HIF-1α与VEGF在子宫内膜癌组织血管生成中的作用

目的：研究HIF-1α与VEGF在正常子宫内膜、子宫内膜不典型增生和子宫内膜癌组织中的表达情况及在肿瘤血管生成中的作用。方法：应用免疫组织化学SP法分别检测各类子宫内膜组织中的HIF-1α和VEGF的表达,并计数MVD。结果：子宫内膜癌HIF-1α阳性表达率63.6%（28/44）,正常子宫内膜为21.4%（3/14）,两者差异有统计学意义,P〈0.01。VEGF在子宫内膜癌、子宫内膜非典型增生和正常子宫内膜组织中的阳性率分别是56.8%、25.0%和14.3%,差异有统计学意义,P〈0.01。HIF-1α与VEGF均与MVD呈正相关（rs=0.579,P〈0.01;rs=0.607,P〈0.01）。结论：HIF-1α及其靶基因VEGF可能在子宫内膜病变由良性到恶性转变过程中,以及恶性肿瘤的进展中起了重要作用,可能作为肿瘤生物学行为的标志,并成为抗肿瘤治疗的新靶向。     

人脑胶质瘤组织HIF-1α和COX-2及CD105蛋白表达与临床病理学关系的研究

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、环氧化酶-2(COX-2)及CD105在人脑胶质瘤组织中的表达及与临床病理特征的关系。方法:应用免疫组化SP法检测70例胶质瘤和10位正常人脑组织中HIF-1α、COX-2和CD105的表达,并测定CD105标记的MVD。结果:1)胶质瘤组织中HIF-1α、COX-2和CD105蛋白的阳性表达率分别为64.3%、61.4%和74.3%,明显高于正常人脑组织。2)HIF-1α、COX-2表达和MVD与胶质瘤病理分级密切相关。3)胶质瘤组织中HIF-1α和COX-2蛋白表达的一致符合率为70.35%,且两者表达呈正相关,r=0.5837,P=0.004。4)HIF-1α和COX-2阳性表达组的MVD(35.87±4.55和36.00±4.57)均高于阴性表达组(29.19±4.69和29.48±4.71),P值均为0.0000;两者均为阳性表达时的MVD(36.22±4.62)最大,明显高于其他各组(33.75±3.59和28.29±4.33),P=0.0001;两者表达均与MVD呈正相关,r值分别为0.5405和0.4652,P值分别为0.005和0.014。结论:HIF-1α、COX-2和CD105过表达可能在胶质瘤的恶性进展中发挥重要作用,并与肿瘤血管形成密切相关,三者的联合检测可更准确地揭示胶质瘤的生物学特性。     

低分子肝素辅助治疗对重度子痫前期产妇胎盘缺氧及氧化应激反应程度的影响

目的探究低分子肝素辅助治疗对重度子痫前期产妇胎盘缺氧及细胞凋亡的影响。方法选取2018年1月至2019年12月本院收治的110例重度子痫前期产妇作为研究对象,根据治疗方案的不同分为参照组(开展常规对症治疗)和研究组(常规对症治疗基础上辅以低分子肝素治疗),各55例。比较两组胎盘缺氧、细胞凋亡及并发症情况。结果研究组PLGF、PAPP-A值均高于参照组,sFlt-1、sEng值、细胞凋亡指标(caspase-8、capase-3)水平均低于参照组,抗细胞凋亡指标(XIAP、Survivin)水平高于参照组,并发症发生率低于参照组(P<0.05)。结论在常规对症治疗基础上对重度子痫前期产妇给予低分子肝素辅助治疗可有效改善其胎盘缺氧、细胞凋亡情况,降低并发症发生率。     

肌苷对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤细胞色素C基因表达的影响

目的观察肌苷对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)细胞色素C(CytC)基因表达的影响。方法新生7日龄SD大鼠75只随机分为正常对照组、肌苷治疗组和HIBD组(各组n=25)。分别于HI后6h、12h、1d、3d、7d制备标本,肌苷组于HI后即刻起给予肌苷100mg/kg,腹腔注射,每日2次,连续7d,采用原位杂交技术测定CytCmRNA表达情况。结果正常对照组可见少许CytC阳性细胞;HIBD组在HI后6hCytC阳性细胞增多,于HI后1d达峰值,与正常对照组相比差异具有显著性(P<0.05),之后逐渐下降,HI后7d仍明显高于正常组(P<0.05)。肌苷治疗组神经细胞CytCmRNA表达变化规律与HIBD组基本一致,各时间点与HIBD组相应时间点比较,阳性细胞数明显减少,差异有显著性(P<0.05)。结论HI损伤后给予肌苷干预能使脑皮质区及CA1区CytCmRNA表达下调,提示肌苷可能通过抑制CytCmRNA表达从而起到减少细胞凋亡保护神经元的作用。     

复方党参对低氧暴露小鼠认知功能的改善作用

目的观察复方党参干预对低氧暴露致认知功能下降的改善作用,为进一步评价复方党参的抗缺氧效果提供依据。方法将成年雄性昆明小鼠按体质量随机分成3组(n=12):常氧对照组、低氧模型组、复方党参干预组,将后2组置于模拟海拔高度5500 m低压氧舱内,每天8 h,持续28 d。采用旷场、避暗和穿梭箱实验检测其自发活动能力、被动逃避及主动逃避学习记忆能力。结果总穿行格数及竖立次数低氧模型组小鼠明显低于常氧对照组,复方党参干预组明显高于低氧模型组(P均0.05)。避暗潜伏期低氧模型组〔(123.2±106.7)s〕显著低于常氧对照组〔(230.5±97.9)s〕,复方党参干预组小鼠的潜伏期〔(214.4±113.7)s〕显著长于低氧模型组(P均0.05)。穿梭箱测试中,3组小鼠的主动逃避时间随天数增加均呈下降趋势,但低氧模型组小鼠显著高于常氧对照组,复方党参干预组明显低于低氧模型组(P均0.05)。结论低氧暴露对小鼠的学习记忆造成损伤,复方党参可改善缺氧导致认知功能的下降。     

Exosomes Derived from Glioma Cells under Hypoxia Promote Angiogenesis through Up-regulated Exosomal Connexin 43

Glioblastoma multiform (GBM) is a highly aggressive primary brain tumor. Exosomes derived from glioma cells under a hypoxic microenvironment play an important role in tumor biology including metastasis, angiogenesis and chemoresistance. However, the underlying mechanisms remain to be elucidated. In this study, we aimed to explore the role of connexin 43 on exosomal uptake and angiogenesis in glioma under hypoxia. U251 cells were exposed to 3% oxygen to achieve hypoxia, and the expression levels of HIF-1α and Cx43, involved in the colony formation and proliferation of cells were assessed. Exosomes were isolated by differential velocity centrifugation from U251 cells under normoxia and hypoxia (Nor-Exos and Hypo-Exos), respectively. Immunofluorescence staining, along with assays for CCK-8, tube formation and wound healing along with a transwell assay were conducted to profile exosomal uptake, proliferation, tube formation, migration and invasion of HUVECs, respectively. Our results revealed that Hypoxia significantly up-regulated the expression of HIF-1α in U251 cells as well as promoting proliferation and colony number. Hypoxia also increased the level of Cx43 in U251 cells and in the exosomes secreted. The uptake of Dio-stained Hypo-Exos by HUVECs was greater than that of Nor-Exos, and inhibition of Cx43 by ^37,43gap27 or lenti-Cx43-shRNA efficiently prevented the uptake of Hypo-Exos by recipient endothelial cells. In addition, the proliferation and total loops of HUVECs were remarkably increased at 24 h, 48 h, and 10 h after Hypo-Exos, respectively. Notably, ^37,43gap27, a specific Cx-mimetic peptide blocker of Cx37 and Cx43, efficiently alleviated Hypo-Exos-induced proliferation and tube formation by HUVECs. Finally, ^37,43gap27 also significantly attenuated Hypo-Exos-induced migration and invasion of HUVECs. These findings demonstrate that exosomal Cx43 contributes to glioma angiogenesis mediated by Hypo-Exos, and suggests that exosomal Cx43 might serve as a potential therapeutic target for glioblastoma.     

不同时间低压低氧刺激对大鼠肺动脉压力及肺组织的影响

目的 观察不同低压低氧刺激时间对大鼠平均肺动脉压力、肺组织及酪氨酸激酶中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、血小板源性生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)、成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)表达水平的影响。方法 将32只雄性SD大鼠采用抽签法随机分为4组,A组正常海拔环境下饲养21 d;B组持续低压低氧环境(低压低氧舱模拟海拔5 000米高度)21 d,C组每天6 h低压低氧环境持续21 d,D组间断24 h(隔天)低压低氧环境21 d,光照、饮食、饮水等因素相同。利用BL-420S生物信号采集系统,通过右心导管法测量每组大鼠肺动脉压力;HE染色观察每组大鼠肺组织;ELISA方法测定每组大鼠血清中VEGF、PDGF、FGF表达量。结果 ①B、C、D组大鼠平均肺动脉压力较A组升高(P＜0.05),其中B组升高最明显,平均肺动脉压力为(27.4±1.2) mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),其次为D组,平均肺动脉压力为(22.1±1.1) mmHg。②B、C、D组大鼠肺血管周围均可见淋巴细胞浸润,B、D组大鼠肺组织可见炎症细胞及纤维组织引起的局部实变,亦可见局部肺泡过度充气,呈肺气肿表现。③B、C、D组VEGF、PDGF、FGF表达量较A组明显升高(P＜0.05)。结论 间断低压低氧刺激可以诱发大鼠肺动脉压力升高,但是间断低压低氧6 h、间断低压低氧24 h持续21 d的大鼠平均肺动脉压力未达到25 mmHg;间断低压低氧导致肺内炎症细胞浸润增多、肺泡壁结构破坏,进而造成肺实变、肺气肿病变;VEGF、PDGF、FGF等酪氨酸激酶表达量明显升高。     

PC12细胞化学缺氧复氧损伤与缺氧诱导因子1表达的关系

目的 研究缺氧诱导因子1(HIF1)在PC12细胞化学缺氧复氧损伤中的作用。方法 在培养液中加入和去除氯化钴模拟化学缺氧和复氧，以乳酸脱氢酶(LDH)漏出和细胞超微结构改变作为细胞损伤指标，观察化学缺氧和复氧后不同时间细胞损伤和HIF1 α蛋白变化。结果 在氯化钴模拟化学缺氧实验中，LDH漏出明显增加，8h达高峰，随后逐渐下降，电镜结果与LDH改变相一致，HIF1 α蛋白表达在化学缺氧后2，4，8和12h均明显增加，8h达高峰，提示化学缺氧8h后细胞损伤逐渐减轻可能与HIF1 α蛋白水平升高有关。在模拟复氧实验中，LDH和细胞形态学改变都显示化学复氧8h细胞损伤最为严重，而HIF1 α蛋白表达在化学复氧4和8h均明显下降，提示细胞化学复氧损伤可能与HIF1 α蛋白水平下降有关。结论 HIF1对神经细胞化学缺氧复氧损伤具有保护作用。