水凝胶三维培养对人羊膜间充质干细胞特性及旁分泌效应的影响

文题释义：水凝胶三维培养：应用安全稳定的天然或合成聚合物材料为细胞提供一个空间、立体的生存环境,可增强细胞的黏附、增殖及分泌细胞因子能力。 旁分泌效应：以往研究认为干细胞应用于创面治疗的潜能是干细胞归巢分化为损伤组织,后来发现移植的干细胞大多停留在肝、脾,很少能到达损伤创面。目前研究证实间充质干细胞通过分泌某些营养因子作用于临近的靶细胞,起到促进创面愈合的作用。 背景：研究表明间充质干细胞在创面愈合中具有减轻炎症反应、促进创面愈合、减轻瘢痕形成的作用,然而以往的普通二维培养环境由于存在细胞间接触性抑制,可能导致细胞的基因表达、信号传导和形态学存在差异。 目的：观察人羊膜间充质干细胞旁分泌创面愈合相关因子的能力是否受二维培养环境与三维培养环境的影响。 方法：利用传统酶消化法获得人羊膜间充质干细胞后,分别接种于普通细胞培养瓶(二维培养)与ShakeGel^TM 3D水凝胶中(三维培养),将水凝胶中的人羊膜间充质干细胞分别进行成脂、成骨、成软骨诱导分化,免疫荧光染色确定细胞分化方向;待两种培养环境中的人羊膜间充质干细胞融合至70%-80%,于倒置相差显微镜和激光共聚焦显微镜下观察细胞的生长特点及形态;培养24 h后,应用RT-qPCR技术测定细胞旁分泌创面愈合相关因子的mRNA相对表达量;培养48 h后,利用ELISA试剂盒检测细胞旁分泌创面愈合相关因子的蛋白表达量。 结果与结论：①二维培养组人羊膜间充质干细胞呈扁平状,为典型间充质样细胞形态;三维培养组人羊膜间充质干细胞呈圆形,均匀分散于水凝胶的每一层;②三维培养中的人羊膜间充质干细胞具有3系诱导分化潜能;③三维培养组白细胞介素6、白细胞介素8、表皮生长因子、碱性成纤维细胞因子、透明质酸、肝细胞生长因子、血管内皮生长因子mRNA相对表达量高于二维培养组(P < 0.001,P < 0.05),两组白细胞介素4、白细胞介素10、金属蛋白酶组织抑制因子、基质金属蛋白酶、转化生长因子、角化细胞生长因子mRNA相对表达量比较差异无显著性意义(P > 0.05);④三维培养组白细胞介素6、白细胞介素10、表皮生长因子、碱性成纤维细胞因子、白细胞介素8、肝细胞生长因子、转化生长因子β1、血管内皮生长因子蛋白表达量高于二维培养组(P < 0.001,P < 0.01,P < 0.05),两组白细胞介素4、金属蛋白酶组织抑制因子、基质金属蛋白酶、角化细胞生长因子蛋白表达量比较差异无显著性意义(P > 0.05);⑤结果表明,水凝胶三维培养环境中的人羊膜间充质干细胞可呈现更好的形态及创面修复相关因子旁分泌生物学效应。 ORCID: 0000-0002-9744-2176(王旗) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程     

膜诱导联合皮瓣移植修复长段骨缺损并软组织缺损

文题释义：骨诱导膜技术：包含体内形成诱导和诱导膜内植骨2个阶段,其中体内形成诱导膜首先行骨缺损部位彻底清创,依据骨折具体状况选取合适固定方式对骨折行稳定固定,采用聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥填充骨缺损部位,感染性骨缺损则依据细菌培养药敏结果或经验采用含敏感抗生素骨水泥。该术后6-8周纵行切开诱导膜结构,小心去除骨水泥,采用钻头或骨锉去除两侧骨端和髓腔硬化骨,促进植骨融合,于骨膜内填充自体松质骨,缝合诱导膜,预防移植骨重吸收。 Iliazarov外固定牵张成骨：经过应力牵拉刺激加速骨折断端间充质干/祖细胞分化增殖,加速生成新骨与肢体重建,在修复骨缺损时还可恢复肢体长度完成骨折断端加压愈合。但Iliazarov外固定牵张成骨需要长时间固定,技术操作复杂,治疗周期长,费时费力。 背景：采用膜诱导技术治疗长段骨缺损具有并发症少、治疗效果显著且操作简便等优势,既往研究多采用该技术治疗软组织条件较好的骨缺损患者,对于骨缺损且软组织缺损面积较大或者伴随感染等患者的研究较少。 目的：分析膜诱导技术联合皮瓣移植修复长段骨缺损并软组织缺损的疗效。 方法：选择2016年10月至2018年8月南华大学附属南华医院收治的长段骨缺损合并软组织缺损患者15例,平均年龄(47.15±8.16)岁,创面软组织缺损面积5.1 cm×3.4 cm至21.8 cm×9.4 cm,骨缺损长度5.8-19.5 cm,平均(11.4±2.3) cm。对于创面轻度污染者行清创、骨折外固定、骨缺损区域骨水泥填塞,局部带蒂皮瓣或游离皮瓣覆盖皮肤创面;对于创面感染患者,先予封闭式负压引流治疗,待感染控制后再填充骨水泥及皮瓣手术。一期术后8-12周行二期植骨手术,术后随访12个月。试验获得南华大学附属医院伦理委员会批准。 结果与结论：①创面轻度污染的9例患者,清创后固定外固定架、填充骨水泥和皮瓣移植修复软组织缺损,均未发生感染;②6例感染患者清创封闭式负压引流一二周完全控制感染后进行填充骨水泥和皮瓣手术,创面愈合;③15例患者在骨缺损二期植骨以后均骨性愈合,愈合时间在8-12个月间,平均(9.18±2.10)个月;④结果表明,膜诱导技术联合皮瓣移植可有效治疗长段骨缺损并软组织缺损。 ORCID: 0000-0002-6182-9993(陈彦名) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程     

3D打印结合虚拟手术设计治疗复杂Pilon骨折

文题释义：Pilon骨折：为发生于胫骨远端1/3波及胫骨远端关节面的粉碎性或压缩骨折,治疗关键在于有效复位骨折、恢复踝关节面正常解剖关系。目前临床上主要包括切开复位内固定、外固定术等治疗术式。 3D打印结合虚拟手术设计：是以3D打印技术与虚拟手术设计相结合,全面、直观、准确地显示骨折的立体形态和各部位解剖结构的空间关系。通过3D Objects窗口中的Move和Rotate对骨折块进行虚拟移动并复位,根据虚拟操作情况,制定虚拟骨折块复位方式、移动距离及旋转角度,可以缩短手术时间、减少手术创伤及出血量、获得更好的骨折复位及功能恢复的一种方法。 背景：Pilon骨折主要是垂直压缩暴力累及胫骨远端关节面的骨折,尤其是高能量损伤的Pilon骨折,其骨折移位明显,干骺端不同程度的压缩、粉碎,高度不稳定、关节软骨原发性损伤以及关节面不平整是Pilion骨折的特征,因其治疗难度大、并发症多、致残率高,已成为骨科最具挑战性的难题之一。良好的术前规划与设计可减少并发症的发生,获得更好的修复效果。 目的：探讨3D打印技术结合虚拟手术设计在复杂Pilon骨折治疗中的应用效果。 方法：选择2017年8月至2018年11月玉林市中西医结合骨科医院收治的88例复杂Pilon骨折患者,按随机数字表法分为2组,3D打印组38例,对照组50例。3D打印组采用3D技术结合虚拟手术设计辅助进行手术治疗,对照组采用传统常规手术。记录2组手术时间、手术出血量、手术切口长度、钢板一次性成功放置率、术后踝关节功能恢复情况及术口愈合情况。 结果与结论：①3D打印组在手术时间、手术出血量、手术切口长度、钢板一次性成功放置率、复位满意度(Burwell-Charnley骨折复位放射学评价)、术后12个月随访功能恢复程度(Mazur踝关节评分)、术口愈合情况方面均优于对照组,差异均有显著性意义(P < 0.05);②提示与传统常规手术相比,使用3D打印结合虚拟手术设计治疗复杂Pilon骨折可以缩短手术时间、减少手术创伤及出血量,获得更好的骨折复位及功能恢复。 ORCID: 0000-0002-7553-7254(梁周) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：人工关节;骨植入物;脊柱;骨折;内固定;数字化骨科;组织工程     

富血小板血浆联合负压引流治疗慢性难愈性创面的Meta分析

文题释义：富血小板血浆：是一种调节炎症反应、刺激和加速组织愈合的新型生物技术,其富含各种生长因子,包括血小板源生长因子、转化生长因子β、成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子等,通过多种机制(包括调节炎症、血管生成及新组织的合成和重塑)在内部帮助创建最有利于组织稳态恢复的生物环境。慢性难愈性创面：目前对于慢性难愈性创面的定义尚未达成明确的共识,一般是指由于各种因素引起的经过常规治疗干预,不能在可预期的时间内按生物学规律完全愈合的创面,其潜在病因可能与全身性疾病或局部疾病有关。   背景：富血小板血浆与负压引流疗法已被广泛应用于各种慢性创面的治疗,并取得了良好的临床效果,但两者联合应用于慢性难愈性创面的效果尚缺乏来自随机对照研究的证据。 目的：评价富血小板血浆联合负压引流疗法治疗慢性难愈性创面的效果。方法：使用计算机对国内外数据库(CNKI、维普网、万方数据库、SinoMed、Web of Science、PubMed、EMbase等)进行检索,检索范围从建库至2019年6月,所有关于富血小板血浆联合负压引流疗法治疗慢性难愈性创面效果的随机对照试验,对纳入研究的文献采用Cochrane系统评价方法进行评价,采用Review manager 5.3软件进行Meta分析,分析的结局指标包括创面愈合率、创面愈合时间、住院时间、疼痛评分、细菌阳性率。结果与结论：①共纳入11篇随机对照试验,包括743例慢性创面患者,观察组均采用富血小板血浆联合负压引流疗法进行干预,对照组采用常规换药或者单纯负压引流疗法进行干预;②Meta分析显示与对照组比较,观察组创面愈合率升高[RR=2.19,95%CI(1.82,2.62),P < 0.000 01]、创面愈合时间缩短[SMD=-0.81,95%CI(-1.00,-0.62),P < 0.000 01]、住院时间缩短[MD=-7.11,95%CI(-8.12,-6.11),P < 0.000 01]、细菌阳性率降低[RR=0.35,95%CI(0.22,0.54),P < 0.000 01];两组疼痛评分比较差异无显著意义[SMD=-5.97,95%CI(-14.33,2.40),P=0.16];③结果表明,富血小板血浆联合负压引流疗法能促进慢性难愈性创面的愈合,降低感染发生率。 ORCID: 0000-0003-2057-9542(顾蓥璇) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

Liquid Formulation of Gemcitabine Increases Venous Pain in Patients With Cancer: A Retrospective Study

PurposeVenous pain induced by peripheral intravenous infusion of gemcitabine has remained an unresolved issue in clinical practice. This study aimed to identify differences between gemcitabine formulations as well as risk factors associated with gemcitabine-induced venous pain in patients with cancer.MethodsWe retrospectively analyzed data from consecutive patients with cancer who had received chemotherapy including a lyophilized or liquid formulation of gemcitabine diluted with 5% glucose solution via a peripheral vein. The study was conducted at Ehime University Hospital using electronic medical records dated between January 2015 and July 2017. The primary end point was the prevalence of venous pain at the administration site during gemcitabine infusion, classified as injection site reaction of grade ≥2 according to the Common Terminology Criteria for Adverse Events, version 4.0. A multivariate logistic regression analysis with generalized estimating equations for longitudinal data was used to identify risk factors for venous pain during all courses of gemcitabine treatment.FindingsA total of 1150 treatment courses in 141 Japanese patients were evaluated in this study. Venous pain occurred in 115 courses (10.0%) and in 49 patients (34.8%). The multivariate logistic regression analysis with generalized estimating equations revealed that a dose increase of gemcitabine and use of the liquid formulation of gemcitabine were significantly associated with an increased risk for venous pain (dose increase, adjusted odds ratio [OR] = 1.25; 95% CI, 1.11–1.40 [P < 0.001]; and liquid formulation, adjusted OR = 12.43, 95% CI, 5.61–27.51 [P < 0.001]), whereas age, course number of gemcitabine, and use of the soft-back product of 5% glucose solution were significantly associated with a reduced risk for venous pain (age, adjusted OR = 0.75; 95% CI, 0.57–0.98 [P = 0.037]; course number, adjusted OR = 0.96; 95% CI, 0.92–0.99 [P = 0.023]; and soft back, adjusted OR = 0.39; 95% CI, 0.21–0.74 [P = 0.004]).ImplicationsThe use of the liquid formulation of gemcitabine was associated with a significant increase in the frequency of gemcitabine-induced venous pain despite dilution with 5% glucose solution compared to that with the lyophilized formulation. The lyophilized formulation of gemcitabine should hence be used in peripheral intravenous infusion for the treatment of patients with cancer.     

Assessment of naturally occurring covalent and total dimer levels in human IgG1 and IgG2

Antibody dimers, two self-associated monomers, have been detected on both recombinantly expressed and endogenous human IgG proteins. Nearly 10 years ago, Yoo et al. (2003) described low levels of IgG2 covalent dimer, in human serum, but did not quantify the levels. Here we quantify the total and covalent dimer levels of IgG2 and IgG1 in human blood, and study the origin of covalent dimer formation. Low levels (<1%) of total IgG1 and IgG2 dimers were measured in freshly prepared human plasma. Both IgG1 and IgG2 covalent dimers were also found in plasma. Whereas IgG1 covalent dimer levels were significantly reduced by steps intended to eliminate artifacts during sample preparation, IgG2 covalent dimer levels remain stable in such conditions. About 0.4% of IgG2 in plasma was in a covalent dimer form, yet very little (<0.03%) of IgG1 covalent dimer could be considered naturally occurring. IgG2 dimer also formed in vitro under conditions designed to mimic those in blood, suggesting that formation occurs in vivo during circulation. Thus, small amounts of covalent IgG2 dimer do appear to form naturally.     

变性高效液相色谱分析肺炎支原体基因类型研究

目的 运用变性高效液相色谱（denaturing high-performance liquid chromatography,DHPLC）技术检测肺炎支原体（mycoplasma pneumoniae,MP）基因型,了解儿童MP流行状况.方法 对我院300例患儿鼻咽吸出物进行表型确证试验,采用PCR对标准菌株和MP表型阳性的临床菌株进行PCR扩增,扩增产物经DHPLC分析,通过与标准菌株色谱峰比对进行临床菌株基因分型.结果 300例患儿咽拭子经过24h培养后呈阳性110例.用特异引物扩增MP-129、MP-FH标准株和标本,分别得到2 280 bp和2580bp基因片段.110株临床菌株经DHPLC分析检测出107株是P1-Ⅰ型,均是1b亚型,3株是P1-Ⅱ型,均是2a亚型.结论 运用DHPLC技术检测出本院儿童发生MP感染以P1-Ⅰ、1b亚型为主.