反义EGFR寡核苷酸对血管紧张素Ⅱ促VSMC增殖的影响

目的探讨脂质体介导的反义表皮生长因子受体寡核苷酸基因转染对血管紧张素Ⅱ促大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响．方法用反义表皮生长因子受体寡核苷酸脂质体复合物转染Sprague—Dawley大鼠血管平滑肌细胞，通过RT—PCR、Western—Bloting分别检测转染后EGFRmRNA及蛋白的表达情况，用^3H—Tdr掺入率实验检测经反义表皮生长因子受体寡核苷酸转染再用血管紧张素Ⅱ刺激的血管平滑肌细胞的增殖情况，结果反义表皮生长因子受体寡核苷酸转染大鼠血管平滑肌细胞后，EGFRmRNA及蛋白的表达较正义组及对照组明显减少（P〈0．05）；用血管紧张素Ⅱ刺激后，反义组细胞的^3H—Tdr掺入较正义组及对照组明显降低，经方差分析两者有显著差异（P〈0．05），结论脂质体介导的反义表皮生长因子受体寡核苷酸转染减弱了血管紧张素Ⅱ的促血管平滑肌细胞增殖效应，证明了表皮生长因子受体在血管紧张素Ⅱ促血管平滑肌细胞增殖中起重要作用．     

尼美舒利对食管鳞癌细胞的增生抑制和诱导凋亡作用

目的研究特异性环氧化酶-2抑制剂尼美舒利对食管鳞癌细胞的增生抑制和诱导凋亡作用。方法EC109细胞与不同浓度的尼美舒利共同孵育。1)用MTT方法研究细胞增生抑制作用;2)用荧光标记的流式细胞检测技术研究尼美舒利的诱导凋亡作用;3)检测细胞培养上清液中前列腺素E2质量浓度,观察尼美舒利对环氧化酶功能的影响。结果尼美舒利抑制食管鳞癌细胞增生,呈浓度及时间依赖性;尼美舒利可诱导食管鳞癌细胞凋亡,可抑制前列腺素E2的合成。结论尼美舒利抑制食管鳞癌细胞增生诱导凋亡作用,可能是通过抑制前列腺素E2的合成而实现的。环氧化酶-2抑制剂有可能在食管鳞癌的预防及治疗上发挥重要作用。     

局部注射平阳霉素治疗鼻息肉病的机制探讨

目的:探讨平阳霉素治疗鼻息肉病的作用机制。方法:对19例经平阳霉素局部注射治疗前后的鼻息肉组织进行免疫组化染色,检测转化生长因子-β1(transforming growth factor beta,TGF-β1)的表达;采用原位杂交法(TUNEL法)检测凋亡细胞。结果:嗜酸性粒细胞凋亡指数治疗前为(20.53±7.66)%,治疗后为(44.47±8.97)%,治疗前后差异有统计学意义(P<0.01);治疗后嗜酸性粒细胞的TGF-β1阳性表达率为(74.74±5.22)%低于治疗前的(85.18±8.07)%,治疗后TGF-β1在鼻息肉组织基质中的表达低于治疗前,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:平阳霉素可通过促进嗜酸性粒细胞凋亡及减少TGF-β1在嗜酸性粒细胞和基质中的表达治疗鼻息肉病。     

NGF和GM1联合应用对坐骨神经损伤大鼠初级传入神经元的保护作用

目的:探讨联合应用神经营养因子(NGF)和神经节苷脂（GM1）对大鼠周围神经损伤后初级传入神经元的保护作用。方法: 选用SD大鼠96只，随机分为对照组、NGF组、GM1组和NGF + GM1组。将大鼠右侧坐骨神经切断，神经两断端相距5?mm，硅胶管桥接，用不同的药物处理后，于术后不同时间取出背根神经节进行研究。结果：4周时神经元数和神经传导速度，NGF+GM1组多于或快于其它各组(P＜0.01），NGF组和GM1组均多于或快于对照组(P ＜0.01）；8周时，各实验组多于或快于对照组(P＜0.01），各实验组之间差异无统计学意义（P＞0.05）。结论:周围神经损伤后，联合应用NGF和GM1对初级传入神经元的保护作用优于单用NGF、GM1，且起效早。     

结缔组织生长因子在大鼠肝纤维化发生中的作用机制初探

目的:研究结缔组织生长因子(CTGF)在大鼠肝纤维化形成中的作用机制。方法:雄性SD大鼠32只,体重250~300g,皮下注射四氯化碳(CC l4)制备大鼠肝纤维化模型,分别于注射后1、4、8周处理动物,采用免疫组化、RT-PCR、W estern b lot等方法对肝组织中CTGF的表达进行检测。结果:免疫组化、W estern b lot结果显示,CC l4注射诱导后,大鼠肝组织中CTGF的表达较正常对照明显增强,且CC l4注射1、4、8周组肝组织中CTGF的表达强度呈明显递增趋势。CTGF主要表达于肝星状细胞胞质中。RT-PCR检测结果显示CTGF mRNA的表达与其蛋白质水平的改变相一致。结论:CTGF作为一种致纤维化因子,其过表达促进肝星状细胞的活化增殖及细胞外基质的形成,从而促进大鼠肝纤维化的发生、发展。     

非小细胞肺癌中血管内皮生长因子的表达对预后的影响及评价

目的：观察在非小细胞肺癌（non-small celllung cancer,NSCLC）中,血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的蛋白表达与术后生存时间的关系.从而为预测肿瘤患者预后、综合考虑治疗措施提供帮助.方法：对49例非小细胞肺癌组织,利用免疫组化,Kaplan-Meier绘制生存曲线,Log-rank检验及Cox模型进行多因素分析观察.结果：VEGF在NSCLC组织的表达水平明显高于癌旁组织,x2检验表明两者之间差异非常显著（P＜0.01）,术后生存时间与VEGF的表达强度显著相关.结论：NSCLC中VEGF蛋白表达与术后生存时间密切相关,VEGF表达阳性者术后生存时间明显低于VEGF表达阴性者.VEGF可以作为NSCLC预后评估的指标之一.     

前列腺增生症所致膀胱出口梗阻患者膀胱平滑肌中bFGF的表达变化

患者膀胱平滑肌中碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）的表达变化。方法:同龄对照组16例患者、BPH梗阻逼尿肌稳定组24例患者和BPH梗阻逼尿肌不稳定组16例患者的膀胱壁逼尿肌组织，应用免疫组织化学SABC法检测膀胱平滑肌细胞中bFGF蛋白的表达变化。结果:bFGF在同龄对照组、BPH梗阻逼尿肌稳定组和梗阻逼尿肌不稳定组患者的膀胱平滑肌细胞中均有表达。BPH梗阻逼尿肌稳定组和梗阻逼尿肌不稳定组bFGF的表达水平均高于同龄对照组，差异有统计学意义（P＜0.05)，但BPH梗阻逼尿肌稳定组与梗阻逼尿肌不稳定组bFGF表达水平的差异无统计学意义（P＞0.05）。结论:BPH引起BOO后，膀胱平滑肌细胞中bFGF的表达水平增高与膀胱平滑肌细胞的肥大以及平滑肌细胞间胶原纤维的增多有关，但可能与逼尿肌不稳定的发生无关。     

丹酚酸B对PDGF及MDA诱导的人鼠原代肝星状细胞增殖的影响

目的：探讨丹酚酸B（SAB）对血小板生长因子（PDGF）和丙二醛（MDA）刺激的大鼠原代肝星状细胞（HSC）增殖的影响。方法：采用原位灌注法消化大鼠肝脏，108g／L Nycodenz密度梯度离心，分离HSC，以MTT法观察细胞的增殖能力。免疫组化法检测血小板生长因子受体（PDGFR）含量。结果：MDA组与正常组相比可明显增加MTT吸光度（P〈0．05），PDGF组亦较正常组明显增加MTT吸光度（P〈0．01）；1μmol／LSAB和10μmol／L SAB不仅可显著抑制MDA刺激的HSC吸光度增加（P均〈0．01），也可抑制PDGF—BB刺激的HSC吸光度增加（P均〈0．01）。PDGF及MDA作用后细胞PDGFR的表达均明显增加，而10μmol／L SAB则可抑制PDGFR的表达。结论：SAB可通过抑制PDGFR的表达而抑制体外培养HSC的增殖．这种抑制作用与SAB的抗氧化作用有一定的关系。     

经口感染弓形虫垂直传播小鼠模型的建立

目的建立经口感染弓形虫RH株速殖子垂直传播小鼠模型。方法将54只妊娠0天的BALB/c孕鼠随机分为6组,于妊娠第8天,分别用0,1000,2000,4000,8000,16000个弓形虫速殖子灌胃感染,妊娠第18天处死,记录活胎率,测定母鼠肝、胎盘和胎仔脑组织弓形虫抗原。结果经ELISA检测弓形虫循环抗原证实,孕鼠死亡率与胎盘和胚胎感染率均随感染剂量的增加而升高,而活胎率下降。1000,2000组的胎盘、胚胎未发生感染,4000组的胚胎感染率5.13%,16000组的胚胎感染率20.00%,但孕鼠的健康状况差、死亡率高,均不适宜建立弓形虫垂直传播动物模型。综合分析表明,8000组孕鼠既有较高的存活率,又可保证胎盘和胚胎较高的感染率。结论每只孕鼠灌胃感染8000个速殖子为建立弓形虫垂直传播小鼠模型的适宜剂量。     

慢性肝病患者PBMC及血浆中TGF-β_1的表达水平与肝纤维化程度的关系

目的:探讨慢性肝病患者单个核细胞(PBMC)及血浆中转化生长因子β1(TGF-β1)表达水平与肝纤维化发生发展的关系。方法:采用荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)方法检测慢性肝病患者PBMC中TGF-β1mRNA含量;ELISA方法检测血浆TGF-β1含量;采用放射免疫方法检测HA,LN,CIV,PCⅢ含量。同时对检测结果进行对比分析,以探讨各检测指标的相关性。结果:慢性乙型肝炎中重度患者及肝炎后肝纤维化患者PBMC中TGF-β1含量及血浆TGF-β1水平均显著高于正常;且与HA,LN,CIV,PCⅢ四项肝纤维化诊断指标呈正相关。结论:慢性肝病患者PBMC及血浆中TGF-β1表达水平可以作为肝纤维化的诊断指标;但能否作为早期诊断的敏感指标,仍需要临床大量试验证实。