A型肉毒毒素多表位串联体的设计、表达、纯化及鉴定

目的:设计、表达两个A型肉毒毒素多表位串联体.方法:从文献报道的A型肉毒毒素(botulinum neurotoxin type A,BoNT/A)的表位及生物信息学方法预测得到的B细胞表位中遴选表位,并加入适当的辅助性元件,设计多表位串联体A、B.对其基因进行优化后,经重叠PCR方法合成串联体A、B的全长基因.分别插入原核表达载体pQE-30,再转化E.coli M15[pREP4]感受态细胞中进行诱导表达,以金属螯合亲和层析法纯化重组蛋白,并进行鉴定.结果与结论:成功设计并构建了两个多表位串联体A、B,并在E.coli中以包涵体形式获得高效表达.Ni-NTA法纯化后分别获得纯度大于92.2%、99%的重组串联体A、B蛋白,并经透析复性法复性.Western印迹和间接ELISA显示纯化、复性后的重组蛋白与抗天然BoNT/A马血清有特异性结合反应.     

应用于治疗的遗传、细胞和免疫学进展（一）

2003年举行了具有里程碑意义的庆典：纪念发现DNA结构五十周年。这是一次展示现代生物学取得非凡成就的机会。这一发现为了解基本的生物学原理铺设了道路，该原理正在开始直接应用于人类疾病的治疗。2004年另外一个标志性的周年纪念：自然医学杂志创刊十周年，在这十     

护士在职业务训练“九忌”

当前，各医院为了适应市场经济条件下的护理要求，一个群众性的护士在职业务训练热潮正在掀起，为提高护士队伍质量起到了很大的促进作用。但训练中仍存在不少问题，如有的无计划，想到哪训练就到哪；有的无检查考核，放任自流：有的泛泛学理论，与实际工作结合不紧，学用两张皮等等。这些问题严重地影响了护土在职业务训练质量的提高。为使护士在职业务训练工作既轰轰烈烈，又扎扎实实地持久开展下去，笔者认为：训练中有“九忌”需要广大同行共同力戒。     

重组人表皮生长因子应用于肛裂手术的临床研究

目的：研究外源性表皮生长因子对于肛裂手术后的手术创面愈合情况的影响。方法：肛裂手术后，治疗组患者每日用重组人表皮生长因子敷于肛管创面，对照组患者采用常规的方式换药。比较两组患者术后伤口疼痛、出血情况，以及伤口肉芽生长愈合情况。结果：治疗组在减轻术后伤口疼痛、伤口水肿和出血等方面均显著优于对照组，其平均住院时间和伤口愈合时间也显著短于对照组。结论：外源性表皮生长因子有助于肛裂术后创面的快速修复，减轻患者的痛苦。     

神经生长因子基因转染联合强化铁营养防治豚鼠爆震性聋的实验研究

Objective To study the protective effects of adenovirus-mediated human beta-nerve growth factor gene (hNGFβ) transfer combined with iron fortified nutrition on blast hearing damage in guinea pigs. Methods Deafness was induced by blast (172dB SPL) in 35 healthy guinea pigs. Seven days after noise exposure, 10 guinea pigs were inoculated with adenovirus-mediated hNGFβ (Ad-hNGFβ) into the perilymphatic space (the gene group), another 10 guinea pigs were given hNGFβ combined with iron fortified nutritional diet (the combination group), still another 10 guinea pigs were inoculated with artificial perilymphatic fluid (APF), and 5 guinea pigs served as control, given neither medicine nor noise exposure. Auditory brainstem response (ABR) threshold shifts were monitored in the guinea pigs before blast exposure and after gene transfer. Changes in cochlear morphology were examined with immunohistochemical and HE staining. Results One week after successful inoculation of hNGFβ, it was noted that Ad-hNGFβ protein was expressed in each turn of the cochlea, and its intensity was almost equal. After gene transfer in the combination group and the gene group, ABR threshold shifts at week 1 and 4 were significantly smaller than those of the APF group. HE staining showed that the number of the spiral ganglion cells in the combination group and the Ad-hNGFβ group was significantly higher than that of the control group after 4 weeks (P<0.01). Conclusions Ad-hNGFβ combined with iron fortified nutritional diet was effective in the prevention and treatment of blast hearing damage of cochlear hair cells.     

16层螺旋CT及其三维重建与多平面重组在胫骨平台骨折诊断中的应用

目的探讨16层螺旋CT(16层SCT)及其三维重建(3-D)与多平面重组(MPR)在胫骨平台骨折诊断中的应用价值。方法39例胫骨平台骨折病例经膝关节常规X线平片检查后，采用16层SCT进行膝关节的多层面螺旋CT扫描，在工作站上作3D及MPR影像后处理，就胫骨平台骨折的平片与16层SCT影像进行比较及综合分析。结果39例胫骨平台骨折中，X线平片漏诊1例髁间隆突骨折、1例内髁骨折及1例双髁骨折，此3例(7．69％)平片漏诊的骨折均为16层SCT予以诊断。16层SCT的3-D影像可清晰显示胫骨平台骨折的立体形态；MPR影像则可明确显示胫骨平台内部的骨质损伤情况如骨折的具体部位、关节面碎裂及塌陷程度、骨折移位距离。结论16层SCT能够显示X线平片难于诊断的胫骨平台隐匿性骨折；3-D及MPR成像技术十分有利于全面观察胫骨平台骨折的形态变化，是16层SCT横轴位扫描的重要补充。     

抗戊型肝炎病毒重组蛋白单克隆抗体的制备和初步应用

目的:制备抗-戊型肝炎病毒的单克隆抗体,并将其用于分析戊型肝炎病毒不同毒株结构蛋白的抗原表位。方法:采用来自墨西哥株(Mexicanstrain)的戊型肝炎病毒重组蛋白(p166Mex)免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经酶联免疫吸附试验(ELISA)法筛选阳性克隆,并将获得的单克隆抗体与戊型肝炎病毒缅甸株(Burmastrain)和美国株(USAstrain)的重组蛋白(p166Bur、p166US)进行交叉反应测定。结果:最终获得4株能稳定分泌抗-p166Mex的杂交瘤细胞株,即D8G10、E5E12、D4A3、B7E6。其中D8G10,E5E12和B7E6细胞株的培养上清液,还能分别与p166Bur和p166US重组蛋白发生阳性反应。结论:利用已获得的抗-p166Mex单克隆抗体,初步确定3种不同的戊型肝炎病毒重组蛋白(p166Bur、p166US、p166Mex)含有一种共同的抗原表位。     

01020 中外／第一鼻腔给药的PTH治疗骨质疏松症的新资料

中外／第一和三得利制药公司提前公布他们鼻腔给药的重组甲状旁腺激素(PTH)CHS-13340(SUN-E3001)(Ⅰ)的资料，在此之前，在日本进行的新的初步Ⅱ期临床试验的资料表明该产品能增加骨质疏松症病人的骨质。     

慢性肾功能衰竭非透析患者微炎症反应对重组人促红细胞生成素疗效的影响

目的：探讨慢性肾功能衰竭（肾衰）非透析患者微炎症反应对重组人促红细胞生成素（rHu-EPO）疗效的影响。方法：选择慢性肾衰非透析患者为研究对象，选定CKD分期3-4期患者共130例，测定患者血清白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α及C-反应蛋白的浓度并根据其浓度分为微炎症反应组（40例）和非微炎症反应组（90例），检测两组rHu—EPO治疗3个月时达到的血红蛋白（Hb）及红细胞（RBC）水平，研究微炎症反应对rHu-EPO疗效的影响。结果：微炎症反应组的Hb升高幅度较非微炎症反应组Hb升高幅度小，两组间比较有显著差异（P〈0．01）。结论：慢性肾衰非透析患者体内微炎症反应直接影响rHu-EPO疗效，其炎症介质水平的高低与RBC、Hb的升高幅度呈负相关。