蛹虫草液体发酵产物冻干粉的抗氧化活性及保肝作用

目的研究蛹虫草液体发酵产物冻干粉的抗氧化活性及保肝作用。方法采用真空冷冻干燥的方法将蛹虫草液体发酵产物制成干粉并对冻干粉主要成分进行分析测定,通过DPPH自由基清除实验和衰老小鼠模型验证蛹虫草发酵产物冻干粉的抗氧化活性,通过小鼠急性肝损伤实验研究冻干粉的保肝作用,采用急性毒性试验验证冻干粉的安全性。结果蛹虫草发酵产物冻干粉含丰富的粗纤维、粗多糖、粗三萜及黄酮类物质。蛹虫草发酵产物冻干粉对DPPH自由基的半数有效浓度（EC50）为8．12mg／mL,在16mg／mL时对DPPH自由基的清除率为61．56％,与0．02mg／mL的维生素C（Vc）清除能力相当;蛹虫草发酵产物能显著提高衰老模型小鼠血清和肝脏中的总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）活力水平,降低丙二醛（MDA）含量,高剂量组的抗衰老效果与阳性药Vc组的抗氧化能力相当。小鼠急性肝损伤试验结果显示,冻干粉能有效降低模型组小鼠血液中门冬氨酸氨基转移酶（AST）与丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平（P〈0．05）。冻干粉的半数致死量（LD50）远大于国家无毒标准15g／kg,属于无毒级别。结论蛹虫草发酵产物具有良好的抗氧化活性和保肝作用,且安全无毒。     

红花黄色素冻干粉针剂与红花黄色素滴注液治疗冠心病心绞痛(心血瘀阻证)的临床非劣性试验

目的　评价红花黄色素冻干粉针剂与红花黄色素滴注液治疗冠心病心绞痛(心血瘀阻证)的有效性和安全性,并与阳性对照药丹参注射液作非劣性分析。方法　选择每周心绞痛发作2次以上的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级稳定型劳累性心绞痛者784例进行分层分段随机、盲法、同一阳性药对照、五组平行、多中心的非劣性临床试验,其中试验组1纳入224例,采用红花黄色素冻干粉剂80mg+ 0 9%NS250ml静滴,每日1次;试验组2纳入112例,采用红花黄色素冻干粉针剂160mg+ 0 9% NS250ml静滴,每日1次;试验组3纳入112例,采用红花黄色素滴注液200ml(160mg)静滴,每日1次;试验组4纳入224例,采用红花黄色素滴注液100ml(80mg)静滴,每日1次。对照组纳入112例,给予丹参注射液20ml+ 0 .9% NS250ml静滴,每日1次。治疗14天后,评价各试验组及其对照组的临床有效性和安全性。结果　治疗心绞痛疗效(PP数据):试验组1~4与对照组相比,其显效率为分别为53 .27%、69 .44%、70. 09%、55. 09%和26. 00%,总有效率分别为88 .79%、92 .59%、93. 46%、89 .81%和73. 00%。试验组1与试验组2比较、试验组3与试验组4比较、试验组1~4分别与对照组比较,其差异均有统计意义(P<0 .05),试验组2的疗效优于试验组1,试验组3的疗效优于试验组4, 4个试验组的疗效均优于对照组,非劣性检验合格     

冻干血小板对大鼠难愈合创伤模型的实验治疗

血小板含有20多种生长因子,对于创伤尤其是难愈性创伤具有治疗作用。本研究以糖尿病SD大鼠为基础,建立了一种难愈合创口模型,用于评价冻干血小板对难愈性创伤修复的治疗作用。采用链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)65mg/kg对大鼠腹腔注射制备糖尿病模型。取正常大鼠10只,糖尿病大鼠20只,将其分为正常对照组(NDR)、糖尿病对照组(DR)和冰冻干燥血小板治疗组(TLP);在各组大鼠背部造成直径2cm圆形创面,分别于第l、3、5、7、12天进行创面照相和透明膜描计法计算创面愈合速度。结果显示,注射STZ72小时后糖尿病组血糖明显高于16.7mmol/L。1周后糖尿病大鼠体重与正常对照组比较明显减轻(p<0.05)。糖尿病对照组创口的愈合速度在各个时间点均低于正常对照组创口(p<0.05),冰冻干燥血小板治疗组创口愈合速度显著快于糖尿病对照组。第12天时,正常对照组和治疗组创口再上皮化率分别达到88.1%和81.8%,而糖尿病组只有62.8%。结论 :以链脲佐菌素建立的糖尿病大鼠能成功制备难愈合创口模型,冰冻干燥血小板对该难愈性创伤模型具有治疗作用。     

齐墩果酸纳米悬浮液冻干方法的研究

目的：考察几种冻干保护剂对齐墩果酸纳米悬浮液冻干过程中的保护作用,筛选出最佳配方。方法：通过测定齐墩果酸纳米粒冻干前后的粒径变化,来评价保护效果和优选配方。结果：10％的蔗糖能对齐墩果酸纳米粒起到最佳的保护效果,样品的粒径为236.3 nm(冻干前211.2 nm),多分散系数0.242比冻干前(0.180)有很少的增加。结论：合适浓度的冻干保护剂在合理的冷冻条件下可以获得最佳的纳米悬浮液的冻干粉。     

两种不同剂型重组人生长激素在体生物活性比较

目的比较两种不同剂型的重组人生长激素在体生物活性。方法以摘除脑垂体的雄性大鼠为动物模型,rhGH国家标准品为对照,应用量反应平行线原理,6 d总量的高剂量10.7 IU/kg、低剂量2.7 IU/kg,按体重增加法和胫骨骨骺板增宽法分别测定rhGH注射液(T1~T4)和注射用rhGH(T5~T11)的生物活性,并比较两种剂型的比活性。结果rhGH注射液比活性比注射用rhGH的比活性高(P<0.01)。结论rhGH注射液比注射用rhGH的比活性高。     

两种狂犬病疫苗联合人狂犬病免疫球蛋白的效果分析

目的 了解高州市犬伤重伤暴露人群注射冻干和液体人用狂犬病疫苗及联合注射人狂犬病免疫球蛋白的效果。方法 调查对象为2005年8月1日～2006年11月30日到高州市疾控中心就诊的犬伤重伤者（全为Ⅲ级伤）。狂苗用7针法（0、3、7、14、28d，第一第二针次加注1支）和5针法联合注射人狂犬病免疫球蛋白，全程免疫后第30d用酶联免疫法检测血清抗体水平，联合使用武汉生物制药研究所生产的人狂犬免疫球蛋白（批号20050702-1，生产日期20050501，有效期20080817），剂量为20IU／Kg体重，治疗中观察副反应。结果 狂苗免疫抗体阳性率达到99．13％（574／579），不同程度的反应率为3．45％（20／579），579人中注射冻干狂苗7针法361人，抗体阳性率（360／361）99．72％，副反应为（5／361）1．38％，注射液体狂苗7针法59人，抗体阳性率（59／59）100％，副反应为（7／59）11．86％，注射液体狂苗5针法159人，抗体阳性率（155／159）97．48％，副反应为（12／159）7．5％，无中强反应发生。人狂犬病免疫球蛋白对伤口有抗感染、促进结痂、愈合作用。经设对照组比较，实验组平均结痂时间较对照组早2．43d，愈合时间早0．94d。结论 冻干人用狂犬病疫苗7针法及联合应用人狂犬病免疫球蛋白治疗安全，副作用少，保护率高；狂犬病免疫球蛋白对伤口有促进伤口结痂、愈合作用。     

HPLC-ELSD测定猪肺表面活性物质及其冻干粉中7种磷脂组分含量

 目的建立猪肺表面活性物质及其冻干粉中7种磷脂组分的含量测定方法。方法采用硅胶柱,梯度洗脱,蒸发光散射检测器检测。结果磷脂酰甘油(PG)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酰丝氨酸(PS)、二棕榈酰磷脂酰胆碱(DP-PC)、鞘磷脂(SPH)、浴血磷脂酰胆碱(LPC)7种磷脂的线性回归方程的相关系数分别为0.999 0,0.998 4,0.999 0,0.999 3,0.999 8,0.998 8,0.998 1;日内精密度分别为2.1%,2.3%,2.8%,1.7%,1.5%,2.3%,2.3%;回收率分别为99.57%,101.03%,100.02%,100.17%,98.51%,100.65%,97.76%。结论本方法可同时测定猪肺表面活性物质及其冻干粉中7种磷脂组分的含量,专属性强、准确度高。     

Molecular Mobility of Protein in Lyophilized Formulations Linked to the Molecular Mobility of Polymer Excipients,as Determined by High Resolution 13C Solid-State NMR

Purpose. The mobility of protein molecules in lyophilized protein formulations was compared with that of excipient molecules based on the spin-lattice relaxation time (T₁) of each molecule determined by high resolution ¹³C solid-state NMR. The relationship between molecular mobility and protein stability is discussed. Methods. Protein aggregation of lyophilized bovine serum --globulin (BGG) formulation containing dextran was measured by size exclusion chromatography. The T₁ of the BGG carbonyl carbon and dextran methin carbon in the formulation was determined by high resolution ¹³C NMR, and subsequently used to calculate the correlation time (_C) of each carbon. The spin-spin relaxation time (T₂) of BGG and dextran protons was measured by pulsed NMR spectrometry, and the critical temperature of appearance of Lorentzian relaxation due to liquid BGG and dextran protons (T_mc) was determined. Results. The _C of dextran methin carbon in BGG-dextran formulations exhibited a linear temperature dependence according to the Adam-Gibbs-Vogel equation at lower temperatures, and a nonlinear temperature dependence described by the Vogel-Tamman-Fulcher equation at higher temperatures. The temperature at which molecular motion of dextran changed was consistent with the T_mc. The _C of BGG carbonyl carbon exhibited a similar temperature dependence to the _C of the dextran methin carbon and substantially decreased at temperatures above T_mc in the presence of dextran. The temperature dependence of BGG aggregation could be described by the Williams-Landel-Ferry equation even at temperatures 20°C lower than T_mc. Conclusions. High resolution ¹³C solid-state NMR indicated that the molecular motion of BGG was enhanced above T_mc in association with the increased global segmental motion of dextran molecules.     

注射用益气复脉(冻干)安全性评价

目的 通过豚鼠离体回肠模型及小鼠类致敏实验评价注射用益气复脉（冻干,YQFM）的安全性。方法 建立豚鼠离体回肠模型,依次考察0.2、0.4、0.6、0.8、1.2、1.4、1.6 mg/mL质量浓度的YQFM对静息离体肠、乙酰胆碱（Ach）及组胺（His）诱导的离体肠收缩的抑制率;雄性ICR小鼠随机分为阴性对照组,阳性对照组（C48/80,25 mg/kg）,YQFM低、高剂量（780、3 135 mg/kg,分别为临床等效剂量的0.85和3.43倍）组,分为尾iv含0.4%伊文思蓝（EB）的药液及不含0.4% EB的药液两部分进行体内类致敏反应实验,依次比较各组小鼠耳廓蓝染情况;ELISA法测定血清中His和5-羟色胺（5-HT）的含量;并对耳、肺组织进行HE染色及病理检查。结果 体外实验显示,YQFM既能够抑制离体肠的自主收缩,又能抑制Ach和His导致的离体肠痉挛;体内实验表明,YQFM低剂量组耳廓蓝染率,His、5-HT含量均在正常范围,组织病理检查未见明显异常;3.43倍临床等效剂量时耳廓蓝染率,His、5-HT含量略高,病理结果见轻微炎症反应。结论 YQFM的安全性基本良好,临床使用时需对使用剂量稍加注意,以防轻微不良反应发生。