脑出血大鼠脑内嗅鞘细胞移植后生长相关蛋白-43及层粘连蛋白的表达变化

目的研究嗅鞘细胞移植对大鼠脑出血后脑内生长相关蛋白-43及层粘连蛋白表达的影响。方法取新生3d的Wistar乳鼠嗅球,差速贴壁法培养获得嗅鞘细胞。40只Wistar大鼠造模后(胶原酶Ⅶ注入尾状核)随机分为嗅鞘细胞移植组和脑出血模型组。嗅鞘细胞移植组(20只)术后3d,移植嗅鞘细胞;脑出血模型组(20只)注射等量的生理盐水。两组大鼠分别在术后1d、7d、14d及28d用Bederson方法进行评分。各时间点于每组随机取3只大鼠处死,取脑组织做成石蜡切片,免疫组化法观察生长相关蛋白-43及层粘连蛋白表达的变化。结果运动功能评分显示,移植组与对照组均出现运动功能恢复,移植组明显优于对照组(P<0.05);生长相关蛋白-43及层粘连蛋白免疫组化结果表明,除术前1d外,其它各时间点生长相关蛋白-43及层粘连蛋白阳性表达值,移植组较对照组均强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论嗅鞘细胞移植可提高生长相关蛋白-43及层粘连蛋白的表达,改善脑出血后神经再生微环境,促进神经再生。     

Immunohistochemical study of merosin-negative congenital muscular dystrophy: laminin α2 deficiency in skin biopsy

We studied the immunohistochemical expression of laminin subunits α2, α1, β1 in muscle and skin biopsy samples from three patients with congenital muscular dystrophy (CMD), and from ten control patients investigated for various neuromuscular disorders. Merosin α2 chain was not detectable in the basement membrane of muscle fibers, or in the nerve endings, cutaneous nerves, and corium in the skin of the CMD patients, whereas it was clearly expressed in the skin biopsy samples from control patients, especially in the nerve endings of the arrector pili muscles. Laminin α1 chain was expressed in the corium, in the muscle fiber membranes of arrector pili muscles and in cutaneous nerve fibers, perineurium and blood vessels in controls and in CMD patients. Laminin β1 chain was faintly expressed in the corium, and a diffuse labeling was detected on arrector pili muscle with enhanced expression at nerve endings, intracutaneous nerves and capillaries, with similar findings in all biopsy specimens. For merosin-negative CMD patients, skin biopsy may provide a diagnostic alternative to muscle biopsy since merosin deficiency can be demonstrated in the skin neural structures, and in particular in the nerve endings of the arrector pili smooth muscles. Received: 29 October 1996 / Revised, accepted: 27 January 1997     

自体微粒皮与异体脱细胞微粒真皮混合移植对大鼠创面纤维连接蛋白和层粘连蛋白表达的影响

目的 探讨自体微粒皮与异体脱细胞微粒真皮混合移植对创面愈合的影响,并对有关机制做进一步研究.方法 Wistar大鼠作为供体,SD大鼠为受体,在SD大鼠背部建立全层皮肤损伤模型.90只SD大鼠分为5组,每组18只,第1组为自体微粒皮组;第2组为异体脱细胞微粒真皮移植组;第3、4、5组为混合移植组.混合移植组中自异体微粒皮的面积比例分别为:1∶1、1∶0.5、1∶0.25.术后第2、3、4周分别测量每组创面的愈合率,采集创面标本,做HE染色,检测纤维连接蛋白(FN)和层粘连蛋白(LN)、进行组间比较.结果 混合移植组与自体微粒皮移植组比较,混合移植组创面愈合率及FN、LN均高于自体微粒皮组,其中1∶0.25混合移植组最高,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 混合移植创面愈合率高于自体微粒皮移植,且自体微粒皮与异体脱细胞微粒真皮混合移植的面积比例按1∶0.25效果最佳,这可能与创面纤维连接蛋白和层粘连蛋白升高有关.     

肝癌患者血清中透明质酸、层粘蛋白、Ⅵ型胶原的测定及临床意义

目的探讨透明质酸（HA）、层粘蛋白（LN）和Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）三项肝纤维化指标在原发性肝癌和转移性肝癌血清中的变化,阐明肝纤维化和肝功能指标两者之间的相关关系。方法正常对照组30例、原发性肝癌组23例和转移性肝癌组20例。采用半自动化学发光法测定23例原发性和20例转移性肝癌病人血清中的HA、LN、Ⅳ-C三项肝纤维化指标。同时检测天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、谷氨酰转肽酶（γ-GT）三项肝功能指标。结果 43例原发性肝癌和转移性肝癌病人HA、LN、Ⅳ-C水平均明显高于正常对照组（P〈0.01）。HA、LN、Ⅳ-C原发性肝癌组与转移性肝癌组比较,有统计学差异（P〈0.05）,原发性肝癌组明显升高。肝功能指标在原发性肝癌组明显升高,与转移性肝癌组比较,有统计学差异（P〈0.01）,HA、LN、Ⅳ-C与肝功能指标之间有相关性。结论 HA、LN和Ⅳ-C是判断肝纤维化、肝硬变的程度的良好检测指标,重复性好,无创伤,便于掌握病变进展,临床应用效果好。     

复方壳多糖组织工程皮肤的组织学特性

目的评价制备的复方壳多糖组织工程皮肤在组织学方面的特性，为其修复皮肤缺损创面提供实验依据。方法通过苏木精-伊红（HE）染色、高碘酸-希夫（PAS）染色、免疫组织化学染色及电镜，观察组织工程皮肤的组织学特征，包括表皮、真皮及两者的连接结构基底膜。结果制备的复方壳多糖组织工程皮肤表皮细胞增殖活跃，分层分化良好，厚约150μm，真皮层细胞生长正常，排列有序。PAS染色示真表皮间有均匀红染的条带出现，免疫组织化学染色结果显示Ⅳ型胶原、Ⅶ型胶原、层黏蛋白反应阳性，在电镜下可见角质形成细胞间大量桥粒，基底层内侧较多半桥粒，与机体皮肤结构相似。结论复方壳多糖组织工程皮肤组织结构良好，符合新型皮肤替代物在治疗皮肤缺损时的组织学要求。     

层粘连蛋白在早妊小鼠子宫内膜中的表达

目的：观察层粘连蛋白（ＬＮ）在早妊小鼠子宫内膜表面上皮基膜和腺上皮基膜的表达。方法：免疫组织化学技术ＡＢＣ法。结果：妊娠第１～３天，子宫内膜上皮基膜和腺上皮基膜ＬＮ表达逐渐增强，妊娠第１天与对照组相似，妊娠第３天，ＬＮ表达最强；妊娠第４天，ＬＮ表达最弱，甚至呈阴性；妊娠第５、６天，ＬＮ表达由弱渐强。此变化过程中对系膜侧ＬＮ的变化与系膜侧相似。结论：ＬＮ在小鼠早妊期间的变化对促进子宫内膜表面上皮细胞和腺上皮细胞增殖、迁移、植入室形成及胚泡植入方面起重要作用。     

异种脱细胞真皮基质与自体皮复合移植后基底膜重塑的实验观察

目的　观察异种 (猪 )脱细胞真皮基质与薄自体皮复合移植模型中基底膜重塑的变化规律。　方法　将异种 (猪 )脱细胞真皮基质与薄自体皮复合移植于大鼠创面 ,分别于移植后 1、2、3、4、8、12、16周留取标本 ,采用免疫组化、透射电镜等方法 ,观察基底膜中层粘连蛋白的变化规律及 12周时基底膜的超微结构 ,同时以单纯薄自体皮移植进行对照。　结果　异种脱细胞真皮基质与薄自体皮复合移植后 ,层粘连蛋白的表达高于单纯薄自体皮移植。 12周时复合移植组基底膜清晰连续 ,半桥粒较多且分布均匀 ;薄自体皮组基底膜致密板模糊、不连续 ,半桥粒减少且分布不均。　结论　异种脱细胞真皮基质与薄自体皮复合移植后 ,基底膜中层粘连蛋白表达增高 ,可能有利于复合皮移植后基底膜的重塑 ,增强表皮和真皮之间的连接 ,进而改善创面愈合质量     

Proliferation and differentiation of a transfected Schwann cell line is altered by an artificial basement membrane

Rapidly dividing transfected Schwann cells were grown on Matrigel, a reconstituted basement membrane gel. Matrigel decreased the proliferation of the cells by 75% when compared to sister cultures that were grown on an untreated plastic substrate. Some transfected cells plated onto a Matrigel substrate formed colonies similar to that observed when the cells were plated on a plastic substrate. Additionally, many cells on Matrigel assembled themselves into fascicles projecting away from the colonies. These fascicles were composed of transfected Schwann cells that had assumed a bipolar appearance reminiscent of quiescent secondary Schwann cells in culture. Transfected cells grown on Matrigel contained approximately 10-fold less glial fibrillary acidic protein when compared to sister cultures grown on an untreated plastic substrate. By indirect immunofluorescence laminin immunoreactivity appeared as globules within the cytoplasm of the cells which were cultured on a plastic substrate. However, cells that were grown on the Matrigel substrate appear to organize laminin in a linear array around themselves. These results demonstrate that the presence of an artificial basement membrane alters the morphology, rate of proliferation, and state of differentiation of a transfected Schwann cell line.     

整合素-β1在层黏连蛋白促进施万细胞合成细胞外基质过程中的作用

目的 探讨整合素-β1在层黏连蛋白(LN)促进施万细胞(SCs)合成细胞外基质(ECM)过程中的作用.方法 体外培养10只SD大鼠来源的SCs,经外源性LN 处理后,双重免疫荧光细胞化学法检测LN和整合素-β1的表达情况,免疫印迹法检测SCs内黏着斑激酶(FAK)的磷酸化水平.用抗体Ha2/5封闭细胞表面受体整合素-β...     

LN、CD105及CD44V6在大肠癌组织中的表达及临床意义

为观察大肠癌手术前后血清层粘连蛋白（LN）含量的变化和大肠癌组织中LN与血清LN的相关性,研究大肠癌组织中CD105及黏附分子CD44拼接变异体V6（CD44V6）的表达及意义,探讨大肠癌组织中LN、CD105和CD44V6与大肠癌生物学行为之间的关系,我们利用放射免疫技术（RIA）对血清和大肠癌灶组织、大肠正常组织匀浆中LN进行测定,采用免疫组化SP法检测大肠癌灶组织、大肠正常组织中CD105和CD44V6的表达情况。结果显示：（1）大肠癌组根治性术后血清LN含量明显低于术前和大肠良性疾病组（P〈0．05）;（2）LN在癌灶组织中的含量明显高于癌灶远隔组织（P〈0．05）,癌灶组织与血清中的LN含量呈直线正相关（r=0．978）;（3）CD105在大肠癌组织中的表达明显高于大肠正常组织（P〈0．05）。CD44V6在大肠癌组织和大肠正常组织中的阳性表达率分别为67．6％和33．8％（P〈0．05）。CD44V6阳性组MVD值及组织LN含量明显高于CD44V6阴性组（P〈0．05）。结果表明,血清LN检测对大肠癌的诊断、防治、手术效果评估及术后动态观察肿瘤的复发转移具有临床意义。CD105和CD44V6高表达与肿瘤的发生、发展有密切关系,MVD、LN与CD44V6表达相关。