肝硬化患者一氧化氮、一氧化氮酶、肿瘤坏死因子、内皮素、内毒素水平的相关性研究

目的：探讨肝硬化患者血NO、TNF、ET与EPS的关系。方法：分别应用酶法和放射免疫分析法测定了84例肝硬化患者血NO、NOS、ET和EPS含量，并与35名正常健康人作对照。结果：肝硬化患者血NO、TNF、EPS含量高于正常人组（P＜0．05－0．01），ET水平低于正常人组（P＜0．01－0．01），且与内毒素含量的高低密切相关。结论：肝硬化患者血NO、TNF、ET水平的高低其内毒素为主要诱因。     

Effect of Loxosceles gaucho venom on cell morphology and behaviour in vitro in the presence and absence of sphingomyelin.

This study was performed to investigate whether the toxic effects of Loxosceles gaucho venom on cells might be exerted via stimulators of TNF-alpha release generated by sphingomyelinase D--a major component of the venom. It was demonstrated that L. gaucho venom alone is unable to induce TNF-alpha release by J774A.1 cells, while in the presence of exogenous sphingomyelin it induces a high level of TNF-alpha release which is significantly increased by incubation with non-inactivated serum. Ceramide phosphate also induces TNF-alpha release in J774A.1 cells, but (unlike sphingomyelin/sphingomyelinase) the level of release is not influenced by the presence or otherwise of non-inactivated serum. L. gaucho venom does not induce proliferation of J774A.1 cells and even at high concentrations it does not affect their viability. J774A.1 cells, which prior to venom treatment were elongated and clumped, round up after venom treatment, but, revert to their original morphology after incubation with fresh medium. TNF-alpha resistant MRC-5 cells and TNF-alpha sensitive MCF-7 cells are susceptible to the toxic effect of both L. gaucho venom and ceramide phosphate. The results obtained in this study demonstrate that exogenous sphingomyelin can modulate, in vitro, the release of TNF-alpha induced by L. gaucho venom in mouse macrophages. In addition, the results also indicate that ceramide phosphate and L. gaucho venom are toxic to several different cell types, via a variety of mechanisms, some, but not all, of which may involve TNF-alpha as an intermediary.     

多发性骨折后全身炎症反应综合征的监控

目的　分析多发性骨折后全身炎症反应综合征 (SIRS)的监测因素。方法　将 87例多发性骨折患者分为SIRS组、非SIRS组和死亡组 ,比较各组血清肿瘤坏死因子 (TNF -α)、粒细胞集落刺激因子 (G -CSF)、补体C3 、免疫球蛋白 (IgG)等的变化。同时观察失血量分级与SIRS的关系。结果　SIRS组G -CSF和IgG水平明显低于非SIRS组 ,TNF -α水平明显高于非SIRS组 (P <0 .0 5 ) ;死亡组G -CSF、补体C3 及IgG水平较SIRS组进一步降低 ,TNF -α水平进一步升高 (P <0 .0 5 )。随失血量增大 ,SIRS发生率、病死率升高 (P <0 .0 5 )。结论　G -CSF ,IgG ,TNF -α水平及失血量可作为SIRS的监控指标。     

Ewing’s肉瘤细胞X-射线照射后TNF-α和TGF-β mRNA表达的研究

 目的　研究Ewing’s肉瘤细胞系 (RM 82 )X 射线外照射后肿瘤坏死因子 (TNF α)和转化生长因子 (TGF β)mRNA表达水平的变化 ,探讨X 射线诱导内源性TNF α和TGF β产生的可能性及意义。 方法　应用实时荧光RT PCR ,检测接受不同剂量X 线照射 (2Gy ,5Gy ,10Gy ,2 0Gy ,30Gy ,4 0Gy)和受照后不同时间 (1h ,3h ,6h ,12h ,2 4h ,4 8h ,72h)。TNF α和TGF βmRNA表达水平的变化。 结果　RM 82细胞TNF αmRNA表达水平较外照射前显著升高。一方面受照后TNF αmRNA表达逐渐升高 ,照射剂量达 4 0Gy时TNF αmRNA表达水平达高峰 ,为正常对照组的 10 8倍 ;另一方面 ,照射后 3h后TNF αmRNA表达逐渐升高 ,6h达高峰 ,为正常对照组的 18倍。相反 ,TGF βmRNA表达水平X 射线照射前后无显著变化。结论　Ewing’s肉瘤细胞系 (RM 82 )接受X 线照射后TNF αmRNA表达明显升高 ,且呈现时间、剂量依赖性。放射治疗可诱导Ewing’s肉瘤细胞系 (RM 82...     

雷公藤内酯醇对大鼠脑局灶性缺血再灌注后脑组织肿瘤坏死因子-α含量变化的影响

目的　观察雷公藤内酯醇 (TL)是否通过降低脑组织内肿瘤坏死因子 (TNF α)含量而减少白细胞浸润 ,从而改善局灶性脑缺血再灌注所致的神经功能缺失。方法　大鼠ipTL 0 .2或 0 .4mg·kg- 1·d- 1,连续 4d。d 4给药前行右侧大脑中动脉缺血 1h再灌注 2 4h。行为观察行大鼠神经功能缺损评分 ;放射免疫法检测缺血再灌注侧大脑皮层TNF α含量。病理切片观察缺血再灌注侧脑微血管内附壁中性粒细胞计数。结果　与损伤模型组比较 ,TL处理组大脑皮质TNF α含量明显减少 ,神经功能受损程度明显改善。脑微血管内附壁中性粒细胞计数明显减少。结论　TL有抑制缺血再灌注脑组织内TNF α生成 ,降低其含量的作用 ,从而抑制白细胞浸润 ,改善受损的神经功能     

人His6-IFNγ/TNFβ(His6γ-TNFNβ)融合蛋白(包涵体)的分离、纯化与复性研究

应用pET28(含T_7lac启动子和His6-tag)质粒,将人γTNFβ融合基因与之组建成pETγLT表达质粒,并转化于E.coliBL21(DE3).本文对pETγLT/ BL21(DE3)工程菌的His6-γTNFβ重组产物进行了诱导表达,分离纯化的研究.结果表明,该工程菌用LB培养基在37℃扩增至OD_(590)为0.5左右,加IPTG(终浓度为1mmol/L)诱导5小时,此时His6-γTNFβ的表达量可占菌体总蛋白的45%.重组产物绝大多数以IBs形式存在于菌体中.工程菌经反复超声破碎、高速离心,得IBs粗制品后,再经含2mol/L脲的缓冲液洗涤可得到相对纯净的IBs.然后用7mol/L脲变性溶解IBs,离心取上清,进行Ni~(2 )-Sepharose 6B柱一步法亲和层析,可得到电泳纯度为95%的His6-γTNFβ,经稀释复性和用凝血酶切去His6-tag的产物,其细胞毒活性为(1.2～2.0)×10~7U/mgp,抗病毒活性为(6.0～6.6)×10~6U/map.     

GC-MS分析蚕蛹油中脂肪酸的成分

 目的：化学法提取的蚕蛹油经甲酯化后，分析其脂肪酸的成分。方法：用气相色谱 质谱(GC-MS)技术及图谱检索，对蚕蛹油中脂肪酸的成分进行鉴定和分析。结果：蚕蛹油中含9种脂肪酸，其中不饱和脂肪酸占79.88%，α-亚麻酸的相对含量高达71.4%。结论：α-亚麻酸具有降血脂、降血压和抗癌等生物功能，本研究为α-亚麻酸的应用提供了重要的依据。     

Glucan在Con A所致免疫性肝损伤中的作用

目的观察Glucan对刀豆蛋白A(ConA)所致小鼠免疫性肝损伤的干预效果及其作用机制。方法ConA尾静脉注射制备小鼠免疫性肝损伤模型,在ConA注射前1h腹腔注射Glucan,观察正常对照组、ConA损伤组、Glucan/ConA组肝损伤的情况,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、α肿瘤坏死因子(TNF-α)及组织中一氧化氮(NO)含量的变化,并用DNAladder检测肝细胞凋亡的变化。结果ConA尾静脉注射后,出现明显的肝损伤,血清ALT、TNF-α及组织中NO水平明显升高,DNAladder检测可见明显的梯状条带;预先应用Glucan后,可减轻这些改变。结论Glu-can对ConA所致小鼠免疫性肝损伤有保护作用。     

益骨胶囊对骨质疏松模型大鼠骨形态学及血清TNF-α水平的影响

目的:观察益骨胶囊对骨质疏松(OP)模型大鼠形态学及血清肿瘤坏死因子(TNF -α)水平的影响。方法:将大鼠分为假手术组、模型组和治疗组,模型组和治疗组大鼠切除双侧卵巢建立OP模型,之后测定各组骨密度;取骨组织脱钙切片观察骨形态学;采用放射免疫法测定血清E2 和TNF -α水平。结果:与假手术组比较,模型组骨密度及血清E2 水平降低,血清TNF -α水平升高(P<0. 01) ;与模型组比较,治疗组骨形态明显改善,骨密度及血清E2 水平增加,血清TNF -α水平降低(P<0 .05或P<0. 01) ,与假手术组接近。结论:益骨胶囊能有效改善OP模型大鼠的骨质疏松状况。     

肺炎克雷伯菌引起大鼠小气道上皮细胞损伤及与肺内α肿瘤坏死因子关系的探讨

目的探讨肺炎克雷伯菌引起大鼠小气道上皮细胞损伤及机制。方法将Wistar大鼠随机分为两组:对照组和感染组采用光镜动态观察小气道上皮细胞损伤改变。以免疫组化及原位分子杂交分析方法,检测小气道上皮细胞α肿瘤坏死因子(TNF-α)蛋白和TNF-αmRNA表达的变化。并用放射免疫分析法测定肺组织中TNF-α含量。结果显示感染组大鼠小气道上皮细胞病理改变明显。感染第2周起至第4周小气道壁各种炎症细胞增加,可见上皮细胞部分脱落坏死,损伤明显加重。感染组在2～4周TNF-αmRNA表达与对照组比较显著增强(P <0 .0 1)。在第4周TNF α蛋白明显增高(P <0 .0 1)。从第1周起肺组织中TNF-α含量增加并保持到第8周。结论肺炎克雷伯菌在体内可引起小气道上皮细胞损伤,肺内TNF-α水平升高与气道上皮细胞损伤程度平行。并且TNF-α蛋白和TNF-αmRNA表达上调在加重上皮细胞损伤中又具有重要作用