宫颈脱落细胞CA-IX的表达与高危型人乳头瘤病毒感染状态的相关性研究

目的探讨碳酸酐酶IX(carbonic anhydrase-IX,CA-IX)在宫颈脱落细胞中的表达情况及与高危型人乳头瘤病毒(high risk-human papilloma virus,HR-HPV)感染的关系,分析CA-IX预测宫颈病变自然转归方向的价值。方法运用免疫细胞化学技术观察CA-IX在不同宫颈病变宫颈脱落细胞中的表达,采用HC-Ⅱ测定HR-HPV DNA,定期随访,比较CA-IX表达与HR-HPV感染状态的相关性。结果 CA-IX的表达与HPV的感染存在相关性(χ2=81.8,P=0.000)。低级别〔宫颈炎、宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN-Ⅰ)〕和高级别(CIN-Ⅱ、CIN-Ⅲ及宫颈癌)宫颈病变,CA-IX的阳性表达率差异有统计学意义(χ2=4.5,P=0.032)。不同HPV感染状态下(持续性感染、一过性感染、无HPV感染),CA-IX表达的阳性率分别为60.6%、38.4%、15.6%,差异具有统计学意义(χ2=11.69,P=0.001)。结论 CA-IX的表达与HPV感染相关,在持续性HPV感染中,CA-IX的表达阳性率较一过性HPV感染、无HPV感染明显升高,提示CA-IX有可能是参与持续HPV感染致宫颈上皮内瘤变的分子标志之一。     

氯吡格雷联合溶栓治疗急性心肌梗死的疗效评价

目的探讨和研究氯吡格雷联合溶栓治疗急性心肌梗死的临床疗效。方法选取2012年1月—2013年5月之间该院收治的50例急性心肌梗死患者作为研究对象,根据入院编号进行随机分组,分为观察组和对照组,各25例,对照组单纯采用重组人组织型纤溶酶原激酶衍生物进行溶栓治疗,观察组患者则在溶栓治疗基础上加用氯吡格雷联合治疗,对比两组患者的疗效及心肌酶谱变化。结果观察组患者总有效率92.0%,显著高于对照组患者的76.0%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗前两组患者的肌酸激酶、肌酸激酶同工酶对比差异无统计学意义,治疗后观察组显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论氯吡格雷联合溶栓治疗急性心肌梗死的疗效确切,相较于单纯溶栓治疗更具优势,能够有效降低心肌酶水平,提高疗效,值得在临床上推广和应用。     

兔肝VX2瘤活体二维多体素1H-MRS动态分析及病理对照研究

目的 探讨兔肝VX2瘤活体二维多体素1H-MRS动态变化特征.材料与方法对14只兔肝VX2瘤荷瘤兔分两期进行活体2D 1H-MRS和常规MRI检查,观察肿瘤中心部分、肿瘤周围部分与瘤周正常肝组织的代谢物波峰变化,测量代谢物峰下积分面积比值.取MRS检查相应部位标本进行常规病理学检查,并进行PAS染色,测量积分光密度.结果 肿瘤中心部分的脂质(Lip)、胆碱化合物(Cho)和糖原和葡萄糖复合物(Glyu)波峰与瘤周正常肝组织差别较大.肿瘤周围部分除Lip峰高于瘤周正常肝组织以外,Cho和Glyu峰差异不大.肿瘤中心部分的Cho/Lip和Glyu/Lip值均较瘤周正常肝组织低(P<0.05),肿瘤周围部分与瘤周正常肝组织无显著性差异(P>0.05).第二期三个部位的Glx/Lip、Cho/Lip、Glyu/Lip比值均较第一期明显降低(P<0.05).瘤周正常肝组织PAS染色积分光密度值与Glyu/Lip值之间存在显著线性相关关系(r=0.627,P<0.05).结论 活体2D 1H-MRS能动态显示兔肝VX2瘤不同区域和不同时期主要代谢物的变化,在一定程度上反映了肝组织糖原储备及肿瘤的生长、增殖、坏死情况.     

常用的蛋白质保护剂对NGF-PLGA微球性质的影响

目的研究常用的蛋白质保护剂对微球性质的影响特点。方法复乳化溶剂挥发法制备NGF-PLGA微球,分别添加葡萄糖,聚乙二醇,卵清蛋白作保护剂,观察微球的形态,载药量、包封率及体外释放特点,研究保护剂的作用特点。结果保护剂对微球的粒径、包封率和载药量影响不明显,粒径集中分布在10-40μm,载药量0．0007％-0．0011％,包封率7％～11％。保护剂主要影响微球的形态和体外释放。添加不同的保护剂,微球表面的光滑度和孔隙差别较大;体外释放的突释较小,存在明显的缓慢释放期,进入快速释放期的起始时间和释药速度受保护剂影响显著,一个月内的累积释放药量达到80％以上。结论保护剂的分子量可能是微球形态和释放不同的原因,添加分子量大的保护剂形成的微球的表面比添加分子量小的保护剂时致密光滑,体外的缓慢释放期长。     

肝、肾联合移植治疗肾移植术后移植肾功能衰竭并肝硬化一例报告

目的 报告1例移植肾功能丧失并肝炎后肝硬化者再次接受肝，肾联合移植。方法 给1例肾移植术后移植肾功能丧失并肝炎皇肝硬化患者先行失功能移植肾的切除。针对患者群体反应抗体（PRA）较高（66%），切除术后第5d开始每天给予环磷酰胺50mg。连服3个半月，并行血浆置换2次。PRA降至23%。3个半月后施行一期肝，肾联合移植，肝移植采用原位背驮式肝移植术式。供肾移植于左髂窝，肝血流开放后每间隔30min检测PRA1次，术后免疫抑制治疗采用他克莫司（FK506）。霉酚酸酯（MMF）和激素。结果 术后移植肝，肾立即发挥功能。肝动，静脉血流开放后，，PRA由23%降至5%。并维持在8%左右。术后乙型肝炎病毒表面抗原转阴，丙型肝炎病毒抗体阴性，随访3个月，移植肝，肾功能正常。结论 对于移植肾功能丧失，且合并有肝硬化，肝功能不良者，再次施行肝，肾联合移植是可行的。     

彩色多普勒超声监测肝移植术后门静脉并发症

目的 探讨彩色多普勒超声(CDI)监测肝移植术后门静脉并发症的应用价值。方法 对107例次原位肝移植患者于术前、术后应用CDI进行连续监测，监测指标包括门静脉主干内径、血流速度、血流量、血流频谱、侧支循环及腹水量等。结果 4例受者术后出现门静脉并发症：门静脉狭窄2例，门静脉狭窄并血栓形成1例，门静脉右支闭塞1例。2例门静脉主干血流量明显减少者接受经皮腔内血管成形术治疗后，门静脉高压缓解；而CDI提示门静脉血流量末见下降的2例患者，仅接受保守治疗，存活时间均超过1年。结论 彩色多普勒超声动态检查对肝移植术后门静脉并发症较为敏感，作为无创性检查手段可用于肝移植术后门静脉并发症的监测。     

肝脏低温保存肝血窦变化的实验观察

目的：探讨低温保存肝血窦超微结构的变化及其在肝微循环障碍中的作用，方法：将63只大鼠肝脏分别在低温UW液中保存0（对照组）、2、8、16、24、32和48h，然后对肝血窦进行电镜观察，结果：肝血窦内皮细胞在保存2、8h后，筛板小孔扩大，融合成许多大洞隙，16、24h细胞胞明显回缩，呈树根状，32，48h似索网状，部分内皮细胞突起，脱落，肝细胞微绒毛在保存8h后出现肿胀并形成膜浆泡从扩大的内皮小孔突入血窦；随着保存时间延长，膜浆泡增多，变大并脱落或破裂，结论：肝血窦内皮细胞的低温保存损伤和膨入血窦内的膜浆泡可引起肝微循环紊乱，导致肝血流和肝功能障碍。     

碱性成纤维细胞生长因子转染兔关节软骨细胞的研究

目的　探讨碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)基因转染兔关节软骨细胞后对培养的关节软骨细胞形态、分裂增殖及代谢等方面的影响。方法　将bFGF基因克隆于真核表达载体pHβ。AP 1中 ,构建重组真核表达载体 pHβ bFGF ,转染兔关节软骨细胞。G418筛选阳性克隆 ,检测阳性细胞bFGF基因的表达水平。测定培养软骨细胞的DNA含量、糖醛酸含量、软骨细胞增殖情况及进行细胞周期分析。结果　bFGF基因转染软骨细胞表型未见显著变化 ;bFGF基因转染组、载体对照组、空白对照组DNA含量分别为 ( 77.37± 6 .2 1)、( 40 .39± 4.33)、( 33 .77± 4.2 5 ) μg/瓶 (P <0 .0 1) ,糖醛酸含量分别为 ( 30 8.8± 10 .2 )、( 77.9± 8.7)、( 80 .2± 10 .5 ) μg/瓶 ( P <0 .0 1) ,软骨细胞G1期分别为 5 9.3± 2 .1、6 9.5± 4.0、73 .1± 3 .9(P <0 .0 5 )。结论　bFGF转染关节软骨细胞后 ,可显著促进细胞分裂增殖并缩短细胞周期 ,为软骨组织工程研究提供新的技术路线及理论基础。     

血管内皮生长因子和Fas配体共表达质粒的构建及其在细胞中的表达

目的 构建血管内皮生长因子(VEGF)和Fas配体(FasL)共表达质粒，并鉴定其在细胞中的表达情况。方法 根据入VEGFl65和FasL的cDNA序列分别设计、合成引物，经扩增、连接、酶切、插入等得到重组表达质粒pCI-VEGFl65和pCI-FasL。再以此为基础构建得到编码FasL和VEGFl65的共表达质粒pCI-FasL-IRES-VEGFl65(简称pCI-FIV)。用脂质体将各表达质粒(2μg)转染NIH3T3细胞，用流式细胞术、ELISA和Western-blot检测其FasL和VEGFl65表达情况。结果 细胞裂解液的Western-blot检测表明，重组质粒pCI-VEGFl65和pCI-FIV能表达VEGFl65。分子量与预期kD一致。细胞培养上清的ELISA检测表明，pCl-VEGFl65和pCI-FIV均能分泌性表达vEGFl65。流式细胞仪检测表明，质粒pCI-FasL、pCI-FIV稳定转染的NIH3T3细胞表面的绿色荧光阳性率分别为98．0％和96．5％，而空载体转染细胞的阳性率为3．2％。ELISA检测结果显示，pCI-FasL、pCI-FIV转染NIH3T3细胞培养上清中均存在可溶性FasL。结论 成功构建的FasL和VEGFl65共表达质粒可成功转染细胞并能分泌性表达VEGFl65，同时可表达膜结合形式的FasL和可溶性FasL，为将来血管内膜增生的基因治疗奠定了基础。     

胎儿和少儿皮肤内碱性成纤维细胞生长因子及其受体的基因表达

目的　探讨不同胎龄的胎儿和少儿皮肤中碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)及其两种受体 (bek和flg)基因表达的变化。 方法　提取 18例不同胎龄 ( 13～ 3 2周 )的胎儿皮肤和 6例少儿皮肤的总RNA后 ,分离mRNA ,用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测这 3种基因在不同组织中的表达。结果　在早期妊娠胎儿的皮肤中 ,bFGF ,flg和bek基因表达较强 ,随着胎儿的生长和发育 ,皮肤组织内这 3种基因表达逐渐降低 ,在少儿皮肤中 3种基因的表达量分别为晚期妊娠胎儿皮肤的 62 .5 % ,5 9.5 %和 5 2 .9% ,基因表达显著降低 ( P <0 .0 5 )。结论　bFGF及其受体基因可能在皮肤的发生、结构功能的维持以及伤后修复中起重要作用。这 3种基因在胎儿皮肤中表达水平较高可能与胎儿皮肤细胞增殖较快 ,皮肤创面愈合迅速有关。