后取淋巴结和脾淋巴细胞体外培养,收集培养上清液,采用ELISA法检测白细胞介素(IL)-2、γ-干扰素(IFN-γ)、IL-6和IL-10水平。结果 H-AChR γ组小鼠淋巴结及脾淋巴细胞体外培养上清液中IL-2(F=42.835,P<0.001;F=38.030,P<0.001)和INF-γ水平(F=76.332,P<0.001;F=34.865,P<0.001)均明显高于E. coli组和CFA免疫组;IL-6(F=1.325,P=0.284;F=1.935,P=0.166)和IL-10水平(F=0.908,P=0.417;F=1.189,P=0.322)与E. coli 组和CFA组差异无统计学意义。结论 Th1细胞因子在重组H-AChR γ亚单位诱导HLA-DQ8转基因小鼠所建立oEAMG模型的发病机制中可能发挥重要作用,而Th2细胞及其细胞因子作用尚不十分明确。     

脓毒症通过抑制AKT/GSK3β磷酸化导致骨骼肌细胞膜nAChRs聚集障碍

目的 探究蛋白质丝氨酸苏氨酸蛋白激酶（AKT）/糖原合成酶激酶3β（GSK3β）介导的信号通路在脓毒症导致骨骼肌细胞膜上烟碱型乙酰胆碱受体（nAChRs）聚集障碍中的作用。方法 小鼠源性C2C12肌原细胞经2%马血清诱导分化为肌管后随机分为4组：Sham组：假手术小鼠血清处理;Sepsis组：脓毒症小鼠血清处理;Sepsis+D组：脓毒症小鼠血清和二甲基亚砜（DMSO）处理;Sepsis+SB组：脓毒症小鼠血清和GSK3β抑制剂SB216763处理,各组在作相应处理前均加入Agrin蛋白诱导nAChRs聚集。血清处理 5.5 h后采用 Alexa Fluor 594-conjugated α-bungarotoxin（α-BTX）标记肌管膜上 nAChRs聚集簇,采用 Western blotting检测AKT、磷酸化AKT（p-AKT）、GSK3β、磷酸化GSK3β（p-GSK3β）、细胞质连接蛋白相关蛋白2（CLASP2）的表达水平,采用免疫共沉淀（Co-IP）检测磷酸化CLASP2（p-CLASP2）以及CLASP2与微管蛋白α-tubulin的结合水平。结果 与Sham组相比,Sepsis 组 C2C12 肌管膜上 nAChRs 聚集簇面积和密度均降低,p-AKT、p-GSK3β水平下降,p-CLASP2 水平升高,CLASP2 与 α-tubulin 的结合减少;与 Sepsis+D 组相比,Sepsis+SB 组 C2C12 肌管膜上 nAChRs 聚集簇面积和密度均增加,p-CLASP2水平降低,CLASP2与α-tubulin的结合水平增加。结论 脓毒症小鼠血清通过抑制Akt/GSK3β磷酸化导致下游信号分子CLASP2与α-tubulin结合减少,引起C2C12肌管膜上nAChRs聚集障碍。