肿瘤坏死因子与甲状腺细胞凋亡及相关蛋白的检测和表达的意义

目的　探讨肿瘤坏死因子 a(TNF a)诱导Graves病甲状腺细胞凋亡与相关蛋白表达在Graves病 (GD)发病关系中的意义。方法　采用免疫组织化学S P方法检测 5 0例Graves病患者TNF a,并检测对照组对Fas表达的影响。采用原代细胞培养方法进行细胞培养 ,细胞培养液中的sFas含量采用ELISA法检测。Fas/sFasmRNA检测采用半定量RT PCR法。结果　含有TNF aGD组细胞凋亡率为 92 6 % ,显著高于对照组的凋亡率 (36 0 % ) (P <0 0 1)。其含有TNF aGD组甲状腺细胞sFas、Fas/sFasmRNA含量与对照组比较差异有显著意义 (P <0 0 1)。结论　TNF a诱导Graves病甲状腺细胞凋亡及凋亡相关蛋白sFas、Fas/sFasmRNA有一定水平的表达 ,这些改变可能是TNF a破坏甲状腺细胞的重要机制之一。     

旋转铰链型与单纯铰链型膝关节肿瘤假体置换的临床比较研究

目的 研究膝关节肿瘤保肢手术两种假体置换的术后效果及其比较.方法 随访我院1999年6月2006年3月治疗的72例膝关节肿瘤患者，失访9例，余63例中40例采用单纯铰链型假体置换(A组)，23例采用旋转铰链型假体置换（B组）63例随访时间9月~8年平均3年9个月，按MSTS膝关节评分标准、ambulation scores、关节屈伸度及感染、复发、手术时间进行评估。结果：A组：手术时间2.6625±0.3362h，复发5例，转移死亡3例，感染2例； B组：手术时间2.5722±0.2878h，复发3例，转移死亡2例，感染2例 。B组1例术后发生旋转轴聚乙烯轴套断裂关节脱位，再次手术更换轴套后未再出现并发症，两组无假体松动病例。两组手术时间无统计学意义；去除复发及转移死亡病例后,剩50例, A组32例， MSTS评分平均23.0/30分。 B组18例，MSTS评分平均23.7/30分。两组MSTS评分p>0.05，无统计学意义；ambulation scores各分项总分均p<0.05，有统计学意义．两组关节伸直时为0°或接近0°,屈曲度A组119.3750±17.49°，B组125.0000±15.34°，无统计学意义（p>0.05）。结论： 1. 按ambulation scores标准，在步行舒适度和快速步行方面，旋转型铰链假体置换组与单纯铰链型假体置换比较有统计学意义；2.而MSTS标准则未能体现出两组术后功能方面的统计学意义，因此ambulation scores较MSTS评分更灵敏，更适合对膝关节保肢术后功能评价；3.两组在手术时间、术后临床屈伸功能及并发症方面，如复发、感染，未见显著差别，单纯铰链型不会出现脱位，而可旋转铰链型假体有脱位的可能。     

Gene expression profiling of human lymph node metastases and matched primary breast carcinomas: Clinical implications

The genetic program that drives tumor metastasis and the mode and timing of its initiation are of great practical significance to clinical management. Modern technical advances open new opportunities for gaining useful relevant information. Gene expression profiles of histologically‐verified viable tissue from lymph node metastases were compared with those of matched primary breast cancers from 10 different patients, among samples from over 400 cases, using high‐throughput oligonucleotide arrays comprising probes for 22,000 genes. It was observed that metastases have very similar expression signatures to their parent tumors. However, detailed computational analysis revealed that a small number of genes were consistently differentially expressed between 100% of tumors and metastases, suggesting that these are mechanistically important. Lists of such candidate genes, of potential clinical interest, are provided. We interpret these results in the framework of a meta‐analysis of previous investigations by others and ourselves and of existing clinical knowledge on the behavior of human tumors. The collective data show that metastases resemble their primary tumors but the signatures obtained in different studies are not sufficiently reproducible or informative to be prognostically useful, although they do give valuable insights into the pathogenesis and biology of human tumor metastasis. The findings indicate that the genetic program encoding metastasis is implemented progressively over time although, occasionally, this evolution can occur rapidly, early in the life of the neoplasm. The important clinical significance of this deduction is that, in most patients, early detection provides time for appropriate therapeutic intervention to be effective in obstructing metastasis.     

不同组织来源临床肿瘤主要细胞周期素表达类型的研究

目的观察人类主要细胞周期素（Cyclin D1、E、A、B1）在临床肿瘤细胞中表达特征并进行分类，探讨其对临床肿瘤分类的可行性及潜在意义。方法用流式细胞术（FCM）双参数法半定量检测161例恶性肿瘤手术切除标本细胞中Cyclin D1、E、A、B1表达，根据不同Cyclin在细胞周期中的作用及其异常表达特征，将肿瘤细胞主要Cyclin表达分为不同类型。结果细胞周期外Cyclin（D1）及周期内Cyclins（E、A、B1）在临床肿瘤细胞中表达无组织差异性（P〉0．05）。其异常表达大致可归为5种类型：Ⅰ型Cyclin（D1、E、A、B1）均高表达；Ⅱ型Cyclin D1低表达，Cyclin（E、A、B1）不同形式高表达；Ⅲ型Cyclin D1不表达，Cyclin（E、A、B1）不同形式高表达；Ⅳ型Cyclin D1不表达，Cyclin（E、A、B1）不同形式低表达；V型Cyclin（D1、E、A、B1）均不表达；再根据各型中不同周期内Cyclin的优势表达分为相应不同的亚型。a亚型：Cyclin（E、B1）表达为主；b亚型：CyclinE表达为主；c亚型：Cyclin B1表达为主；d亚型：Cyclin（E、A、B1）表达为主。肿瘤细胞主要Cyclin表达类型及相应亚型分布无组织来源的差异性（P〉0．05）。结论主要Cyclins表达类型可以作为不同组织来源肿瘤分类的依据，可能是体现不同肿瘤细胞周期破坏共同特征较为客观分类方法。     

复方积雪草有效组分对人肾小管上皮细胞补体C3表达的影响

目的：探讨复方积雪草有效组分——积雪草苷／大黄素干预肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导的人肾近曲小管上皮细胞（HPTEC）补体C3 mRNA及蛋白的表达水平。方法：采用HPTEC，模型组TNF-α 10ng／ml诱导，治疗组在TNF-α诱导的同时，以不同浓度的积雪草苷、大黄素以及积雪草苷合大黄素进行干预，于24h后分别提取细胞RNA及上清，应用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和酶链免疫方法（ELISA）分别检测HPTEC C3 mRNA和蛋白的表达。结果：正常HPTEC具有C3 mRNA和蛋白表达，经TNF-α诱导后G表达明显上调，用不同浓度的积雪草苷、大黄素以及积雪草苷合大黄素干预后，C3 mRNA及蛋白水平表达出现不同程度的下调，呈一定的剂量依赖关系和协同作用。结论：复方积雪草有效组分能够抑制炎性细胞因子TNF-α上调所致的肾局部G过度产生。     

hTERT启动子调控hNIS基因介导肺癌细胞碘摄取和131I治疗的实验研究

目的 构建含人端粒酶反转录酶(hTERT)核心启动子调控的人钠/碘同向转运体(hNIS)基因重组腺病毒,并靶向转染至肺癌A549细胞中特异性表达.探讨hTERT启动子调控的hNIS基因介导放射性碘治疗肿瘤的可能性.方法 应用AdEasy系统构建重组腺病毒Ad-hTERT-hNIS,同时构建巨细胞病毒(CMV)启动子调控的hNIS重组腺病毒Ad-CMV.hNIS作为阳性对照,不含hNIS的重组腺病毒Ad-CMV作为阴性对照.应用反转录.聚合酶链反应(RT-PCR)方法验证hTERT在转染肿瘤细胞中的转录活性,摄碘实验检测表达的hNIS蛋白功能,细胞克隆形成实验评价131I对转染肿瘤细胞的毒性作用.结果 成功构建重组腺病毒Ad-hTERT-hNIS、Ad-CMV-hNIS及Ad-CMV,并经PCR验证正确.RT-PCR证实hNIS cDNA能从Ad-hTERT-hNIS转染的细胞中扩增出来.Ad-hTERT-hNIS和Ad-CMV-hNIS转染的肺癌A549细胞摄碘能力比阴性对照组Ad-CMV转染的细胞分别提高了23和31倍,且摄碘能力可以被NaClO4抑制.Ad-hTERT-hNIS和Ad-CMV-hNIS转染的肺癌A549细胞均可被131I杀死,2组细胞成活率分别为(31.2±1.45)%和(23.6±4.08)%,而阴性对照组和未转染病毒组分别为(89.0 ±2.99)%和(91.2 ±4.63)%.结论 hTERT启动子调控的hNIS重组腺病毒转染肿瘤细胞后,应用131I治疗有望成为一种新的基因靶向治疗手段.     

低剂量辐射增强小鼠肿瘤基因-放射治疗效应的免疫学机制研究

目的 探讨低剂量辐射全身照射对小鼠Lewis肺癌移植肿瘤基因-放疗方案中的免疫增强作用机制。方法 小鼠右后肢皮下接种Lewis肺癌细胞建立荷瘤模型,基因-放疗组中小鼠肿瘤局部注射由多聚乙烯亚胺包裹的pEgr-IL18-B7.1重组质粒,分别接受由2 Gy 局部照射和0.075 Gy 全身照射组合的不同治疗方案,通过³H-TdR标记方法检测小鼠CTL和NK细胞毒活性,ELISA方法检测TNF-α和IFN-γ分泌活性,观察各治疗组对荷瘤小鼠抗肿瘤免疫的作用。结果 在pEgr-IL18-B7.1基因治疗方案中,单次大剂量辐射局部照射后加多次低剂量全身照射与常规多次大剂量辐射局部照射相比,小鼠CTL和NK细胞毒活性显著增强,TNF-α和IFN-γ分泌活性有不同程度的增高。 结论 低剂量辐射可以通过促进CTL和NK细胞毒效应,上调TNF-α和IFN-γ细胞因子表达,从而增强机体抗肿瘤免疫功能,提高肿瘤基因-放疗的抑瘤效果。     

膀胱癌的MRI诊断价值

目的:总结膀胱癌的MRI征象,探讨MRI对膀胱癌分期的作用及鉴别诊断要点。方法:对探讨经手术与病理证实23例膀胱癌的MRI回顾性对比分析。其中男性,19例,女性,4例,年龄50~90岁,平均年龄70岁。18例行MRI增强检查。结果:膀胱三角区及膀胱后侧壁是最常见好发部位,表现为膀胱壁突向腔内肿块和(或)膀胱壁局限性不规则增厚;肿瘤平扫T1WI等或略高信号,T2WI呈高信号,Gd-DTPA动态增强早期肿块显著强化。根椐肿瘤生长方式可分为:①小结节型,②广基肿块型,③浸润型。MRI对膀胱癌定位、定性诊断正确率分别为95.7%(22/23)、91.3%(21/23);术前MRI诊断与TNM分期符合率为82.3%(19/23),MRI较病理分期偏高。结论:膀胱癌的MRI表现具有独特性。T1加权主要用于肿瘤的定性诊断,T2加权主要用于肿瘤的术前分期;MRI检查多方位、多序列成像,是显示膀胱癌最理想的检查方法。     

pH值对IFN-α2b、rIL-2、ADM合用维拉帕米对人肝癌细胞杀伤作用的影响

目的　观察培养液在 pH值为 6 .8、7.3、7.6条件下rIL - 2、IFN -α2b、ADM及合用维拉帕米对人肝癌细胞 74 0 4杀伤作用的影响。方法　MTT法于 96孔培养板上进行杀伤实验 ,测定培养液pH值分别为 6 .8、7.3、7.6状态下 ,rIL - 2、IFN -α2b、ADM、及与维拉帕米联合杀伤人肝癌细胞 70 4 0的差异。结果　pH值为 7.6状态下rIL - 2、IFN -α2b、ADM及合用维拉帕米杀伤效果最佳。pH值为 6 .8、7.3、7.6时 ,IFN -α2b都能增加ADM抗肿瘤作用 ,但pH值为 7.6时 ,IFN -α2b +ADM杀伤效果最佳。结论　在偏硷性环境下 ,rIL - 2、IFN -α2b、ADM及合用维拉帕米对肿瘤细胞杀伤效果最佳     

人胰胆管合流异常胆汁对胆管细胞的影响及其机理探讨

目的研究胰胆管合流异常(APBDU)患者的胆汁对人胆管细胞生长的影响,探讨APBDU与胆管癌发生的关系。方法应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测APBDU患者胆汁对胆管细胞增殖的影响,流式细胞仪测定其细胞周期分布及凋亡情况;Western blot法检测经APBDU胆汁处理的胆管细胞c-erbB-2蛋白表达水平的变化。结果APBDU患者胆汁与正常对照胆汁比较,能明显促进胆管细胞的增殖(P<0.05),这种促增殖作用可被环氧化酶COX-2抑制剂celecoxib或一氧化氮合成酶抑制剂L-NAME抑制;流式细胞仪分析经APBDU胆汁处理的胆管细胞其处于S期的细胞明显增多(P<0.001);Western blot法检测经APBDU胆汁处理的胆管细胞其c-erbB-2表达增多。结论APBDU患者的胆汁对正常胆管细胞增殖有促进作用,可能潜在致癌活性。