紫杉醇诱导HL—60细胞凋亡的研究

目的：观察抗微管药紫杉醇对急性白血病细胞株HL－60是否具有凋亡诱导作用,并进一步研究bcl－2基因在此过程中的作用。方法：（1）以紫杉醇处理HL－60细胞,观察细胞生长抑制作用的时间效应和剂量效应,在光镜和电镜下观察细胞形态变化;（2）用流式细胞仪检测药物孵育前后细胞凋亡率（AP）的变化;（3）用RT－PCR法检测药物孵育前后bcl-2基因的表达水平。结果：（1）在一定剂量和时间范围内紫杉醇能抑制HL－60细胞生长;（2）紫杉醇能诱导HL－60细胞凋亡,并显示剂量效应：（3）在紫杉醇诱导HL－609细胞凋亡过程中,bcl－2基因表达水平下调。结论：紫杉醇能诱导HL－60细胞凋亡;bcl-2基因参与了紫杉醇诱导HL－60细胞凋亡的调控。     

二氢吡啶类钙拮抗剂Mn9202对5-HT收缩胃底平滑肌的影响

目的研究新的二氢吡啶类钙拮抗剂Mn9202对5-HT引起胃底平滑肌收缩的影响. 方法通过离体实验,观察不同浓度的Mn9202 (1,10 μmol*L -1)孵育时5-HT的量效曲线,以及Ca2+的影响,同时与胃底平滑肌5-HT竞争性拮抗剂米安舍林(mianserin)[1]对比. 结果细胞外钙减少,5-HT收缩胃底平滑肌的量效曲线的最大效应降低,但5-HT的浓度范围不变; Mn9202呈剂量依赖性地使5-HT的最大反应降低,并使曲线右移,分别使最大反应降低至(75 ±1.8)%和(55±3.2)%,除去细胞外钙时,Mn9202 1 μmol*L-1使5-HT的量效曲线右移至3×10-3,最大反应降低至原来的18%,此时在灌流液中加入2.5 mol*L-1 CaCl 2,最大反应上升为原来的60%. mianserin使5-HT的量效曲线平行右移,最大反应不变. Mn9202能够取消mians erin对5-HT的拮抗作用. 结论在大鼠的胃底平滑肌,Mn9202能够非特异性地拮抗5-HT的作用,这种作用与细胞外钙有关, 同时也与非竞争性地拮抗5-HT2受体有关.     

宫颈活检组织中单纯疱疹病毒2型(HSV-2)抗原的检测意义

目的　探讨宫颈癌与HSV 2型感染的关系。方法　免疫组化法、ELISA。结果　用免疫组化法对 37例宫颈癌病理标本 ,10例宫颈不典型增生标本和 2 5例慢性宫颈炎标本进行HSV 2抗原的检测。宫颈癌组中有 32例检出HSV 2抗原 ,不典型增生组和慢性宫颈炎组分别有 7份和 9份检出HSV 2抗原。三组的抗原检出率分别是 86 4 %、70 0 0 %和 36 0 0 %。三组间相比较 ,宫颈癌组与慢性宫颈炎组之间 ,不典型增生组与慢性宫颈炎组之间 ,结果均有显著性差异 (p <0 .0 5 ) ,宫颈癌组与不典型增生组抗原阳性率比较 ,差异无显著性 (p >0 .0 5 )。结论　HSV 2感染与宫颈癌有密切关系。     

少突胶质细胞对PC12细胞JAK2基因表达的影响及其意义

目的 探讨少突胶质细胞对PC12细胞JAK2基因表达的影响及其意义。方法 用分离培养的少突胶质细胞及其细胞碎片分别作用于培养的PC12细胞,于不同作用时相点在观察PC12细胞突起变化的同时检测PC12细胞内JAK2mRNA的表达JAK2蛋白的磷酸化。结果 在给予少突胶质细胞及其细胞碎片处理后10min,JAK2 mRNA表达较对照组有显著增高（P＜0．05）,但处理12h后,其表达虽较处理10min及4h有显著下降,但仍显著高于对照组（P＜0．05）。对照组JAK2蛋白的活性较低,但少突胶质细胞及其细胞碎片加入后,JAK2蛋白很快便被磷酸化而激活,到处理后12h,激活的蛋白呈较处理10min有显著下降,但仍显著高于正常对照组（P＜0．05）。少突胶质细胞及其细胞碎片对其影响差别不显著（P＞0．05）。结论 少突胶质细胞作用于PC12细胞时可调节PC12细胞JAK2的表达与激活,这种表达与激活在一定程度上可能介导少突胶质细胞对PC12细胞突起生长的影响。     

胰高血糖素样肽-2对放射损伤小鼠肠上皮恢复的影响

目的：探讨胰高血糖素样肽－2对放射损伤小鼠肠上恢复的影响。方法：昆明种小鼠经8Gy^60 Co γ射线一次性全身照射后随机分为放射损伤对照组和胰高血糖素样肽－2处理组,检测小肠粘膜组织DNA和蛋白含量,光镜和扫描电镜观察肠上皮形态结构变化。结果：放射损伤小肠粘膜组织DNA和蛋白含量降低,肠绒毛高度下降、数量减少,部分绒毛顶端有糜烂缺损;胰高血糖素样肽－2处理可使肠粘膜组织DNA和蛋白含量降低,肠绒毛增长、数量增多,糜烂发生不明显。结论：胰高血糖素样肽－2可促进放射损伤小鼠肠上皮的恢复。     

乙型肝炎患者血清和PBMC培养上清IL-2与IL-10的检测及意义

目的　探讨Th1/Th2细胞因子在乙型肝炎发病机制中的意义。方法　采集 7例急性病毒性肝炎、12例慢性乙型肝炎、10例慢性重型乙型肝炎患者和 10例健康献血员血清 ;分离 15例慢性乙型肝炎、14例慢性重型乙型肝炎和 10例健康献血员PBMC ,在PHA P刺激下培养 72h ,收取培养上清。采用双抗体夹心ELISA法检测血清和PBMC培养上清IL 2与IL 10水平。结果　急性肝炎血清IL 2高于正常对照 (P <0 .0 1)、高于慢性乙型肝炎 (P <0 .0 5 )、高于慢性重型乙型肝炎 (P <0 .0 5 )。慢性重型乙型肝炎血清IL 2高于正常对照 (P <0 .0 1) ,慢性重型乙型肝炎PBMC培养上清IL 2高于正常对照 (P <0 .0 5 )。血清IL 2与ALT呈正相关 (P <0 .0 1) ,PBMC培养上清IL 2与ALT呈正相关 (P <0 .0 5 )。血清IL 10与PBMC培养上清IL 10与ALT无相关性 ,血清IL 2与IL 10呈正相关 (P <0 .0 1)。结论　Th1型细胞因子IL 2上调与乙型肝炎肝脏的炎症活动相关 ,IL 2的分泌低下可能造成细胞免疫力低下 ,与HBV的持续感染有关。IL 10可能作为IL 2的拮抗因子随IL 2分泌增加而升高。     

2型糖尿病心血管病变的QT离散度分析

目的　探讨 2型糖尿病心血管病变的QT离散度变化的意义。方法　分析 40例 2型糖尿病心血管病变者体表 12导联同步心电图 ,并与 42例 2型糖尿病无心血管病变及 42例正常人作对照。结果　糖尿病心血管病变组QTd及QTcd均显著高于其余两组 (P <0 .0 1)。以QTd >46ms为异常 ,则诊断糖尿病心血管病变的敏感性、特异性及准确性分别为 82 .5 %、85 .7%及 84.1%。以QTcd >5 2ms判为异常 ,则诊断敏感性、特异性及准确性分别为 85 .0 %、83.3 %、84.1%。结论　QTd及QTcd延长可作为临床诊断 2型糖尿病患者伴心血管病变的一项指标。     

慢性重型肝炎的血清生化指标对预后的影响

目的:探讨慢性重型肝炎(Chronic serious hepatitis,CSH)血清生化指标与预后的关系。方法:225例CSH患者,根据2000年北京传染性疾病会议制定的标准。分为早、中、晚3期,分别检测患者血清中总胆红素(TB)、白蛋白(A)、尿素氮(UN)、肌酐(CR)和胆碱酯酶(CHE)。10例病人同时进行肝脏穿刺病理检查,并观察合并症及预后。结果:早、中、晚3期TB(μmol/L)依次为326.62±111.03、399.80±125.60、385.05±107.84,早期与中、晚期对比,P<0.001;A(g/L)为32.48±4.64、29.66±5.72、29.26±3.69,早期与中晚期相比P<0.001;CHE(μ)2664.25±1004.27、1997.12±833.30、1997.23±874.39,早期与中晚期相比P<0.01;UN为20.23±8.84、21.39±8.78、25.58±10.02,早期与晚期相比P<0.01;CR为85.09±59.73、91.78±60.64、124.37±85.72,早期与晚期相比P<0.01。肝穿结果显示,CSH晚期大块、亚大块坏死较多,瘀胆严重,合并症多。结论:本文结果显示,CSH血清生化指标中TB、CR、UN越高,A、CHE越低,肝脏病理损伤越重,合并症越多,预后越差。     

RADIATION INDUCED PROGRESSIVE DECREASING IN THE EXPRESSION OF REVERSE TRANSCRIPTASE GENE OF hEST2 AND TELOMERASE ACTIVITY

Objectites. In order to identify the relationship between telomerase and the biological effect of radiation injury, and investigate the role of human telomerase catalytic subunit gene (hEST2) reverse tranacriptase(RT) seg-ment in the expression of telomerase activity. Methods. Tumor FIeLa cells, KB cells and A431 cells were employed to measure the change in telomeraseactivity after 60Co-ray irradiation at RNA level and protein level. Quantitative PCR and Northern blotting wereused to determine the expression of bEST2 RT segment that encodes seven motifs of the human telomeres, a PCR-besed telomeric repeat amplification protocol (TRAP)was used to assay telomerase activity after exposure toradiation. Results. Both of telomerase activity and the expression hEST2 RT segment were decreased with increasingdosage of radiation. In addition, testing the expression of motifs domain is similar to the measurement of telomerase activity. Conclusion. The detection of the hEST2 BT segment by Northern blotting and quantitative PCR are new methods for testing Uflomerase activity. Furthermore, radiation can cause a dose-dependent decrease in telomerase activity. The effect of radiation on telomerase is one possible reason for the death of cancer ceils after irradiation.     

毫米波辐射对白血病细胞的细胞结构、自由基和bcl-2基因表达的影响

目的 研究毫米波辐射对白血病细胞株的细胞结构、培养体系中的氧化自由基和抗氧化酶系,以及bcl-2基因表达的影响。方法 电镜显微技术研究细胞结构的变化,AnnexinV/PI双染法结合流式细胞术分析细胞株凋亡和坏死,硫代巴比妥酸（TBA）法和邻苯三酚法测定细胞株培养体系中的脂质过氧化物（LPO）和超氧化物歧化酶（SOD）的含量变化;流式细胞仪结合荧光标记抗体检测bcl-2基因表达。结果 毫米波辐射使白血病细胞株细胞结构产生显著的退行性变化,显著诱导细胞凋亡和坏死,抑制细胞活力,脂质过氧化物含量上升,SOD含量下降,bcl-2基因的表达显著下降。结论 毫米波辐射有明显的诱导白血病细胞凋亡的效应,其机制与辐射后氧化自由基水平上升、抗氧化酶系活性下降及bcl-2基因的表达下降有关。