正交试验优选硫酸铵梯度法制备苦参碱脂质体的工艺研究

目的 以包封率为指标优选苦参碱脂质体的制备工艺.方法 以氢化大豆卵磷脂(HSPC)和胆固醇(Ch)为膜材,采用薄膜超声-硫酸铵梯度法制备脂质体.通过正交设计优化处方工艺,葡聚糖凝胶法分离游离药物,HPLC法测定月旨质体中苦参碱的包封率.结果 最佳工艺为:HSPC:Ch=3∶1,探头超声10 min,药脂比为1:15,包封率均值为50.68％.结论 优化后的工艺可提高苦参碱脂质体的包封率,此工艺条件简单,可操作性强,适于实验室条件下制备苦参碱脂质体.     

葡聚糖凝胶色谱法测定注射用头孢美唑钠中聚合物

目的 建立凝胶色谱法测定注射用头孢美唑钠中聚合物.方法 色谱柱为玻璃柱(内径1.3 cm,柱长40 cm),葡聚糖凝胶G-10(40～120μm)为填充剂;流动相A为pH 7.0的0.1 mol/L磷酸缓冲液,流动相B为水;体积流量为1.5 mL/min;检测波长为254nm;蓝色葡聚糖2000溶液的质量浓度为0.1 mg/mL;进样量200μL.结果 A相中头孢美唑钠进样质量浓度在10～40 mg/L与头孢美唑钠高分子聚合物峰面积呈良好的线性关系(r=0.998 6).B相中头孢美唑酸进样质量浓度在3.994～79.88 μg/mL线性关系良好(r=0.999 9).3批样品中高分子聚合物质量分数为0.02％～0.03％.结论 该方法的精密度和准确度均能满足注射用头孢美唑钠中高分子聚合物质量控制的要求.     

分离亲水气单胞菌外毒素的聚丙烯酰胺凝胶色谱填料

由丙烯酰胺和甲叉丙烯酰胺在水油悬浮液中共聚得到聚丙烯酰胺凝胶 (ZSP)系列 ,并用红外、溶剂吸收实验等对合成的ZSP的结构进行了研究。以商品葡聚糖凝胶SephadexG 10 0为对照 ,研究了ZSP 10对使中华鳖致病的亲水气单胞菌外毒素的分离性能。结果表明 :ZSP 10对毒素分离效率高 ,洗脱峰不拖尾 ,且结构和膨胀度可调 ,成本低廉 ,不易染菌霉变。经SephadexG 10 0和ZSP 10提纯的外毒素蛋白均保留了生物活性。根据SDS -PAGE的分析 ,确认经提纯的毒素蛋白的分子量为 3.2× 10 4     

藏药甘松多糖S的研究

目的对甘松多糖S(Nardostachys chinensis polysaccharide S,NCPS)的组成进行研究。方法采用水提醇沉法提取甘松多糖粗品,并通过乙醇分级沉淀,Sevage法除蛋白,葡聚糖凝胶柱色谱纯化;UV和IR等方法考察多糖性质,凝胶渗透色谱-示差检测法测定多糖的纯度和相对分子质量范围及分布,HPLC法鉴定单糖组成及其物质的量比值。结果得到一种淡黄色粉末NCPS。紫外光谱分析在195 nm波长处有明显吸收峰,在260、280 nm等处无吸收峰,表明被测物为多糖,且不含核酸及蛋白质;红外吸收光谱分析,在3 412.15、2 934.10、1 642.11、1 438.96、1 242.67、1 103.54、830.86、636.12cm 1等处均有明显的多糖的特征吸收;其重均相对分子质量为7 082;NCPS主要由阿拉伯糖、木糖、果糖和葡萄糖组成,其物质的量的比值为0.69∶1.0∶3.92∶2.28。结论 NCPS为一种杂多糖,首次从甘松中分离得到。     

叶酸-白蛋白纳米粒偶联荧光素制备工艺的研究

目的研究叶酸-白蛋白纳米粒(叶酸-BSA纳米粒)偶联荧光素的制备工艺。方法制备叶酸-BSA纳米粒偶联物,将所得偶联物物理包合荧光素,通过透析将大部分未包裹的荧光素除去,并用葡聚糖凝胶柱色谱法进一步分离纯化,用紫外分光光度法测定荧光素上载效率。结果通过物理包合可以成功将荧光素包裹到叶酸-BSA纳米粒内,荧光素上载效率为6.4%。结论通过研究叶酸-BSA纳米粒包裹荧光素的制备工艺,可为进一步利用叶酸-BSA纳米粒偶联物包裹近红外荧光染料,对肿瘤体内在位监测奠定了基础。     

猪发育期牙胚釉原蛋白的分离纯化及其多克隆抗体的制备

目的　制备猪釉质蛋白多克隆抗体,为釉原蛋白的检测提供条件。方法　选择1月龄乳猪,分离埋于上下颌骨内的牙胚,刮取牙胚表面干酪样尚未完全矿化的釉质基质,通过盐酸胍抽提及SephadexG-200柱层析分离纯化猪发育期牙胚釉原蛋白,联合免疫家兔,抗血清经DE-52纤维素纯化,并经ELISA测定抗体效价。结果　 SDS-PAGE电泳结果发现采用SephadexG-200葡聚糖凝胶过滤能达到较为理想的釉原蛋白分离纯化效果,用所提纯的猪釉原蛋白免疫家兔,成功地制得兔抗猪釉原蛋白抗血清,抗血清稀释达1∶32 000时,采用ELISA法仍有明显的抗原抗体反应。结论　本实验成功制备得到抗釉原蛋白多克隆抗体,为釉原蛋白的检测提供了条件。     

纹状体源性神经营养因子的分离纯化和生物鉴定

纹状体是中脑黑质多巴胺神经元的主要靶组织，我们先前的研究曾指出，纹状体提取液能增一外培养的中脑黑质神经元的存活和发育，本研究是在此基础一步应用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５凝胶层析、高效液相色谱（ＨＰＬＣ）、反相高效液相色谱（Ｒ－ＨＰＬＣ），ＳＤＳ－ＰＡＧＥ等的分析，结合生物鉴定，从纹状体提取液中分离出化的活性因子－－纹关腐朽源性神经营养因子。该因子的分子量为１１．５ｋＤ，等电点为９．３９，它能促进体外     

龙胆多糖提取分离纯化及其组成糖分析

目的从龙胆中提取分离水溶性多糖,研究其组成糖成分,为进一步开发利用龙胆多糖提供参考。方法主要采用SephadexG-100凝胶色谱柱分离纯化,利用气相色谱法测定各糖的组成比例。结果从龙胆水溶性多糖中分离纯化得到2种不同的均一多糖组分TP-1、TP-2,组成糖均一样。结论 2种均一多糖首次从龙胆中分离得到,组成糖的比例并不一样。     

Dexamethasone reduces lung eosinophilia,and VCAM-1 and ICAM-1 expression induced by Sephadex beads in rats

Airway eosinophilia is one of the key pathophysiologic features in asthma. The endothelial adhesion molecules, vascular cell adhesion molecule (VCAM-1) and intercellular adhesion molecule (ICAM-1), have previously been shown to play a crucial role in eosinophil recruitment into the inflamed airway. We have investigated the effects of dexamethasone on eosinophilia into the bronchoalveolar lavage fluid, and the upregulation of VCAM-1 and ICAM-1 expression, measured by immunoblotting, induced by i.v. injection of Sephadex beads into rats. The beads significantly increased the lung eosinophilia, and expression of VCAM-1 and ICAM-1 in the lung. Pretreatment with dexamethasone (0.1 to 2 mg/kg i.p.) strongly inhibited all the airway inflammatory events in a dose-dependent manner. In conclusion, glucocorticoids may be potent inhibitors of lung eosinophilia, at least in part, due to the prevention of the upregulation of VCAM-1 and ICAM-1 expression.     

Sephadex G10凝胶色谱法测定磺苄西林钠中的高分子杂质

目的 建立测定磺苄西林钠中高分子杂质的方法.方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为Sephadex G10凝胶柱,流动相A为0.05 mol·L-1的磷酸盐缓冲液(pH7.0)、B为高纯水,流速为1 ml·min-1,检测波长254 nm,柱温为25℃.结果 磺苄西林钠中高分子杂质含量小于0.12%.结论 所建方法灵敏、准确、简便,可用于磺苄西林钠中高分子杂质的质量控制.