急性非淋巴细胞白血病的细胞和分子遗传学研究进展

随着细胞与分子遗传学技术在急性白血病(AL)的研究进展中的运用,AL的诊断分型已由1976年提出的以形态学为主的FAB分型发展到2001年的MICM分型,突出体现了细胞和分子遗传学的改变在AL诊断分型的重要地位。除此之外,细胞和分子遗传学改变还对急性白血病的危险度分层、预后判断、治疗指导及新药研发起着重要的指导作用。本文将论述染色体异常和融合基因的表达对急性非淋巴细胞性白血病(ANLL)的诊断分型、预后评估和治疗的指导作用,并对染色体核型正常的ANLL几种常见的基因突变对疾病预后评估做个总结。近年来,对ANLL各型白血病分子细胞遗传学机制的进一步阐释有助于开发新的白血病治疗策略。     

经皮穿刺水刀髓核切吸术治疗腰椎间盘突出症

目的:评估经皮穿刺椎间盘水刀髓核切吸术治疗腰椎间盘突出症的临床可行性.方法:2009年2月～6月自协作组内选取符合本研究入选标准的腰椎间盘突出症患者69例,采用美国HydroCision公司生产的SpineJet(脊柱椎间盘水刀)在C型臂X线机、CT或DSA引导下行经皮穿刺椎间盘水刀髓核切吸术.观察并记录术后15天、30天、90天、150天、210天和270天的疗效.结果:用改良Macnab方法进行评估,术后15天、30天、90天、150天、210天和270天的疗效优良率分别是56.5%,82.6%,88.4%,98.6%,98.6%,98.6%,治疗效果与术后时间呈正相关(P＜0.01).结论:经皮穿刺椎间盘水刀髓核切吸术具有操作简单、易于掌握、创伤小、不影响脊柱生物力学稳定性、无严重并发症等特点.     

miR-142-3p靶向调控mll-af4融合基因的实验研究

本研究探讨mll-af4融合基因的表观遗传学调控机制,以筛选靶向调控mll-af4融合基因的microRNA。利用Targetscan在线分析软件预测特异性靶向mllaf4基因3′端非翻译区域（3′-untranslated region,3′UTR）的microRNA,采用PCR方法从1例健康供者DNA中扩增mll-af4基因3′UTR序列,插入经EcoRI和PstI双酶切的荧光素酶报告载体pGL3-M,采用脂质体SuperFect包裹荧光素酶重组质粒及microRNA表达质粒转染293T细胞,应用双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性。miR-142-3p mimics以脂质体Hiperfect转染至RS4;11细胞,选用实时定量PCR及Western blot检测mll-af4 mRNA及蛋白的表达。结果表明,成功构建了含有1935bp、2104bp和1371bp的mll-af4基因3′UTR序列的荧光素酶报告重组质粒pGL3-AF4-3′UTR,并通过酶切及基因测序方法鉴定得到证实。荧光素酶报告实验提示,miR-142组荧光素酶活性明显低于对照组。RS4;11细胞中过表达miR-142-3p可以明显下调MLL-AF4融合蛋白及mRNA表达。结论：miR-142-3p通过靶向结合mll-af4基因3′UTR的结合位点特异调控mll-af4基因表达。     

抗人FcεRIα单克隆抗体的制备及初步鉴定

目的制备鼠抗人IgE高亲和力受体FceRIa的单克隆抗体并对其进行初步鉴定,为过敏性疾病的相关研究提供条件。方法用人FceRIα重组蛋白作为抗原免疫BALB／C小鼠,常规方法进行融合,经筛选及克隆化建立可稳定分泌抗人FceRIαmAb的杂交瘤细胞株,用ELISA、免疫荧光标记、荧光显微镜和流式细胞仪分析以及Western—Blot方法进行抗体的初步鉴定。结果筛选到2株可稳定分泌抗人FcεRIα单克隆抗体的细胞株,流式细胞术分析此2株抗体与CHO3D10细胞的结合率均大于95％,免疫荧光显示2株抗体均能与FcεRIα发生特异性反应。Western-Blot结果显示抗体轻重链分别约28Kd与50Kd。结论制备的两株FcεRIα的单克隆抗体可特异性与细胞表面FcεRI结合,可用于肥大细胞功能以及变态反应病临床治疗的进一步研究。     

实时定量PCR法检测淋巴瘤患者Bcl-2／IgH融合基因及其临床意义

本研究目的是检测滤泡性淋巴瘤和弥漫大B细胞淋巴瘤患者bcl-2／IgH融合基因的表达水平,以探讨其临床意义。以SYBRGreenI荧光染料实时定量PCR方法检测20例患者外周血和（或）骨髓bcl-2／IgH融合基因的表达水平,并对其中4例患者bcl。2／IgH融合基因的表达水平进行动态监测。结果表明,在bcl-2／IgH融合基因阳性表达的病例中,骨髓和外周血bcl-2／IgH融合基因的相对拷贝数分别为4．23和2．73,统计学分析差异无显著性（P=0．107）,而治疗前后融合基因的相对拷贝数均数分别为3．61和2．69,统计学分析差异有显著性（P=0．000）,初诊及复发组的bcl-2／IgH融合基因表达水平明显高于缓解组（P=0．008）,在4例患者的外周血bcl-2／IgH融合基因动态监测结果中,l例患者在临床复发前3个月bcl-2／IgH融合基因表达水平明显上升。结论：bcl-2／IgH融合基因表达水平与患者的疾病状态有一定的相关性,初诊及复发患者融合基因的表达水平高,而缓解患者融合基因的表达水平低,治疗后融合基因表达水平较治疗前明显下降,bcl／IgH融合基因表达水平的变化可能与临床疾病进程有关,检测外周血是比较可行的。     

慢性髓系白血病患者移植造血干细胞后bcr／abl融合基因变化的实时定量RT-PCR监测及其意义

为了探讨Ph阳性慢性髓系白血病（CML）患者异基因造血干细胞移植后不同时期bcr／abl融合基因水平变化的实时定量PCR监测及其意义，对21例CML患者骨髓移植后不同时期bcr／abl融合基因水平用实时定量PCR技术进行了连续监测。结果表明：21例bcr／abl融合基因阳性CML患者移植后7例未检测出融合基因，14例移植后1—6月仍可检出不同水平bcr／ab／融合基因。动态观察发现，9例bcr／abl融合基因处于较低水平，相对数在0．0074％～0．088％，于移植后第3—7月转为阴性。5例符合分子生物学复发标准，融合基因相对数在0．077％-75％。其中1例在骨髓移植后1、2、3个月融合基因相对数分别为0．95％、1．5％、0．16％，于移植后4个月自行转阴性；2例接受同一供者单个核细胞输注后bcr／abl转为阴性；2例发展为临床血液学复发，其中1例经化疗及同供者单个核细胞输注再次缓解，但bcr／abl阳性，另1例不治死亡。结论：对于ph阳性CML患者骨髓移植后连续定量监测bcr／abl融合基因水平可以了解疾病残留状态，预测分子学生物学复发，指导临床治疗，并评价疗效。     

三叉神经痛神经血管压迫的影像学评价

精确地评价三叉神经入口处神经血管压迫,对三叉神经痛患者施行微血管减压术的规划是有用的。应用界限成像融合三维磁共振脑池造影术/血管造影术能立体的显示三叉神经入口处神经血管压迫的解剖学关系,评价责任血管的存在,压迫的部位及程度。界限融合三维磁共振脑池造影术/血管造影术对三叉神经痛患者的诊断及成功地实施微血管减压术是有用的。     

CT、"C"臂导引腰椎间盘造影的穿刺技术探讨

目的探讨CT、“C“臂双相导引经皮穿刺腰椎间盘造影(CTD)的技术。方法对IDET治疗腰椎间盘突/膨出患者中的45例进行CT、“C“臂导引下腰椎间盘造影。其中5例做单层面的造影,40例做两个椎间盘层面,共85个椎间盘层面。85个椎间盘中5个位于L3~4、43个位于L4~5、37个位于L5~S1。结果45例椎间盘层面CT即刻扫描,38例椎间盘层面术后2小时CT再次扫描。观察到19例造影剂聚集在髓核内,39例造影剂不同程度同心圆样从髓核溢出,到达纤维环内、中、外层,27例见髓核内造影剂呈笔尖状,不同宽度带状穿过椎间盘后方的纤维环到达椎管内。结论在CT、“C“臂导引下经皮腰椎间盘穿刺、造影时,可观察穿刺针在椎间盘内的位置,能降低假阳性率,并在CT横断位图像上观察到造影剂在环、髓核内的分布,明确椎间盘纤维环、髓核的病理表现。     

有限化手术治疗原位复发性腰椎间盘突出症42例

目的:探讨有限化手术治疗原位复发性腰椎间盘突出症的方法及效果。方法:对2002年2月至2006年3月收治的42例因原位复发性腰椎间盘突出症行有限化手术治疗的患者资料进行回顾性分析,采用JOA评分(15分)及影像学检查评价治疗效果。结果:本组共42例,经1～5年,平均2.5年随访,无脊柱失稳表现。根据JOA评分标准,术前平均(6.2±2.3)分,术后3个月随访时平均(13.6±3.4)分,经统计学检验手术前后JOA评分差异有显著性(P<0.05),JOA评分临床改善率为85.07%,患者主观满意度优良率为87.20%。5例患者术中硬脊膜撕裂,经处理无重大并发症。结论:有限化手术治疗原位复发性腰椎间盘突出症安全可行,能有效解除神经压迫,有利于脊柱稳定,创伤小,患者术后恢复快。     

微创经皮椎弓根螺钉内固定治疗胸腰椎骨折临床疗效及手术配合

目的探讨微创经皮椎弓根螺钉Sextant系统内固定治疗胸腰椎骨折的手术效果及术中护理配合。方法 2008年10月至2010年10月我院收治33例胸腰椎单节段骨折患者,其中微创经皮椎弓根螺钉内固定治疗(微创手术组)21例,常规开放式椎弓根螺钉内固定治疗(开放手术组)12例。比较两组切口大小、术中出血量、手术时间、后凸畸形矫正情况,以及手术室护士对患者的术前心理护理及物品准备,总结术中配合。结果与开放手术组比较,微创手术组的手术切口小,术中出血量及术后引流量明显减少,手术时间明显缩短,术后Cobb角矫正、矢状径、骨折椎体的前柱高度显著改善,差异均有统计学意义(P<0.05);手术室护士充分的术前准备、积极的术中配合,确保了手术的顺利实施。结论 对手术指针充分的胸腰椎骨折患者,使用Sextant系统微创经皮椎弓根螺钉内固定治疗是一种较好的治疗选择,手术护理配合对手术的成功起重要作用;应特别注意患者体位、器械准备、无菌管理和放射保护。