基于网络药理学的杜仲不同部位功效及物质基础比较研究

杜仲皮、杜仲叶和杜仲雄花均来源于杜仲,三者在成分构成、药理作用方面的差异尚不明确。然而阐明杜仲不同部位的作用功效差异对于杜仲产品的开发具有重大的意义,而这种差异功效对应的物质基础也为不同部位的质量控制提供了依据。为了探讨杜仲不同部位的作用功效差异,该研究以不同部位的化学成分为研究对象,采用化合物靶标预测和靶标分析的策略,探讨杜仲(皮)、杜仲叶和杜仲花在药理作用方面的差异。其次为了阐明导致不同部位功效差异的物质基础,该研究通过构建"成分-靶标-功能"的关联网络,挖掘特异性功效对应的不同部位特异性成分,探讨导致功效差异的物质基础。根据靶标预测以及功能分析,杜仲可能的药理作用集中在抗氧化、神经调控、血压调控、心肌收缩、抗凋亡等。而杜仲的不同部位作用存在差异,杜仲叶特异性地参与成骨细胞分化、骨矿化等涉及骨发育的过程,此外还可能通过调控维生素D的代谢影响钙的吸收进而影响骨发育等过程。杜仲叶还可能特异性地作用于雌激素受体参与的雌激素及雌二醇的应答等过程。而关于肝脏的保护功能,杜仲叶可能通过调控维生素A相关的通路来发挥作用。相较于杜仲叶而言,杜仲(皮)特异性的药理作用可能是与泌尿系统的发育相关。杜仲雄花特异性参与疼痛的感受、谷氨酸信号通路以及兴奋性突出后电位等过程有关的功能。基于"成分-靶点-通路"的层次网络发现,杜仲不同部位特异性的功效与其特异性的化学成分密切相关,其中杜仲叶中特有的苯丙素类、萜类、环烯醚萜类、黄酮类及其他类成分靶向作用于杜仲叶特异性的功能,而杜仲(皮)中的黄酮类成分以及杜仲花中的萜类成分则可能是发挥它们特异性功效的物质基础。该研究中针对于杜仲不同部位的作用预测为后续杜仲产品开发的侧重点和差异性提供了新的依据;同时基于差异化功效的物质基础研究也为杜仲差异化产品的质量控制提供了依据。     

杜仲籽总苷抗炎镇痛作用研究

目的:研究杜仲籽总苷的抗炎、镇痛作用。方法:采用二甲苯所致小鼠耳肿胀和大鼠角叉菜胶足肿胀方法,研究杜仲籽总苷的抗炎作用;采用热板法、醋酸扭体法、光照甩尾法,研究杜仲籽总苷的镇痛作用。结果:杜仲籽总苷的110、220 mg/kg剂量都能明显减少二甲苯所致小鼠耳肿胀的体积,杜仲籽总苷的55、110、220 mg/kg剂量在给药后4 h左右明显减少大鼠角叉菜胶足肿胀率;杜仲籽总苷的220 mg/kg剂量能显著提高热板和光电引起小鼠的痛阈值,杜仲籽总苷的110、220 mg/kg剂量能显著地减少醋酸引起的扭体次数。结论:杜仲籽总苷具有较强的抗炎、镇痛作用。     

杜仲雄花HPLC指纹图谱及成分积累规律的研究

目的 建立杜仲雄花的HPLC指纹图谱,分析杜仲雄花中成分的积累规律.方法 采用Ameritech C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,甲醇-0.05％磷酸溶液梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温25℃;检测波长238 nm.结果 对不同日期采集的杜仲雄花的指纹图谱进行评价,生成对照指纹图谱,确定了22个共有峰.杜仲雄花的成分积累规律为京尼平苷酸含有量花蕾期最低,至盛花期最高.绿原酸含有量花蕾期最高,始花期最低,末花期上升.京尼平甘含有量始花期最低,盛花期最高.结论 杜仲雄花的盛花期是兼顾质量和产量的最佳采摘期.     

华钩藤中黄酮类化学成分的分离和结构鉴定

 目的 对茜草科植物华钩藤［Uncaria sinensis（Oliv.）Havil.］的干燥带钩茎枝的黄酮类化学成分进行研究。方法 用体积分数95%乙醇对华钩藤的干燥带钩茎枝进行提取,分别对乙酸乙酯和正丁醇部位采用各种柱色谱进行分离,通过NMR和MS等波谱学数据分析进行结构鉴定。结果 分离鉴定了5个黄酮类化合物的结构：槲皮素（quercetin,1）,山柰酚（kaempferol,2）,蒙花苷（linarin,3）,槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷（quercetin-3-O-β-D-galactopyranside,4）,槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖基-（1→6）-β-D-半乳糖苷（quercetin-3-O-α-L-rhamnopyranosyl-（1→6）-β-D-galactopyranoside,5）。结论 化合物1~5均为首次从该植物中分离得到。     

杜仲叶桃叶珊瑚苷的酶法提取及其抑菌活性

目的:研究杜仲叶桃叶珊瑚苷的酶法提取工艺及其抑菌活性。方法:采用纤维素酶法,以桃叶珊瑚苷提取率为指标,优选最佳提取条件,并对其抑菌效果进行研究。结果:杜仲叶桃叶珊瑚苷的最佳提取工艺为:料液比1∶12,酶解pH 6.0,酶用量0.4%,酶解温度50℃,酶解时间50 min,溶出量可达17.892 mg/g。桃叶珊瑚苷提取液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用较强,对金黄色葡萄球菌的MIC为4.832 mg/mL,对大肠杆菌的MIC为9.664 mg/mL,但对肺炎链球菌和MG溶血性链球菌的抑菌作用不明显,MIC均为28.946 mg/mL。结论:该提取工艺合理可行,提取率高,提取得到的桃叶珊瑚苷具有一定的抑菌作用。     

杜仲多糖对兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨杜仲多糖对兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法将兔随机分为4组（每组8只）,即假手术组、缺血再灌注组、丹参片预处理组、杜仲多糖预处理组。监测各组兔血清心肌酶谱、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）等水平的变化。结果杜仲多糖预处理组心肌酶、SOD、MDA含量与缺血再灌注组、丹参预处理组比较差异显著（P〈0．05）。结论杜仲多糖对兔心肌缺血再灌注损伤能够产生较好的保护作用。     

杜仲原植物25S rDNA5'端序列分析及其分子识别

目的：为中药杜仲真伪品的鉴别提供新的分子水平的资料。方法：采用末端终止法对中药杜仲大分子ｒＲＮＡ基因（２５ＳｒＤＮＡ）５’端进行了序列测定。结果：根据序列中核苷酸的变化可有效地鉴别杜仲与其它相关类群。结论：为进一步开展药材杜仲专一性核酸分子探针的研制奠定了基础。     

杜仲露天新法枝插初探

对杜仲Ｅｕｃｏｍｍｉａ ｕｌｍｏｉｄｅｓ插穗上端切口采用石蜡或微膜包扎封口，可防止病菌引起腐烂，提高成活率，解决了杜仲枝插难以成活或不能成活的难题。     

络合显色法测定杜仲叶中的绿原酸

利用络合显色反应建立杜仲叶中绿原酸测定方法。方法绿原酸和铝离子发生络合显色反应，通过分光光度计在530nm处测定显色溶液吸光度，计算绿原酸含量。结果线性相关方程Y=0．00392X-0．0067，r=0．9995。绿原酸浓度范围为1．7×10^-4～1．0×10^-2g·L^-1。结论络合显色法简单准确，满足了实验和生产常规检测需要。     

大孔吸附树脂提取纯化杜仲叶绿原酸的研究

目的 提取纯化杜仲叶绿原酸，确定最佳吸附树脂吸附-解吸条件。方法 以乙醇提取液为吸附原液，静态吸附实验筛选树脂；动态吸附实验确定最佳树脂的吸附-解吸条件。结果 NKA-Ⅱ树脂最佳吸附-解吸条件：吸附流速2ml／min，原液过柱吸附2次，最佳吸附剂为40％乙醇。结论 NKA-Ⅱ树脂是吸附绿原酸的理想吸附剂，适宜于产业化生产。