乙型肝炎表面抗原ELISA检测假阴性样本的分析

目的 对酶联免疫吸附试验(ELISA)测定乙型肝炎袁面抗原(HBsAg)为假阴性的样本,以微粒子酶免发光法(MEIA)来检测并进行确认,提供一个处理ELISA检测HBsAg产生假阴性的方法.方法 选定武汉亚洲心脏病医院2007年8月～2008年10月ELISA测定乙型肝炎血清学标志物的样本3 831例,收集其中单乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)阳性和/或乙型肝炎e抗体及抗-HBc同为阳性而HBsAg、乙型肝炎表面抗体、乙型肝炎e抗原均为阴性的样本,符合条件的76例样本入选,所有入选的样本均用MEIA法进行HBsAg检测,并对检测为阳性的样本进行抗体中和确认试验确认.结果 76例样本中,经MEIA法检测HBsAg为阳性的样本49例,占64.5％;经抗体中和确认试验确认为阳性的样本3-3例,占43.4％.结论 ELISA检测HBsAg弱反应性样本的漏检率很高,需用更好的检测手段来确认.     

新型冠状病毒中和抗体检测方法的建立与应用

目的 建立基于微量细胞中和试验（MRNT）的血清抗新型冠状病毒（SARS-CoV-2）中和抗体的检测方法,并应用于检测新型冠状病毒肺炎（COVID-19）病例的血清抗SARS-CoV-2中和抗体水平。方法 用Vero细胞和已知滴度的SARS-CoV-2毒株对待测血清进行基于MRNT的中和抗体检测,对中和反应作用时间、Vero细胞代次等影响试验的关键因素进行验证,并用建立的方法重复4次检测8份血清样品的中和抗体效价,计算变异系数（CV）,验证方法的重复性;用建立的方法检测165份COVID-19病例血清样本的中和抗体水平并进行分析;采用磁微粒化学发光免疫分析法（CMIA）检测其中55份感染3～4周的血清样本,并与建立方法的结果比对,分析两者的分布情况及相关性。结果不同中和反应作用时间（1.0 h、1.5 h、2.0 h）及不同代次（5代、10代、15代）Vero细胞测得血清样本的中和抗体效价相同;8份血清样本重复检测4次结果的CV为0.0%～14.2%,差异无统计学意义（F=0.508,P>0.05）,表明重复性良好;建立的方法测得165份血清阳性率98.18%,中和抗体效价分布范...     

体外循环后肝素血体外中和并枸椽酸化后回输的临床观察

目的:观察体外循环(CPB)后肝素血体外中和并枸椽酸化(ACD化)后再回输对病人激活全血凝固时间(ACT)及胸液量的影响。方法:40例择期心脏瓣膜置换术病人随机分为A、B两组,A组肝素血体外中和并ACD化后回输:B组肝素血依传统方法回输后在体内中和。两组的麻醉、体外循环及停机后体内肝素中和方法相同。观测CPB后ACT值及术后4小时胸液量。结果:A组较B组ACT更接近生理值(P<0.05)。且胸液量有轻度减少(P<0.05)。结论:心脏手术CPB后肝素血体外拮抗并ACD化后再回输较传统方法存在临床操作方便、实用、可控性强的优点,在临床效果上切实改善肝素中和并能适当减少术后渗血。     

严重急性呼吸综合征患者恢复期血清的中和反应及抗体滴度变化

2002年11月以来，严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome，SARS)，首先在广东省佛山市出现，迅速在全球30多个国家和地区传播，给人民的身体健康造成严重危害，在发病早期，大部分病例表现为家庭聚集性和医院聚集性。为进一步了解SARS家庭聚集病例的流行病学特点和探讨其恢复期血清的中和反应及抗体滴度变化，对14例SARS家庭聚集性患者进行连续8个月的追踪观察。     

ELISA(双抗体夹心法)共系统检测抗-HBe与HBeAg结果分析

目的探讨用双抗体夹心法检测HBeAgEIA商品试剂盒共系统检测抗-HBe与HBeAg的可行性及结果判定方法。方法用双抗体夹心法检测HBeAgELISA试剂盒结合配套中和(竞争)抑制法检测抗-HBeELISA试剂盒中的中和试剂(HBeAg)等试剂组分共系统检测1000份随机血清(浆)标本抗-HBe与HBeAg,并分别以常规ELISA检测抗-HBe与HBeAg作平行对照。结果ELISA共系统检测抗-HBe与HBeAg易于目测;它们的比色判定临界值同常规ELISA易于设定(或使用临界值血清,检测HBeAg时也使用抗-HBe阴性对照),与常规ELISA检测比色判定无显著性差异(配对计数资料比较的χ2检验:相关检验均为P<0.005,υ=1,a=0.05;抗-HBe优劣检验(ELISA共系统检测抗-HBe前两项COV与抗-HBe临界值血清)均为P>0.900,υ=1,a=0.05;HBeAg优劣检验依次为HBeAg临界值血清:(1)P>0.900,υ=1,a=0.05,抗-HBe阴性对照;(2)0.100>P>0.050,υ=1,a=0.05,ELISA共系统检测HBeAgCOV;(3)0.100>P>0.050,υ=1,a=0.05,但χ21<χ22<χ23)。结论用双抗体夹心法检测HBeAgELISA试剂盒与配套中和(竞争)抑制法检测抗-HBeELISA试剂盒试剂组分重组共系统检测抗-HBe与HBeAg是可行的,两种试剂盒能够相互替代,在有优质现代酶标仪的实验室,可以省去常规ELISA试剂盒其中之一,实用价廉,值得推广。     

深圳市583例儿童血清CoxA16抗体检测分析

目的了解深圳市福田区0~5岁儿童血清柯萨奇病毒A16型（CoxA16）中和抗体水平及感染状况。方法应用微量细胞病变法,对2011年和2012年儿童乙肝抗体、麻疹抗体水平调查所采集的血清标本583份样本进行CoxA16中和抗体检测,并对检测结果进行统计学分析。结果 583份儿童血清中CoxA16中和抗体阳性率为23.8%（139/583）,男性阳性率为24.5%,女性阳性率为23.0%;CoxA16抗体阳性率由0~岁组的7.2%上升至5~岁组的57.7%,上升约8.0倍,≥3岁儿童阳性率迅猛增长。3岁以上儿童中和抗体滴度主要分布在1：256~1：1024,其中5岁~儿童占52.8%。结论儿童血清CoxA16中和抗体阳性率与年龄的关系密切,儿童年龄越小,抗体阳性率越低,随着年龄的增长,儿童感染CoxA16的抗体阳性率不断增加。3岁以下婴幼儿CoxA16抗体阳性率低于20%,应加强对低龄儿童手足口病监测,及早发现手足口病患者的重症表现并进行对症治疗。     

不同滴度的HBsAg血清的中和试验分析

目的了解乙型肝炎（简称乙肝）初筛滴度标本中假阳性所占比率。方法对RPHA检测HBsAg初筛滴度不同的、2006～2008年在乙肝流行病学调查中对规定初筛效价≥1∶4者955份血清的中和试验结果进行分析。结果中和试验阳性率随初筛滴度的升高而增加;初筛效价1∶41,∶8,1∶16及1∶32的血清中和阳性率分别为1.1%,7.1%,76.7%及83.8%;而初筛效价1∶64及其以上血清可100%被抗-HBs中和。结论凡初筛效价在1∶32及其以下的血清必须用中和试验证实其特异性,以排除可能存在的假阳性结果。     

离子对比色法测定硫酸阿托品滴眼液中主药的含量

目的:建立以离子对比色法测定硫酸阿托品滴眼液中主药含量的方法。方法:在一定pH值递质中,硫酸阿托品与酸性染料溴甲酚绿结合成稳定的离子对,用氯仿提取离子对,在420nm波长处测定其吸收度并计算其含量,将其与《中国医院制剂规范》采用的中和法结果进行比较。结果:2种方法所得结果含量均在规定范围内,无显著性差异。结论:本方法快捷、简便,适合医院制剂的快速分析。     

中和试验在确认HBsAg弱反应性样本中的意义

目的探讨中和试验在确认HBsAg弱反应性样本中的意义。方法对用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测出的126例HBsAg弱反应性患者的血清标本进行以微粒子酶免疫法(microparticle enzymeimmunoassay,MEIA)检测,确认样本是真或假阳性,再进行中和试验分析检测结果。结果在126例HBsAg弱反应性样本中,MEIA确认的阴性为15例,该15例用中和试验法检测也为阴性;而其余的111例用MEIA确认为阳性,它们按ELISA法测得到的S/CO值分类4组:S/CO值在3.1~5.0的48例,中和抑制率为75.5%±12.5%;在2.1~3.0的30例,中和抑制率为80.3%±5.1%;在1.1~2.0的24例,中和抑制率为70.2%±8.7%,这3组样本的中和抑制率都高于50%,均可确认为阳性;S/CO值在0.6~1.1的9例,中和抑制率为50.0%±3.1%,这组样本用中和试验无法确认。结论对于ELISA法的S/CO值>1.1的弱反应性样本,中和试验可确认其真假阳性,结果与MEIA法完全一致,但S/CO值<1.1的样本不宜用中和试验确认。