Targeting an RNA-Binding Protein Network in Acute Myeloid Leukemia

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不同梅毒血清学诊断方法的临床检测与效果评价

目的探讨rTpN15-17-47-ELISA、RPR和TPPA三种用于梅毒血清抗体检测方法的敏感性和特异性。方法三种方法分别检测50份无梅毒病史健康人血清、11例类风湿关节炎（RA）、5例肾病综合征（NS）及122例确诊梅毒患者血清标本中梅毒抗体,对各方法的检测结果进行比较。结果rTpN15-17-47-ELISA对所有健康人血清、RA患者及NS患者血清检测结果均为阴性,对梅毒患者血清标本检测阳性率为97．5％,与TPPA（96．7％）相似（P〉0．05）,且均高于RPR（80．3％）。结论本研究中建立的以重组融合蛋白质rTpN15-17-47为抗原的ELISA有望成为高度敏感和特异的梅毒患者血清学筛查方法。     

P15、P27和Bcl-2在人食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的探讨人食管鳞状细胞癌组织P15、P27和Bcl-2的表达及其临床意义。方法用免疫组化及Westernblot方法检测人食管鳞癌组织中P15、P27和Bcl-2的表达,结合病例随访资料分析其临床意义。结果 48例食管鳞癌病例获得完整随访资料,鳞癌组织中Bcl-2的表达（90.5%）明显高于癌旁正常组织（6.3%）（P〈0.05）;高分化鳞状细胞癌组织中Bcl-2的表达（80%）明显低于低分化鳞癌（91.7%）（P〈0.05）;在有淋巴结转移的鳞癌中Bcl-2的表达（100%）明显高于无淋巴结转移鳞癌（83.3%）（P〈0.05）。P15、P27在人食管鳞状细胞癌组织中的表达显著低于癌旁正常黏膜组织（P〈0.05）,而在高级别上皮内瘤变中P15、P27的表达就明显降低（P〈0.05）。结论 P15、P27和Bcl-2的表达与人食管鳞癌的发生及进展有一定相关性;P15、P27表达的降低为食管鳞癌发生的早期事件,检测P15、P27和Bcl-2的表达对人食管鳞癌的早期诊断、判断预后有参考价值。     

15 - 羟前列腺素脱氢酶在大肠腺瘤和腺癌组织中的表达

目的：探讨15-羟前列腺素脱氢酶（15-PGDH）在腺瘤和腺癌组织中的表达和意义。方法：选取肠镜检查和手术活检组织标本118例,其中正常大肠黏膜30例,大肠腺瘤43例,大肠腺癌组织45例。用Real Time PCR检测15-PGDH mRNA的表达,免疫组织化Elivision法检测组织中15-PGDH的蛋白表达。结果：15-PGDH在大肠腺癌组织中的mRNA的表达、阳性表达率及光密度值均低于大肠腺瘤及正常黏膜组（P〈0.05）;且大肠腺瘤组低于正常黏膜组（P〈0.05）。结论：15-PGDH表达降低或缺失,可能是大肠腺癌发生过程中的重要环节。     

模拟肽Gap27抑制缝隙连接蛋白43在帕金森病小鼠模型中的作用

目的探索在6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine，6-OHDA)诱导的帕金森病(Parkinson’s disease，PD)小鼠模型中，应用缝隙连接蛋白43(connexin 43，Cx43)选择性抑制剂模拟肽Gap27能否改善多巴胺神经元死亡以及对Cx43表达的影响。方法将18只C57BL/6小鼠随机分为对照组、6-OHDA组与6-OHDA+Gap27组，每组6只，进行双侧黑质脑立体定位注射。对照组注射抗坏血酸盐溶液，6-OHDA组注射6-OHDA溶液，6-OHDA+Gap27组注射6-OHDA和Gap27混合溶液，用免疫组织化学法对多巴胺神经元标志物酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase，TH)染色检测多巴胺神经元数量，实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction，qRT-PCR)检测Cx43信使核糖核酸(messenger ribonucleic acid，mRNA)表达，免疫荧光染色检测Cx43蛋白分布，Western blot法检测小鼠中脑Cx43蛋白及Cx43的第368位点丝氨酸磷酸化(Cx43 phosphorylation at serine 368，Cx43-ps368)蛋白含量。结果注射6-OHDA后，小鼠出现黑质多巴胺神经元大量死亡，6-OHDA组TH阳性神经元数量降为对照组的27.7%±0.02%(P < 0.01)，模拟肽Gap27的使用减少了多巴胺神经元死亡数量，6-OHDA+Gap27组TH阳性神经元数量为6-OHDA组的(1.64±0.16)倍(P < 0.05)；此外，6-OHDA引起Cx43蛋白含量增加，Cx43-ps368蛋白含量降低。Gap27减弱了6-OHDA引起的Cx43蛋白与Cx43-ps368蛋白含量变化，6-OHDA组中脑总Cx43蛋白含量为6-OHDA+Gap27组的(1.44±0.07)倍(P < 0.05)，为对照组的(1.68±0.07)倍(P < 0.01)，且6-OHDA组Cx43-ps368蛋白含量及占总Cx43蛋白比例显著低于6-OHDA+Gap27组(P＜0.05)。结论模拟肽Gap27在6-OHDA诱导的小鼠模型中可减少黑质多巴胺神经元死亡从而发挥神经保护作用，6-OHDA引起的Cx43蛋白过表达对多巴胺神经元可能存在神经毒性，而降低Cx43蛋白水平及维持Cx43-ps368蛋白水平可能是Gap27发挥保护作用的机制。     

Analysis of the HNF4A isoform-regulated transcriptome identifies CCL15 as a downstream target in gastric carcinogenesis

Objective:Hepatocyte nuclear factor 4α (HNF4A) has been demonstrated to be an oncogene in gastric cancer (GC). However, the roles of different HNF4A isoforms derived from the 2 different promoters (P1 and P2) and the underlying mechanisms remain obscure.Methods:The expression and prognostic values of P1- and P2-HNF4A were evaluated in The Cancer Genome Atlas (TCGA) databases and GC tissues. Then, functional assays of P1- and P2-HNF4A were conducted both in vivo and in vitro. High-throughput RNA-seq was employed to profile downstream pathways in P1- and P2-HNF4A-overexpressing GC cells. The expression and gene regulation network of the candidate target genes identified by RNA-seq were characterized based on data mining and functional assays.Results:HNF4A amplification was a key characteristic of GC in TCGA databases, especially for the intestinal type and early stage. Moreover, P1-HNF4A expression was significantly higher in tumor tissues than in adjacent non-tumor tissues (P < 0.05), but no significant differences were found in P2-HNF4A expression (P > 0.05). High P1-HNF4A expression indicated poor prognoses in GC patients (P < 0.01). Furthermore, P1-HNF4A overexpression significantly promoted SGC7901 and BGC823 cell proliferation, invasion and migration in vitro (P < 0.01). Murine xenograft experiments showed that P1-HNF4A overexpression promoted tumor growth (P < 0.05). Mechanistically, RNA-seq showed that the cytokine-cytokine receptor interactions pathway was mostly enriched in P1-HNF4A-overexpressing GC cells. Finally, chemokine (C-C motif) ligand 15 was identified as a direct target of P1-HNF4A in GC tissues.Conclusions:P1-HNF4A was the main oncogene during GC progression. The cytokine-cytokine receptor interaction pathway played a pivotal role and may be a promising therapeutic target.     

人白细胞介素15基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

目的 克隆人白细胞介素（IL）15全长cDNA,并在大肠杆菌中表达。方法从人外周血分离的淋巴细胞中提取总RNA,通过RT—PCR扩增出hIL-15全长cDNA。构建到原核表达载体pET28a（＋）中,通过卡那霉素平板筛选及PCR鉴定,挑出阳性克隆进行扩增,DNA测序正确后,转化到大肠杆菌BL21（DE3）中,扩增后IPTG诱导表达。通过SDS-PAEG及Western-blot方法鉴定表达的融合蛋白。结果 成功构建人IL-15表达载体,并表达于大肠杆菌中。SDS—PAEG及Western-blot分析显示表达的融合蛋白分子量为16．1ku,与理论值相符。结论 获得了hIL-15融合蛋白,为hIL-15单克隆抗体的制备及其功能研究奠定了基础。     

Ca15-3在乳腺外Paget病鉴别诊断中的价值

目的：探讨Ｃａ１５３ 在Ｐａｇｅｔ 病鉴别诊断中的价值。方法：对１１ 例阴囊Ｐａｇｅｔ 病回顾性地做Ｃａ１５３、ＥＭＡ、ＣＥＡ和ＨＭＢ４５ 免疫组化染色,并以４ 例Ｂｏｗｅｎ 病和１ 例恶性黑色素瘤做对照。结果：Ｃａ１５３ 、ＥＭＡ 在Ｐａｇｅｔ 病和大、小汗腺及皮脂腺均有较强的表达,４ 例Ｂｏｗｅｎ 病均无Ｃａ１５３ 表达,但其中２ 例有ＥＭＡ 表达。ＣＥＡ 在６ 例（５４．５ ％）Ｐａｇｅｔ 病中有表达。ＨＭＢ４５ 只在恶性黑色素瘤中表达。结论：Ｃａ１５３ 在Ｐａｇｅｔ 细胞的相对特异性表达提示它可作为Ｐａｇｅｔ 病与Ｂｏｗｅｎ 病鉴别诊断的标志物,其对诊断的敏感性与ＥＭＡ 相同,但特异性高于ＥＭＡ。同时还说明Ｐａｇｅｔ 病的发生可能与汗腺有关。