新生鼠反复低血糖引起神经元变性的动态观察

目的 建立新生鼠低血糖脑损伤模型,并观察损伤后不同脑区神经元变性的动态变化。方法 160只新生Wistar大鼠随机分为胰岛素诱导短时间低血糖组(INS-S组,n=40)、胰岛素诱导长时间低血糖组(INS-P组,n=40)、饥饿组(FAS组,n=40)和对照组(CON组,n=40)。在大鼠出生后第2、4、6天分别采用皮下注射胰岛素(15U/kg)和饥饿的手段,诱导新生鼠低血糖;在生后第6天诱导低血糖后2h、6h、1d、3d、7d和14d采用Fluoro-Jade B(FJB)染色法观察7个脑区变性神经元的动态变化,并应用特异性神经核抗原(NeuN)荧光免疫双标对FJB阳性细胞进行细胞类型鉴定。结果 INS-S组、FAS组和CON组新生大鼠各脑区各时间点均未见FJB阳性细胞,而INS-P组在旁矢状面、梨状皮层、海马齿状回、丘脑和下丘脑可见大量的FJB阳性细胞,并同时显示NeuN免疫源性。结论 胰岛素(15U/kg)皮下注射可建立稳定可靠的新生鼠低血糖脑损伤模型。新生鼠反复严重低血糖可引起广泛的神经元变性,皮层、丘脑、下丘脑和海马齿状回对低血糖损害更为敏感。     

BDNF及高亲和力受体TrKB在胆红素神经损伤豚鼠皮层及海马表达变化的实验研究

目的:探讨新生豚鼠胆红素脑神经损伤元时脑源性神经营养因子(BDNF)及受体酪氨酸激酶B(TrKB)在大脑皮质及海马表达特点。方法:取生后2～5天内的豚鼠60只,随机分为3组,C组、T1组、T2组。C组为对照组;T1组:腹腔注射晶体胆红素100μg/g;T2组腹腔注射胆红素200μg/g,分别在4h、8h处死。做脑组织切片,电镜,光镜观察病理改变,并采用免疫组化和图像分析,观察不同时间点BDNF、TrKB在皮层及海马表达变化。结果:①胆红素脑神经元损伤模型成功建立。②T14h、T24h在早期皮层及海马是降低的。随时间延长,BDNF表达明显上升,T14h、T24h与C4h比较,P<0.05,T14h、T24h与T18h、T28h比较,P<0.05。③TrKB在皮层和海马表达是随时间延长和损伤加重表达增加,T14h、T18h、T24h、T28h与C4h、C8h比较,P<0.05。结论:胆红素脑神经元损伤中,皮层和海马BDNF、TrKB升高可能减轻神经元损伤,在抑制神经元凋亡和神经元修复中发挥重要作用,有利神经元修复和再生,可能是胆红素脑神经元损伤时机体的自我保护机制之一。     

Hippocampal neuron number is unchanged 1 year after fractionated whole-brain irradiation at middle age

PURPOSE: To determine whether hippocampal neurons are lost 12 months after middle-aged rats received a fractionated course of whole-brain irradiation (WBI) that is expected to be biologically equivalent to the regimens used clinically in the treatment of brain tumors. METHODS AND MATERIALS: Twelve-month-old Fischer 344 X Brown Norway male rats were divided into WBI and control (CON) groups (n = 6 per group). Anesthetized WBI rats received 45 Gy of (137)Cs gamma rays delivered as 9 5-Gy fractions twice per week for 4.5 weeks. Control rats were anesthetized but not irradiated. Twelve months after WBI completion, all rats were anesthetized and perfused with paraformaldehyde, and hippocampal sections were immunostained with the neuron-specific antibody NeuN. Using unbiased stereology, total neuron number and the volume of the neuronal and neuropil layers were determined in the dentate gyrus, CA3, and CA1 subregions of hippocampus. RESULTS: No differences in tissue integrity or neuron distribution were observed between the WBI and CON groups. Moreover, quantitative analysis demonstrated that neither total neuron number nor the volume of neuronal or neuropil layers differed between the two groups for any subregion. CONCLUSIONS: Impairment on a hippocampal-dependent learning and memory test occurs 1 year after fractionated WBI at middle age. The same WBI regimen, however, does not lead to a loss of neurons or a reduction in the volume of hippocampus.     

神经元特异性烯醇化酶检测在小细胞肺癌诊断及疗效评定中的价值

 目的 探讨血清肿瘤标记物神经元特异性烯醇化酶(NSE)对小细胞肺癌的诊断、评估化疗效果及病情监测的临床价值.方法 采用电化学发光法检测92例肺癌、32例良性肺病患者和30例健康人的血清NSE水平.结果 肺癌组血清NSE的阳性检出率为59.78%,明显高于良性肺病组和健康对照组.其中小细胞肺癌(SCLC)患者NSE阳性率水平显著高于肺腺癌及肺鳞癌(P<0.05或P<0.01).小细胞肺癌组NSE平均水平随肿瘤临床分期而升高.SCLC组化疗后NSE水平较化疗前明显下降(P<0.001或P<0.01).结论 血清NSE水平对小细胞肺癌诊断及疗效评估有重要临床参考价值.     

葛根素对新生大鼠脑细胞内钙超载的影响

目的：观察葛根素对氯化钾（KCl)和L-谷氨酸（L-Glu）引起的新生大鼠脑细胞钙超载的影响。方法：应用Fura-2/AM及双波长荧光分光光度计测定正常新生大鼠大脑皮层细胞和在加入KCl和L-Glu后大脑皮层细胞内钙离子浓度，并和经葛根素处理过的中药组作比较；西药对照组设为尼莫地平用药组。结果：葛根素在终浓度2.4μmol/L时，对以KCl和L-Glu诱导的大脑皮层细胞内钙离子浓度的升高具有抑制作用；同对照组相比，在对以KCl诱导的大脑皮层细胞内钙离子浓度的升高的抑制作用两者无统计学意义；但对以L-Glu诱导的大脑皮层神经细胞内钙离子浓度升高的抑制作用。葛根素组要优于西药对照组。结论：葛根素对KCl和L-Glu诱导的新生大鼠大脑皮层细胞内钙离子浓度的升高具有拮抗作用。     

活性氧对培养神经元形态及存活率的影响

用黄嘌呤氧化酶一次黄嘌呤系统作用于分散培养的鸡胚神经细胞,观察活性氧对神经元形态及存活率的影响。结果表明,活性氧处理后的神经元突起大量脱落,含“空泡”细胞数目增多,大量神经元死亡。在培养液中加入超氧化物歧化酶可以保护神经元免受活性氧损伤,但加入过氧化氢酶后的效应不显著。提示引起神经元损伤的主要因素是超氧阴离子自由基,过氧化氢的直接效应不明显。     

肝细胞生长因子促进神经干细胞向神经元细胞方向的分化

目的观察肝细胞生长因子(HGF)对神经干细胞向神经元细胞方向分化的作用。方法取孕14~17d的胚胎大鼠,分离其脑组织,以无血清培养基培养,得到神经干细胞后,加入HGF诱导其定向分化,以免疫细胞化学和流式细胞术的方法来鉴定分化得到的神经元细胞及其比例。结果加入HGF和胎牛血清(FBS)的实验组镜下神经元细胞较仅加入胎牛血清的对照组多,流式细胞术计数分化成神经元细胞的比例为55·76%,而对照组阳性率为32·69%;镜下直接计数实验组NSE阳性神经元的比例为(53·34±2·81)%,而对照组仅(30·78±3·13)%(P<0·05)。结论HGF具有促进神经干细胞向神经元细胞方向分化的作用。     

线粒体在铝致神经细胞凋亡中的调控作用

目的探讨线粒体在铝致神经细胞凋亡中的调控作用。方法体外培养出生后0-3 d大鼠神经细胞,并用不同浓度氯化铝染毒,光学显微镜和电镜下观察神经细胞的凋亡现象及线粒体的形态学改变,并检测线粒体酶和凋亡相关蛋白的含量。结果光学显微镜及电镜下可以见到凋亡细胞的特征性改变,线粒体在电镜下肿胀变形并有结构的改变。线粒体酶在染毒低浓度组有代偿性活力升高,但中、高浓度组酶的活力仍然下降,高浓度组各酶活力显著低于对照组(P<0.01)。凋亡相关蛋白Caspase的含量随染毒浓度的增加而增多,且与染毒浓度有显著相关(P<0.01,r为0.963,0.859)。细胞色素C(CytC)在染毒组从线粒体释放至胞浆,3个染毒组间CytC的含量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论线粒体的结构和酶活力的改变及其释放的促凋亡因子在铝致神经细胞凋亡的过程中起着重要的作用。     

急性脑血管病神经元特异性烯醇化酶的测定及临床意义

目的 探讨急性脑血管病患者血清神经元特异性烯醇化酶(NSE) 浓度的变化及其临床意义.方法 应用放射免疫分析法测定50例急性脑血管病患者和30例正常人血清NSE浓度.病例组包括脑出血20例,脑梗死30例.应用直线相关分析方法分析NSE 浓度与病灶大小、病情严重程度以及预后的关系.结果 对照组的NSE 浓度为(9.14±4.39)μg/ L ,脑出血组NSE 浓度为(26.30±14.59)μg/ L,脑梗死组NSE 浓度为(24.95±12.88)μg/ L,病例组与对照组之间差异有统计学意义(P《0.01) , 患者组之间差异无统计学意义(P》0.05) .NSE 浓度与病变的大小、病情严重程度( GCS 评分) 和预后( GOS 评分) 之间存在相关性(P《0.01) .结论 急性脑血管病患者血清NSE 浓度明显增高, NSE 浓度的高低不仅为神经元损伤程度提供定量信息, 而且也是判断病情、评估预后的重要参数.     

高压氧治疗新生儿缺氧缺血性脑病血清NSE、MBP的变化

目的 探讨高压氧治疗对HIE患儿NSE、MBP水平变化的影响.方法 HIE 患儿86例,随机分为高压氧组43例和常规治疗(对照组) 43例,同时又选同期出生的正常新生儿30例为正常对照组(正常组).在治疗前后分别用酶联免疫分析法检测血清NSE、MBP水平.结果 高压氧组及对照组患儿NSE、MBP水平明显高于正常组;治疗后高压氧组NSE、MBP水平显著低于对照组.结论 SE及MBP水平是反映脑组织损伤的较好的生化指标, 临床上早期用高压氧治疗中、重度HIE有较好的疗效.