胆汁泡蛋白ELISA检测法的建立与初步临床应用

目的 建立胆汁泡蛋白快速检测法,筛选有效的胆石症防治手段。方法 获取３３．５ｋｄ胆汁泡蛋白,通过微量抗原免疫法获得高效价抗体,建立ＥＬＩＳＡ标准曲线;并应用ＥＬＩＳＡ法测定正常人、胆石症患者胆汁和血清中泡蛋白含量,同时观察不同溶石防药和利胆冲剂、胆酸钠等对泡蛋白的影响。结果 建立了ＥＬＩＳＡ标准曲线,其曲线方程为Ｙ＝０．０３５Ｘ（ｒ＝０．９９）;正常人胆汁和血清中３３．５ｋｄ泡蛋白含量都明显较胆固     

p27~(KIP1)在骨巨细胞瘤中表达的意义

目的 :研究骨巨细胞瘤中 p2 7KIP1 的表达 ,探讨其与骨巨细胞瘤发生病理分级与预后的关系。方法 :应用免疫组化 S- P法检测 40例骨巨细胞瘤石蜡标本中 p2 7KIP1的表达。结果 :p2 7KIP1的表达与骨巨细胞瘤的病理分级呈明显相关。 p2 7KIP1在 40例骨巨细胞瘤中总表达阳性率为 45 .0 % (18/40 ) ,其中 、 级为 5 7.1% (16 /2 8) , 级为16 .7% (2 /12 ) ,组间差异显著。结论 :p2 7KIP1蛋白在 级骨巨细胞瘤表达阳性率较 、 级明显减低 ,对骨巨细胞瘤的诊断和分级有意义 ,可作为诊断、分级和预后判定的指标之一。     

免疫磁珠法分选胚胎大鼠脑神经干细胞的初步研究

目的：探索应用免疫磁珠间接阳性法分选神经上皮干细胞蛋白（ｎｅｓｔｉｎ）阳性的神经干细胞群的实验条件,为研究神经干细胞的特性与神经干细胞的培养和移植研究创造有利条件。方法：制取胎鼠大脑组织细胞悬液,免疫磁珠法分选胎鼠脑神经干细胞,以流式细胞术检测阳性细胞纯度,以锥虫蓝染色法检测细胞活性。结果：该法分选的ｎｅｓｔｉｎ阳性细胞纯度为９３．０％～９９．７％,其中活性细胞为９２％～９７％。结论：免疫磁珠法分离胎鼠脑神经干细胞群落简便、有效,可以为神经干细胞细胞培养和移植提供细胞来源,也为研究高纯度神经干细胞的特性提供了实验基础。     

基因芯片对PMA激活的血管内皮细胞早期反应基因的研究

目的 :用基因芯片研究 PMA激活的血管内皮细胞的早期反应基因 (imm ediate early response gene,ERG)。方法 :以包含 40 96条人类基因的 DNA芯片检测血管内皮细胞受代谢增强剂 PMA(phorbol myristate acetate)激活后早期的基因表达谱 ,并从中筛查出 ERG。结果 :血管内皮细胞受 PMA作用 6 h后 ,17条基因上调 ,11条下调。数据处理聚类分析表明 17条上调基因中多数 (13/ 17)属蛋白质磷酸酶和转录调控因子基因 ,而下调基因中多数 (9/ 11)为细胞分裂相关基因。结论 :证明PMA激活的人血管内皮细胞早期反应基因主要是转录调控因子和蛋白质磷酸酶基因。     

Effect of advanced glycosylation end products on activity of protein kinase C in human peripheral blood mononuclear cells

Objectives To investigate the effect of advanced glycosylation end products (AGEs) on the a ctivity of protein kinase C (PKC) in human peripheral blood mononuclear cells (P BMC) and to observe whether aminoguanidine (AG) can influence the effect of AGEs .Methods After PBMC were isolated from human peripheral blood and incubated with differen t concentrations of AGEs-BSA for various periods, total PKC activity in PBMC wa s determined by measuring the incorporation of (32)P from ［γ-(32) P］ ATP into a special substrate using Promega PKC assay kit.Results AGEs-BSA increased the total PKC activity in PBMC from 83.43±6.57 pmol/min/ mg protein to 116.8±13.82 pmol/min/mg protein with a peak at 15 min. AGEs -BSA also increased the total PKC activity in a concentration-dependent manner fro m 83.1±6.4 pmol/min/mg protein (control) to 119.1±13.3 pmol/min/mg prote in (control vs AGEs-BSA 400 mg/L, P<0.01).Furthermore, AGEs-BSA induc ed an elevation of PKC activity in a glycosylating time-related manner, from 80 .9±8.2 (control) to 118.3±11.5 pmol/min/mg protein (glycosylation for 12 wk, P<0.01).The total PKC activity stimulated by AGEs-BSA pretreated wi th AG (100, 200 mg/L) was markedly lower than that of AGEs-BSA group not pretr eated with AG (P<0.05, P<0.01).Conclusions AGEs-BSA increased the total PKC activity in PBMC in a concentration and incuba tion time dependent manner. The ability of AGEs-BSA to stimulate PKC activity was markedly decreased by pretreatment of AGEs-BSA with AG.     

蛋白激酶C在缺血预处理大鼠肾脏缺血再灌注损伤中的表达

目的 探讨蛋白激酶Ｃ在缺血预处理大鼠肾脏因再灌注损伤中的作用。方法 将大鼠随要分组,观察大鼠肾脏病理组织学变化,用免疫组织化学方法检测不没灌注时间蛋白激酶Ｃ水平。结果 预处理后缺血再灌注组病理组织学肾小管评分均低于缺血再灌注,而预处理后缺血再灌注组和对照组之间无显性差异;预处理后缺血再灌注组蛋白激酶Ｃ的表达高于缺血再灌注组,并且在再灌注２小时和６小时时,预处理后缺血再灌注组中的表达高于对照组。结     

髓鞘碱性蛋白和血清酶评估小儿病毒性脑炎脑损伤的价值

目的　探讨血清酶和髓鞘碱性蛋白 (MBP)评估小儿病毒性脑炎脑损伤程度及预后的价值。方法　 43例患儿按有无惊厥、有无意识障碍分组 ,采用多功能生化分析仪检测血清酶 ,简易MBPELISA法检测MBP ,组间进行对比分析 ,随访预后情况。结果　有惊厥组和有意识障碍组的血清酶和MBP显著高于无惊厥组和无意识障碍组 (P <0 .0 1) ;血清酶和MBP增高组后遗症发生率高 (P <0 .0 5 )。结论　血清酶和MBP均可反映病毒性脑炎的神经系统损伤程度 ,MBP较血清酶更能反应神经系统损伤 ,可作为病毒性脑炎神经系统损伤及预后判断的一项生化指标。     

血浆标本对Array蛋白分析仪检测结果的影响观察

目的 :研究血浆标本在ArraySystem 18种蛋白成份测定的影响。方法 :采用肝素抗凝管和一次性塑料试管对同一样本采血 ,使用同一仪器和同一试剂检测 18种蛋白含量 ,并对PAB、APA、APB、CRP、ASO 5种蛋白成分进行预处理后再行比较检测结果的差异性。结果 :血浆和血清标本的IgG、IgA、IgM、C3、C4、KAP、LAM、ALB、TRF、AAG、HPT、CER、RF的结果经配对计量资料统计处理无显著差异 (P >0 0 5 ) ,相关系数 (r)均在 0 970 0以上。而PAB、APA、APB、CRP、ASO血浆和血清检测结果有差异性 (P <0 0 1) ;但将血浆预处理后再测定其结果和血清相比无差异性 (P >0 0 5 ) ,相关系数 (r)均在 0 980 0以上。结论 :大多数蛋白测定项目可以使用血浆 ,少数特定蛋白测定项目也可将血浆行预处理后上ArraySystem进行蛋白测定。     

PSP57不是增生和癌变前列腺组织PSP94 mRNA可变剪切特有的产物

目的：比较人正常,增生和癌变前列腺组织中ＰＳＰ９４和ＰＳＰ５７ｍＲＮＡ的表达情况。方法：提取事故死亡的正常成年人前列腺组织及手术得到的增生和前列腺癌组织总ＲＮＡ,进行ＲＴ－ＰＣＲ,其产物分别以ＰＳＰ９４和ＰＳＰ５７共有的外显子及ＰＳＰ９４外显子Ⅲ作探针进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ分析;ＲＴ－ＰＣＲ产物经克隆后进行序列测定。结果：三种前列腺组织中均有ＰＳＰ９４和ＰＳＰ５７ｍＲＮＡ的表达;人