非诺贝特对兔脂肪细胞摄取及降解氧化型低密度脂蛋白及CD36表达的影响

为了解非诺贝特对高胆固醇血症兔脂肪细胞摄取及降解氧化型低密度脂蛋白的影响并探讨其可能机制 ,将 10只新西兰大白兔给予高胆固醇饲料饲养 8周后 ,随机分为高胆固醇组和非诺贝特治疗组 ,非诺贝特组在饲以高胆固醇饲料的基础上给予非诺贝特 (每天 30mg kg) ,共 4周。另设普通饮食对照组 5只。实验结束后 ,取皮下脂肪组织行脂肪细胞培养 ,放射配基法测定脂肪细胞对氧化型低密度脂蛋白的摄取及降解 ,半定量逆转录—聚合酶链反应测定脂肪细胞CD36及过氧化体增殖物激活型受体γmRNA的表达。结果发现 ,3组兔脂肪细胞摄取及降解1 2 5Ⅰ 氧化型低密度脂蛋白均呈现一浓度依赖性饱和型曲线 ,高胆固醇组脂肪细胞摄取及降解1 2 5Ⅰ 氧化型低密度脂蛋白明显低于对照组 ;非诺贝特组脂肪细胞摄取及降解1 2 5Ⅰ 氧化型低密度脂蛋白高于高胆固醇组 ,但仍低于对照组 ,3组间比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。逆转录聚合酶链反应发现 ,高胆固醇组过氧化体增殖物激活型受体γ及CD36mRNA表达降低 ,非诺贝特组CD36mRNA表达与对照组相似。以上提示 ,非诺贝特能改善高胆固醇血症兔脂肪细胞摄取及降解1 2 5Ⅰ 氧化型低密度脂蛋白 ,并上调CD36mRNA的表达。     

过氧化物酶体增殖体激活受体γ激动剂对炎症状态下人肾小球系膜细胞ABCA1表达的影响

目的：研究过氧化物酶体增殖体激活受体γ(PPAR-γ)激动剂15-脱氧前列腺素J2(15d-PGJ2)对炎症状态下人肾小球系膜细胞(HMC)ATP结合盒转运体A1(ABCA1)表达的影响,探讨影响受体表达和延缓肾小球疾病进展的可能干预措施。方法培养的HMC随机分为5组继续培养24 h：空白组：普通培养的细胞;对照组：5 ng/mL白细胞介素-1β(IL-1β);实验组：5 ng/mL IL-1β+2.5μmol/L 15d-PGJ2,5 ng/mL IL-1β+5μmol/L 15d-PGJ2,5 ng/mL IL-1β+10μmol/L 15d-PGJ2,应用实时定量PCR法测定不同剂量PPAR-γ激动剂15d-PGJ2对IL-1β作用下HMC ABCA1 mRNA的影响。培养的HMC随机分为4组继续培养24 h：空白组：普通培养的细胞;对照组：5 ng/mL IL-1β;实验组：5 ng/mL IL-1β+5μmol/L 15d-PGJ2,5 ng/mL IL-1β+10μmol/L 15d-PGJ2,应用Western印迹方法测定不同剂量15d-PGJ2对IL-1β诱导的ABCA1蛋白表达的影响。结果炎症因子IL-1β能够抑制HMC的ABCA1表达,15d-PGJ2呈剂量依赖性地增加IL-1β抑制的ABCA1 mRNA和蛋白表达。与对照组(5 ng/mL IL-1β)比较,2.5、5、10μmol/L 15d-PGJ2实验组ABCA1 mRNA表达分别升高1.34、2.15、2.88倍,5、10μmol/L 15d-PGJ2实验组ABCA1蛋白表达分别升高1.16、1.54倍。结论 PPAR-γ激动剂15d-PGJ2剂量依赖性改善IL-1β对ABCA1 mRNA和蛋白表达的抑制,对炎症导致的系膜细胞脂质失衡具有保护作用。     

罗格列酮通过抑制RANKL及p-ERK活化抑制类风湿关节炎破骨细胞的分化及功能

目的:探讨罗格列酮(RSG)对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)介导的破骨细胞(Oc)分化及功能的影响及其可能机制。方法:活动期RA患者滑膜体外分离培养FLS,与健康人外周血单核细胞(MNC)共培养,不同浓度RSG(0、5、10和15μmol/L)干预,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色鉴定Oc并计数;甲苯胺蓝染色和图像分析系统计算骨吸收陷窝面积;Real-time PCR检测共培养体系RANKL和OPG的mRNA表达,Western blot检测RANKL、OPG、p-ERK、p-p38和p-JNK的蛋白含量。结果:与不加RSG组比较,15μmol/L RSG干预后Oc的数量明显减少(P0.01),骨吸收陷窝面积也减少(P0.05);共培养体系RANKL的mRNA及蛋白表达明显降低,OPG的mRNA及蛋白表达明显升高(P0.01);p-ERK的蛋白含量明显降低(P0.05),p-p38及p-JNK的蛋白含量则不受影响。结论:RSG通过抑制RANKL及p-ERK活化影响RA关节微环境中组织细胞与免疫细胞的相互作用,从而抑制Oc分化及骨吸收功能。     

PPAR-γ在溃疡性结肠炎粘膜中的表达

目的了解过氧化物酶增生激活受体（ＰＰＡＲ－γ）在溃疡性结肠炎（ＵＣ）患者结肠活检粘膜中的表达及其与疾病严重度的关系。方法　采用免疫组化法测定３１例ＵＣ患者和１２例对照组的结肠活检粘膜中ＰＰＡＲ－γ的表达情况。结果　ＵＣ患者受累及相对正常的结肠上皮ＰＰＡＲ－γ的表达均较正常对照组下降，三组分别为２４．７％±１．４９％、４３．８％±２．０３％、７０．２％±３．７５％（Ｐ＜０．０５），且病变越重，表达越低。结论ＵＣ患者内镜下活检粘膜中ＰＰＡＲ－γ的表达下降，并与疾病严重程度成负相关，提示其可能与ＵＣ的发病有关。     

吉非罗齐对高脂血症兔心肌缺血再灌注损伤的影响及机制

目的探讨吉非罗齐对高脂血症兔心肌缺血再灌注损伤的影响。方法24只新西兰大白兔随机分成缺血再灌注组、吉非罗齐 缺血再灌注组(简称吉非罗齐组)和假手术组,所有动物给以高脂饮食9周以建立高脂血症兔模型,吉非罗齐组在喂养8周后同时给予吉非罗齐200mg(kg·d)口服1周。冠状动脉左前降支结扎法复制心肌缺血再灌注损伤模型。9周后观察各组血脂水平的变化及心肌细胞超微结构改变,并测定心肌梗死面积。逆转录聚合酶链反应测定心肌过氧化体增殖物激活型受体α和脂肪酸转位酶CD36 mRNA的表达。结果喂饲高脂饮食后,兔血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平明显升高(P<0.01),吉非罗齐干预1周未对血脂水平产生影响。吉非罗齐组心肌梗死面积较缺血再灌注组明显减少(P<0.05);且心肌细胞超微结构损伤明显低于缺血再灌注组。缺血再灌注组心肌过氧化体增殖物激活型受体α和CD36 mRNA的表达低于假手术组(P<0.05),而吉非罗齐组与假手术组过氧化体增殖物激活型受体α和CD36 mRNA的表达无明显差异(P>0.05)。结论吉非罗齐短期干预可减少高脂血症兔缺血再灌注后心肌梗死面积,并上调心肌过氧化体增殖物激活型受体α和CD36 mRNA的表达。     

慢性阻塞性肺疾病大鼠骨骼肌过氧化物酶体增生物激活受体γ辅激活因子-1α表达对线粒体合成的影响

目的 观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠外周骨骼肌过氧化物酶体增生物激活受体γ辅激活因子-1α(PGC-1α)与线粒体合成相关基因的表达,探讨COPD骨骼肌线粒体生物合成的变化及影响因素.方法 用2次气管内注入脂多糖(LPS)和反复烟熏的方法制作COPD大鼠模型.检测对照组和模型组大鼠外周血及骨骼肌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)分析方法检测骨骼肌PGC-1α、核呼吸因子1(NRF1)、线粒体转录因子A(Tfam)、细胞色素C氧化酶亚基Ⅳ基因(COX Ⅳ)mRNA表达,Western blot检测骨骼肌PGC-1α、NRF1、Tfam、COXⅣ蛋白相对含量.结果 模型组大鼠外周血和骨骼肌TNF-α浓度(ng/L,378.09±26.34和330.56±23.79)较对照组升高(154.70±12.98和129.77士11.79);模型组PGC-1α(0.17±0.05)、NRF1(0.20士0.08)、Tfam(0.21 ±0.04)、COXⅣ(0.25±0.07) mRNA相对表达量较对照组PGC-1α(1.00 ±0.00)、NRF1 (1.00 ±0.00)、Tfam(1.00 ±0.00)、COX Ⅳ(1.00±0.00) mRNA相对表达量明显降低.骨骼肌TNF-α表达和PGC-1α mRNA呈负相关.结论 COPD大鼠骨骼肌PGC-1α及线粒体合成相关基因表达降低,其机制可能与TNF-α高表达有关.     

PPARβ/δ在兔动脉粥样硬化模型中的表达及作用

目的 研究过氧化物酶体增殖物激活受体（Peroxisome Proliferators-activated Receptor,PPAR）-β/δ在兔动脉粥样硬化模型中的表达水平和作用方式。方法 35只雄性新西兰大白兔分为对照组（5只）、高脂组（15只）和球囊损伤组（15只）,后两组进一步分为6周、8周、10周组,每组5只。实时定量PCR（Real-time Quantitative PCR）用来检测PPARβ/δm RNA的水平,免疫组织化学法（Immunohistochemistry,IHC）和蛋白质印迹法（Western Blotting,WB）检测PPARβ/δ蛋白的表达,酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA）测定兔血清中炎症因子肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）-α,白介素（interleukin,IL）-6,IL-8和IL-10的水平。结果 高脂组和球囊损伤组的PPARβ/δ蛋白质和m RNA水平与对照组相比显著增加（P〈0.01）。此外,高脂组PPARβ/δ蛋白质水平在6-10周增加显著（P〈0.01）,PPARβ/δm RNA在8-10周组之间有显著性差异,6-8周组之间也有明显差异（P〈0.05）。PPARβ/δ蛋白质和m RNA水平在球囊损伤组各亚组之间差异显著（P〈0.01）,而且,球囊损伤组PPARβ/δ的表达水平比同一时间点的高脂组明显增加（P〈0.01）。高脂组和球囊损伤组,血清TNF-α、IL-6、IL-8和IL-10的水平与对照组相比明显上升。结论 PPARβ/δ可能参与动脉粥样硬化的进程并发挥重要作用。     

The roles and interaction of FXR and PPARs in the pathogenesis of nonalcoholic fatty liver disease

Background and study aimsTo identify the roles and interaction of farnesoid X receptor (FXR) and peroxisome proliferator activated receptors (PPARs) in Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) pathogenesis.Material and Methods16 C57/BL male FXR knockout (KO) mice and sex- and age-matched C57/BL wild type mice were received either standard rodent chow or high-fat and sucrose diet (Blank control, NAFLD, FXR KO and FXR KO NAFLD) for 8 weeks. After that, all mice were sacrificed. Liver tissues and blood samples were collected for laboratory and RT-PCR examination.ResultsNAFLD, FXR KO and FXR KO NAFLD mouse models were successful established. Compared with blank control, FXR and PPAR-α mRNA expression decreased significantly (P < 0.05), PPAR-β expression increased slightly (P > 0.05), PPAR-γ expression increased significantly in NAFLD (P < 0.05). Slight increased PPAR-α mRNA expression (P > 0.05) and markedly decreased PPAR-β and PPAR-γ expression (P < 0.05) were found in FXR KO. Compared with FXR KO group, there was a slight increase in PPAR-αand PPAR-βmRNA expression (P > 0.05) and significant increase in PPAR-γ expression (P < 0.05) in FXR KO NAFLD group. Comparison with NAFLD, PPAR-α mRNA expression increased slightly (P > 0.05), PPAR-β and PPAR-γ expression decreased significantly (P < 0.05) in FXR KO NAFLD.ConclusionFXR and PPARs interaction may play important roles in NAFLD pathogenesis.     

Identification of two novel type 1 peroxisomal targeting signals in Arabidopsis thaliana

Peroxisomes lack their own genetic material and must therefore import proteins encoded by genes in the nucleus. Amino acids within these proteins serve as targeting signals: they direct the delivery of the proteins to the organelle. The majority of soluble proteins destined for the peroxisomal matrix utilize a type 1 peroxisomal targeting signal (PTS1): a C-terminal tripeptide that follows the pattern small/basic/hydrophobic. We have discovered two new C-terminal tripeptides that target proteins to peroxisomes in Arabidopsis thaliana. The tripeptides PSL and KRR do not fit the major PTS1 consensus but cause green fluorescent protein to accumulate in peroxisomes of stably transformed Arabidopsis. We have identified forty-one proteins in the Arabidopsis genome that also bear these tripeptides at their C-termini and may therefore be peroxisomal.