SEPARATION BY GEL FILTRATION AND MICRODETERMINATION OF UNBOUND BILIRUBIN

A gel filtration technique and a diazoreaction method for unbound bilirubin separation and determination, directly applicable to small blood volumes has been described. Precision of the microdetermination, reproducibility of the separation method and bilirubin recovery have been very satisfactory in our hands. The effects of pH and relative albumin concentration on the albumin-bilirubin binding were studied in sera and in commercial albumin-bilirubin mixtures.     

Der Einfluß verschiedener Medikamente und pH-Werte auf die Albumin-Bilirubin-Bindung in vitro

Zusammenfassung An Sephadexsäulen wurde albumingebundenes Bilirubin von freiem Bilirubin getrennt. Das Medium war Humanalbumin. Nach Zusatz verschiedener Medikamente konnte eine verschieden starke Abspaltung des Bilirubins vom Albumin gemessen werden. Die meisten der untersuchten Fremdstoffe bewirkten nur eine geringfügig gesteigerte Albumin-Bilirubin-Dissoziation; lediglich nach Inkubation injizierbarer Diazepamlösung und nach Oxacillin nahm die Bilirubinverdrängung deutlich zu. Nicht die Substanz Diazepam, sondern die Summe ihrer Lösungsvermittler verursachte diese vermehrte Bilirubinabspaltung. Zusätzlich zeigte sich bei Verschiebung des pH-Wertes zur acidotischen Seite eine Abnahme der Albumin-Bilirubin-Dissoziation.

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The influence of various drugs and pH-values on albumin-bilirubin binding in vitro

Albumin-bound bilirubin was separated from free bilirubin by means of sephadex columns. Human albumin solution was the medium. Various drugs had different effects on the separation of bilirubin from albumin. Most of the drugs examined effected only a low degree of dissociation of albumin from bilirubin. After the addition of oxacillin or injectable diazepam solution, however, the bilirubin separation increased significantly. The dissociation was not caused by the substance of diazepam itself, but was a cumulative effect of the solubilizing agents. In addition, the albumin-bilirubin dissociation decreased on acidification.

     

党参化学成分及其体外抗氧化活性分析

目的:研究党参甲醇提取物中的化学成分,并对分离获得的化学成分进行体外抗氧化活性检测。方法:利用D101型大孔吸附树脂,MCI树脂,硅胶,十八烷基硅烷键合硅胶(ODS),羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex) LH-20等柱色谱及制备硅胶薄层色谱进行化合物分离,采用核磁共振(NMR)和质谱(MS)等方法进行化合物结构鉴定;采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH),2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)和超氧阴离子自由基清除能力检测各化合物的抗氧化活性,以维生素C为阳性对照。结果:从党参的甲醇提取物中分离得到7个化合物,分别鉴定为7R/7S,8S-guaiacylglycerol-8-O-4'-(coniferyl alcohol) ether(1/2),党参炔苷(3),苍术内酯Ⅲ(4),紫丁香苷(5),党参苷Ⅰ(6),党参吡咯烷鎓B(7)。化合物1和2具有一定的DPPH和ABTS+·自由基清除能力,而化合物1~7对O-2·自由基的清除能力较弱。结论:化合物1和2为木脂素类中的新木脂素结构类型,为首次从党参属中分离得到,并具有一定的体外抗氧化活性。     

凝胶色谱法测定注射用磺苄西林钠的聚合物

目的建立凝胶色谱法测定注射用磺苄西林钠中聚合物的方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Sephadex G-10凝胶柱．流动相A为pH7．0的0．05mol·L^-1磷酸盐缓冲液[0．05mol·L^-1磷酸氢二钠溶液-0．05mol·L^-1磷酸二氢钠溶液（61：39）]、流动相B为水．流速为0．5mL·min^-1,检测波长为254nm。结果磺苄西林在50．72-405．76μg·mL^-1与峰面积呈良好的线性关系（r=0．9999）。结论本方法简便、准确、灵敏度高、重现性好。     

人重组白细胞介素-8的快速纯化

报道一种快速人重组IL-8纯化方法，大肠杆菌表达的IL-8包涵体经尿素变性后，直接用DEAE柱和SephadexG50柱纯化。纯化的hIL-8经FPLC鉴定，纯度达90%以上。该法为实验室快速、简便纯hIL-8提供了新的技术路线。     

日本血吸虫种、期血清学抗原及其新型检测系统的研究──人“O”型血红细胞与抗日本血吸虫特异性抗体结合物的制备及其应用方法的建立

用日本血吸虫成虫特异性抗原（ｓｊ－ＳＡＡｇ）和虫卵特异性抗原（ｓｊ－ＳＥＡｇ）免疫家兔制备免疫血清，继用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ２００柱层析法提取家兔免疫血清中抗ｓｊ－ＳＡＡｇ和抗ｓｊ－ＳＥＡｇ的两种特异性多克隆抗体。将人“Ｏ”型血红细胞分别与上述两种抗体结合制备红细胞—抗体结合物（ＲＢＣ－Ａｂｓ），并研究了该结合物的应用方法。初步研究结果表明，实验所用载体以混合纤维素膜最佳，检测３１例急性血吸虫病人阳性率为９６．８％，２０例正常人假阳性率为５％。     

藏药甘松多糖S的研究

目的 对甘松多糖S（Nardostachys chinensis polysaccharide S,NCPS）的组成进行研究。方法 采用水提醇沉法提取甘松多糖粗品,并通过乙醇分级沉淀,Sevage法除蛋白,葡聚糖凝胶柱色谱纯化;UV和IR等方法考察多糖性质,凝胶渗透色谱-示差检测法测定多糖的纯度和相对分子质量范围及分布,HPLC法鉴定单糖组成及其物质的量比值。结果 得到一种淡黄色粉末NCPS。紫外光谱分析在195 nm波长处有明显吸收峰,在260、280 nm等处无吸收峰,表明被测物为多糖,且不含核酸及蛋白质;红外吸收光谱分析,在3 412.15、2 934.10、1 642.11、1 438.96、1 242.67、1 103.54、830.86、636.12 cm^?1等处均有明显的多糖的特征吸收;其重均相对分子质量为7 082;NCPS主要由阿拉伯糖、木糖、果糖和葡萄糖组成,其物质的量的比值为0.69∶1.0∶3.92∶2.28。结论 NCPS为一种杂多糖,首次从甘松中分离得到。     

以Sephadex G-100制备微柱凝胶血型卡及其性能评估

目的本实验以Sephadex G-100制备血型卡并对其进行性能评估。方法用生理盐水浸泡等对Sephadex G-100凝胶进行预处理,通过控制浸泡时间、缓冲液、加入红细胞的量及其浊度等,制备血型卡。再对血型卡进行性能评估,包括符合率、灵敏度、批内重复率、批间重复性、有效期等。结果自制血型卡检测200例标本的血型结果和试管法、强生血型卡法全部符合。自制血型卡和强生凝胶卡检测抗B抗体平均滴度均为1:308,均明显优于传统试管法1:256(P<0.05)。自制血型卡检测抗B抗体滴度的批内重复性CV为8.1%,批间重复性CV为3.7%。自制血型卡稳定期约为8个月。结论以Sephadex G-100凝胶试剂制备血型卡具有重复性高、稳定性好、结果准确、试剂制备工艺简单、成本低等优点,具有较好的推广应用和开发价值。     

粉尘螨抗细菌活性物质的分离与鉴定

目的从粉尘螨丙酮提取液中分离抗细菌活性成分,并对其抗菌活性进行初步鉴定。方法用丙酮抽提粉尘螨,并用Sephadex G50分子筛层析进行对粉尘螨提取液中的抗细菌活性进行初步分离、纯化。对各组分的抗细菌活性进行初步鉴定。结果经Sephadex G50分子筛层析分离得到Ⅰ及Ⅱ两个峰。粉尘螨丙酮粗提物对绿脓假单胞菌无抑制作用,但对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌及短小芽孢杆菌均有抑制作用。峰Ⅰ及峰Ⅱ则对大肠埃希杆菌、枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌及金黄色葡萄球菌都有抑制作用。粉尘螨粗提液及第二个峰在加热及蛋白酶K处理后仍然保留抗细菌活性,但是第一个峰在同样处理后失去了抗菌活性。结论首次从粉尘螨分离纯化得到抗细菌成分。     

重酒石酸长春瑞滨脂质体包封率测定方法比较

目的制备重酒石酸长春瑞滨脂质体,比较葡聚糖凝胶微柱离心法和阳离子交换树脂离心法测定重酒石酸长春瑞滨脂质体包封率的差异。方法pH梯度法制备重酒石酸长春瑞滨脂质体,分别以葡聚糖凝胶Sephadex G-50和阳离子交换树脂装柱,离心分离脂质体和游离药物,采用HPLC法测定药物含量,计算包封率,并用SPSS软件进行t检验。结果两种方法测定不同载药量的脂质体包封率结果均无显著性差异(P>0.05)。结论葡聚糖凝胶微柱离心法和阳离子交换树脂离心法均可用来测定重酒石酸长春瑞滨脂质体包封率,优选阳离子交换树脂离心法。