三七总皂苷调控PI3K/AKT信号通路预防糖尿病大血管病变的机制

目的从PI3K/AKT信号通路研究三七总皂苷(panax notoginseng saponins,PNS)预防糖尿病大血管病变的机制。方法雄性SD大鼠分为对照组、模型组和治疗组,模型组和治疗组大鼠高脂饲料喂养6周后给予链脲佐菌素单次腹腔注射(30 mg·kg^-1体质量)建立2型糖尿病模型,成模后治疗组给予PNS灌胃干预(100mg·kg^-1体质量)。血糖仪检测大鼠空腹尾静脉血糖(FBG),ELISA法测定血清空腹胰岛素(FINS)和糖化血红蛋白(GHbA1c)水平,苏木素-伊红(HE)染色观察腹主动脉病理形态改变,荧光定量PCR检测腹主动脉标记物MMP2、MMP9、CD34、VEGF及PI3K、AKT mRNA相对表达,Western Blot法观察PI3K和AKT蛋白表达情况。结果模型组和治疗组大鼠在STZ注射造模后,FBG均显著高于对照组(P<0.01和P<0.01),两组间差异无统计学意义(P>0.05)。模型组和治疗组血清INS均显著高于对照组(P<0.01和P<0.01),治疗组INS显著低于模型组(P<0.05)。HE染色显示,与对照组比较,模型组动脉壁变薄,平滑肌细胞增多,排列紊乱,内膜不光滑;治疗组较模型组明显改善。模型组MMP2、MMP9表达较对照组显著上调(P<0.05和P<0.01),治疗组MMP9较模型组显著下调(P<0.01)。模型组CD34、VEGF表达较对照组显著上调(P<0.05和P<0.01),治疗组CD34较模型组显著下调(P<0.05)。模型组大鼠PI3K表达较对照组显著上调(P<0.05),治疗组PI3K表达较模型组显著下调(P<0.05)。模型组PI3K蛋白、p-AKT蛋白表达均显著高于对照组(P<0.01和P<0.01),治疗组PI3K、p-AKT均显著低于对照组(P<0.01和P<0.05),模型组p-AKT/AKT显著高于对照组(P<0.05),治疗组p-AKT/AKT较模型组有显著降低趋势,且与对照组差异无统计学意义。结论PNS可能通过下调PI3K/AKT信号通路预防糖尿病大血管病变。     

Korean red ginseng stimulates insulin release from isolated rat pancreatic islets

Ethnopharmacological relevance

Korean red ginseng (KRG), one of heat-processed Korean ginseng (Panax ginseng C.A. Meyer), has a long history as herbal remedy for antidiabetic effect.

Aim of the study

The effect and mechanism of KRG on stimulation of insulin release were investigated in isolated rat pancreatic islets.

Material and methods

Pancreatic islets isolated from rats were used to evaluate the insulinotropic action of KRG. The effect of Ca on the insulinotropic action of KRG was investigated.

Results

The aqueous ethanolic extract of KRG (AEE-KRG) (0.1–1.0 mg/ml) significantly evoked a stimulation of insulin release at 3.3 mM glucose compared to the control. Experiments at different glucose concentrations (8.4 and 16.7 mM) showed that AEE-KRG significantly stimulated on its own whereas it did not potentiate insulin secretion induced by glucose. The extracellular Ca²⁺-free condition, a L-type Ca²⁺ channel blocker and an ATP-sensitive K⁺ channel opener significantly inhibited insulin secretion evoked by AEE-KRG.

Conclusion

These findings suggest that KRG displays beneficial effects in the treatment of diabetes at least in part via the stimulation of insulin release in a glucose-independent manner.     

转基因西洋参冠瘿组织中人参皂苷类成分的分离鉴定

 目的分离鉴定转基因西洋参冠瘿组织中的化学成分。方法以本研究组转导和培养的西洋参冠瘿组织为实验材料,体积分数为70%乙醇超声提取,硅胶柱色谱分离,用MS,¹H-NMR、¹³C-NMR、HMBC等谱学方法确定结构。结果分离得到5个化合物,分别为20(S)-人参皂苷Rh₁(Ⅰ)、20(S)-人参皂苷Rg₃(Ⅱ)、人参皂苷Re(Ⅲ)、20(S)-达玛烷-3β,6α,12β,20,25-五醇-6-O-α-L-鼠李吡喃糖基-(1→2)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅳ)和人参皂苷Rg₁(Ⅴ)。结论上述5个成分均为首次从转基因西洋参冠瘿组织培养物中分离得到,化合物Ⅳ为新天然产物。     

三七总皂对氧化应激所致心肌细胞凋亡的抑制机制

目的 探讨三七总皂苷对氧化应激所致心肌细胞凋亡的抑制机制。方法培养乳鼠心肌细胞,采用40μM H2O2建立氧化应激损伤导致心肌细胞凋亡模型,使用流式细胞仪检测心肌细胞凋亡情况,运用westernblot检测caspase3、Cytochromec在细胞内的表达。结果H2O2作用5h可导致心肌细胞凋亡,三七总皂苷显著抑制心肌细胞凋亡,对照组、模型组和试验组凋亡率分别为（3．58±0．53）％、（26．34±3．00）％、（9．89±1．64）％,并能明显抑制caspase3、CytochromeC在细胞内的表达,对照组、模型组和试验组caspase3表达指数分别为8．48±1．36、41．51±4．68、9．86±1．56,对照组、模型组和试验组Cytochrome c表达指数分别为8．63±0．52、46．06±3．53、10．40±1．12。结论三七总皂苷对H2O2所致的心肌细胞凋亡具有明显的抑制作用,其作用机制可能是减少Cytochromec释放,抑制心肌细胞内caspase 3表达。     

三七治疗肾脏病的药理与临床研究进展

三七具有多种生物学活性。三七可通过对肾小管上皮细胞及肾成纤维细胞的作用延缓肾间质纤维化的进展。其药理作用还包括调节免疫、影响炎性因子表达、清除氧自由基、钙拮抗作用、影响物质代谢和改善微循环等。三七在临床上应用于慢性肾小球肾炎、肾病综合征、糖尿病肾病及慢性肾衰竭等各种肾脏疾病的治疗,取得了良好的疗效。对三七的药理和临床研究的进一步深入,有望为肾脏疾病的防治开辟的途径。     

朝鲜白头翁、人参和甘草的复合水提物的抗血管生成作用

目的：本研究旨在证实朝鲜白头翁、人参和甘草的复合水提物（water extract ofPulsatillakoreana（Yabe ex Nakai）Nakai ex T.Mori.,PanaxginsengC.A.Meyer andGlycyrrhizauralensisFisch,WEPPG）的抗血管生成作用。方法：使用纤维母细胞生长因子致血管生成的人类脐静脉内皮细胞模型衡量细胞的增殖、黏附及迁移,同时进行细管形成实验及纤维母细胞生长因子致鸡胚绒毛尿囊膜血管生成实验检测WEPPG的抗血管生成作用。结果：WEPPG能够显著抑制纤维母细胞生长因子所致血管生成的人类脐静脉内皮细胞的增殖、黏附及迁移。信号蛋白分析显示多种蛋白表达变化,如细胞周期素A、p63、KIP2的上调及nibrin蛋白和黏着斑激酶的下调。与对照组相比,WEPPG显著减少了鸡胚绒毛尿囊膜血管生成。结论：本研究的结果证实了WEPPG的抗血管生成作用,这可能是这种药物具有抗癌功效的原因之一。     

大孔树脂在三七叶皂苷脱色中的应用研究

目的:解决三七叶总皂苷提取中的脱色工艺技术。方法:组合大孔树脂法。结果:应用组合大孔吸附树脂,在碱性条件下多级脱色,较好地解决了三七叶总皂苷脱色困难,并实施了大规模产业化。     

人参种子皂甙和挥发油的研究

人参种子先用乙醚提取,得棕色油状液体,经半微量挥发油测定器分离出挥发油,将此挥发油用气相色谱—质谱—计算机联用仪分离鉴定,得到几种有机酸。样品又用甲醇提取得总皂甙,总皂甙又经多次的硅胶柱层析,得到六种化合物。有四种与标准品一致,它们分别为R_(B1)、R_C、R_E和R_(G2)。第5种化合物的一些测试数据与Kg_3相似,还有一化合物未定。又用比色法测定了人参种子中的总皂甙含量为1.5％。     

血栓通胶囊抗急性心肌缺血及抗血栓形成的作用研究

目的 研究血栓通胶囊对冠脉结扎致急性心肌缺血模型大鼠的保护及抗血栓形成的作用。方法 采用结扎左冠状动脉前降支法复制急性心肌缺血大鼠模型,观察血栓通胶囊对各组大鼠心电图、心肌梗死范围以及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、α-羟丁酸脱氢酶(α-hydroxybutyrate dehydrogenase,α-HBDH)、肌酸激酶同工酶MB(creatine kinase-MB,CK-MB)的影响;采用体外方法,观察血栓通胶囊对血栓形成及血小板聚集的影响。结果 血栓通胶囊60、30、15 mg/kg组可显著减少心肌缺血模型大鼠心肌梗死范围,降低血清LDH、CK及CK-MB水平;其中血栓通胶囊60 mg/kg组对心电图异常发生百分率有明显抑制作用。血栓通胶囊30、15 mg/kg可显著促进体外血栓溶解;血栓通胶囊60、30、15 mg/kg可显著抑制体外ADP、胶原诱导血小板聚集。结论 血栓通胶囊对大鼠急性心肌缺血引起的损伤有保护作用,可能与抗血栓形成有关。     

蒺藜总皂苷含量测定研究

目的：研究蒺藜总皂苷的含量测定方法。方法：以26-O-β-D-吡喃葡萄糖-（25R）-5α-呋甾烷-20（22）-烯-2α,3β,26-三醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-（1→4）-β-D-吡喃半乳糖苷为对照品（简称化合物Ⅱ对照品）,建立紫外可见分光光度法测定蒺藜总皂苷的含量,显色试剂为E试剂和硫酸乙醇溶液,测定波长为520nm。结果：在0.06-0.2mg的范围内对照品量与吸收值之间有良好的线性关系,回归方程为Y=3.48X-0.13,相关系数r=0.9992（n=5）,平均回收率为97.28%,RSD为1.5%（n=5）。结论：以蒺藜中单体成分化合物Ⅱ为对照品进行含量测定,方法可控,重现性好,结果准确,可用于本品质量控制。