慢性丙型肝炎的特异性靶向抗病毒治疗（下）

HCV RNA聚合酶抑制剂 除蛋白酶抑制剂之外，一直在开发很多其他针对依赖HCV RNA的RNA聚合酶的抑制剂。这些制剂中的NM283即是一种抑制病毒RNA聚合酶的核糖核苷类似物，亦是一种病毒RNA链的终止子。Godofsky和其同事发表了一项增加1／2剂量NM283（每天50mg至800mg）的试验结果。[第一段]     

2003年使用的西尼罗病毒RNA筛查和追加试验的分析及临床灵敏度

背景 2002年首次报道经输血传播西尼罗病毒（WNV）感染，这促进了核酸扩增检测试验（NAT）研究的快速发展。本研究的目的是评估WNV筛查试验和2003年首次应用的补充NAT试验的灵敏度。     

中期因子在胰腺癌组织中的定位与表达特点

目的 探讨中期因子(MK)的mRNA及其蛋白在胰腺癌(PC)组织中的定位与表达特点。方法采用原位杂交和免疫组织化学方法检测52例PC、12例慢性胰腺炎及6例正常胰腺组织中MK mRNA及蛋白的定位与表达水平。结果MK mRNA及蛋白水平在PC组织均呈过度表达,表达阳性率分别为71.2％和73.1％,都定位于PC细胞质,有淋巴结转移和Ⅱ-Ⅳ期的患者,MK阳性表达率明显高于无淋巴结转移和Ⅰ期患者(P<0.01)。在PC细胞外组织中也有MK表达,尤其在血管密集处明显。而在慢性胰腺炎及正常胰腺组织中MK表达阴性。结论 MK mR-NA及其蛋白在PC组织中呈过度表达,并可能与促进PC血管生成和转移有关。检测MK表达情况可作为PC的辅助诊断指标之一。     

小牛血清去蛋白注射液细菌内毒素检测方法的研究

目的：建立小牛血清去蛋白注射液的细菌内毒素检查方法。方法：根据2000年版《中国药典》进行试验。结果：小牛血清去蛋白注射液在2mg/ml浓度下进行细菌内毒素检查干扰现象，获得了可靠的数据和结果。结论：本品所采用的细菌内毒素检查方法灵敏、可靠。     

恶性肿瘤与良性病患者CEAmRNA检测分析

目的 检测和对比癌症病人及良性病患血中的癌胚抗原mRNA(CEAmRNA)水平，探讨CEAmRNA在肺癌等恶性肿瘤早期微小转移中的临床意义。方法 采用RT-PCR方法检测病人静脉血CEAmRNA。结果 36例肿瘤病人CEAmRNA阳性率为38．89％；30例非肿瘤病人均为阴性，两组差别有显的统计学意义(P＜0．001)。Ⅲ～Ⅳ期肿瘤患的CEAmRNA阳性率(50．0％)明显高于Ⅰ～Ⅱ期患的(16．67％)，尽管二之间的差别无显的统计学意义(P＞0．1)。结论 癌症患血中CEAmRNA阳性率显高于非肿瘤患；CEAmRNA检测对肿瘤有较高的特异性；静脉血CEAmRNA-RT-PCR检测对于肺癌等肿瘤的微小转移有一定的诊断意义。     

靶向性蛋白激酶B1和环氧合酶-2 shRNA腺病毒载体的构建和在人胃癌细胞的表达

Objective To construct a short hairpin RNA (shRNA) adenovirus vector targeting protein kinase BI (PKB1/Akt1) and cyclooxygenase-2 (COX-2) and observe their expression in human gastric carcinoma cell line SGC-7901. Methods Akt1 and COX-2 shRNA expression frames were sub-cloned to pGSadeno adenovirus vector by homologous recombination technology to construct pGSadeno-Aktl + COX-2 ( pGSadeno-A + C) vector. Furthermore after screening and amplification,recombinant ade-novirus vector was digested with Pacl and transfected into HEK293 cells. The replication adenovirus rAd5-A + C was packed and amplified in the HEK293 cells, and its titer was detected. After human SGC-7901 cells in vitro were transfected by rAd5-A + C,Akt1 and COX-2 mRNA and protein expression levels were detected by real-time PCR and Western blot respectively. Compared with rAdS-A + C,SGC-7901 and gen-eral rAd5-HK were selected as the negative controls. Results The recombinant adenovirus rAd5-A + C was constructed successfully and its titer reached 1.0 ×1010 pfu/ml. Aktl and COX-2 mRNA expression was downregulated significantly, and their ACt values ( 12.26±0.05 and 5.41±0.09 respectively ) were higher than rAd5-HK group (10.63±0.02 and 3.75 +0.08 respectively) and control group (10.57± 0.02 and 3.73±0.08 respectively) (P <0.01 ). There was no significant difference between rAd5-HK and control groups (P >0.05). Aktl and COX-2 protein expression was downregulated by 70.5% and 63.7% respectively ( P < 0.01 ) in rAd5-HK group as compared with control group ( P > 0.05 ). Conclu-sion The shRNA aclenovirus vector targeting Akt1 and COX-2 can specifically inhibit Akt1 and COX-2 expression,and this may be a new strategy in gastric carcinoma gene therapy targeting Akt1 and COX-2.     

恶性疟原虫RNA组分的分离

恶性疟原虫ＲＮＡ组分的分离南京军区福州总医院检验中心第一军医大学疟疾免疫研究室福州３５０００１兰风华，林来兴妹，赵雨田，毕惠祥，彭一兵，李英杰为了研究恶性疟原虫的ＲＮＡ，综合文献报道的多种方法，建立了从同批虫体中分离多个不同ＲＮＡ组分的方法，效果良好...     

卵巢肿瘤细胞DNA及RNA含量的定量分析及其临床意义

本资料对９３例不同性质的卵巢肿瘤细胞ＤＮＡ及ＲＮＡ含量进行了定量研究，其中５０例良性、４３例恶性。并对患者进行１～５年的随访。结果是卵巢良性肿瘤的异倍率（假阳性）为４４％，恶性肿瘤异倍率为８６．０％。以“标准ＤＩ”及“标准ＲＩ”为指标判断卵巢肿瘤性质的准确率较以“异倍性”为高，且双指标同时应用高于任一单指标：对卵巢良恶性肿瘤的诊断准确率分别为９０％和９５．３％。提出“标准ＤＩ”和“标准ＲＩ”是判断卵巢肿瘤性质的理想指标。且ＤＮＡ及ＲＮＡ含量与卵巢癌预后有密切关系。     

抗-HCV与HCV-RNA在丙型肝炎诊断中的观察

目的 探讨早期检测抗-HCV和HCV-RNA对诊断丙型肝炎的价值。方法 通过用酶联免疫吸附法(ELISA)和逆转录PCR法，对198例丙型肝炎患者检测其抗-HCV和HCV-RNA。结果 抗-HCV总阳性率为84％，抗-HCV、HCV-RNA同时阳性为58％，抗-HCV单项阳性为26％，抗-HCV阴性而HCV-RNA阳性为16％。结论 HCV-RNA对早期HCV感染的诊断以及抗-HCV阴性的慢性丙肝的诊断有重要意义。对怀疑HCV感染者应同时检测抗-HCV和HCV-RNA，才能对不同时期的HCV感婆作出准确及时的诊断。     

基因功能研究策略

美国塞莱拉遗传信息公司通过人类基因组计划，于2001年在美国《科学》杂志和英国《自然》杂志上联合宣布，他们绘制出了准确、清晰、完整的人类基因组图谱。基因组计划完成后，新的难题摆在了科学家的面前，那就是基因功能的研究以及怎样提高基因功能研究的效率等问题。对于一种基因，阐明基因的结构与生物学功能、基因的结构与生物学和临床医学之间的相互关系以及新基因表达调节的机制，是目前基因的分子生物学研究领域中最具挑战性的工作。当前主要采用以下技术。