两种枸杞糖肽促进小鼠脾淋巴细胞增殖作用比较

目的比较两种枸杞糖肽的免疫活性。方法常规制备小鼠脾细胞悬液，分别加入浓度为500，100，10，1 μg·mL 1的两种枸杞糖肽样品（实验室提取和工业化生产的枸杞糖肽样品）溶液，空白对照组不加入药物。将各组细胞悬液平均分成两组，其中一组加入10 μg·mL 1的ConA（作为阳性对照）。将各细胞悬液置于37 ℃、5%二氧化碳温箱培养72 h后，分别采用流式细胞仪和MTT比色法对样品进行分析。结果流式细胞仪分析结果显示，两种枸杞糖肽样品均能促进小鼠脾细胞增殖反应，与ConA合用时，均具有协同作用。MTT比色法结果表明：实验室提取的枸杞糖肽样品能明显促进小鼠脾细胞增殖反应，与空白对照组比较，差异有极显著性（P＜0.01）；工业化生产的枸杞糖肽样品在较大剂量时对脾细胞有明显促增殖作用；与ConA合用时，实验室生产的样品在较大剂量时具有协同作用，工业化生产的样品有明显的协同作用（P＜0.05）。结论两种样品均具有较强的免疫活性。     

肾移植受者外周血淋巴细胞免疫活化基因的表达及其临床意义

目的 探讨肾移植受者外周血淋巴细胞免疫活化基因的表达特征,及其对排斥反应发生的诊断价值。方法 采用逆转录聚合酶链反应技术,对６１例肾移植受者外周血淋巴细胞ＣＤ２８通路共刺激后的免疫活化基因表达状况进行敢检测,并结合临床资料作了全面分析。     

维生素A与人体免疫关系的研究

通过测定20名本院健康男性大学生的血清维生素A和IgA、IgG、IgM、总补体(CH_(50))、C_3、E-玫瑰花环形成试验和T淋巴细胞转化试验等7项免疫指标,发现IgM同血清维生素A呈负相关(r=-0.46,P<0.05),其它免疫指标同维生素A的关系尚不能确定。     

调节性T细胞在乙型肝炎慢性化中的免疫调控作用

目的 探讨乙型肝炎慢性化的免疫调控机制.方法 用酶联免疫吸附实验测定慢性乙型肝炎患者(CHB)的辅助性T淋巴细胞(Th1/Th2)细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10的血清浓度;同时用流式细胞术检测CHB的调节性.T细胞(Treg)在外周血中的分布频率.结果 与健康对照组相比,CHB组血清IL-2明显减低...     

CD4+T淋巴细胞的ATP测定在肝移植后感染诊断中的意义

目的 探讨CD4+T淋巴细胞的ATP测定在诊断肝移植术后感染中的应用价值.方法 以肝移植术后患者68例和正常志愿者38名为研究对象.正常志愿者各采集1份全血样本,肝移植患者采集1份或多份全血样本,用ImmuKnowTM免疫细胞功能测定试剂盒检测样本中CD4+T淋巴细胞的ATP值.根据样本采集时患者是否发生感染,将肝移植受者的98份全血样本分为非感染组(n=52)和感染组(n=46).结果 正常志愿者、非感染组和感染组的外周血CD4+T淋巴细胞的ATP值分别为(292±83)μg/L、(309±126)μg/L和(166±100)μg/L,感染组的ATP值明显低于正常志愿者和非感染组(P＜0.05,P＜0.05).患者的外周血CD4+T淋巴细胞ATP值降低(＜166μg/L)时感染的风险明显增加(OR=11,95%可信区间为3.9～32.2,P＜0.01),二者间存在相关性(RR=0.5021,P＜0.01).ATP值降低对诊断肝移植术后感染的特异性和敏感性分别为86.5%和73.8%.结论 测定CD4+T淋巴细胞的ATP含量,可辅助诊断肝移植后的感染,ATP值的降低与感染的发生具有显著相关性.     

大面积烧伤脓毒症患者T淋巴细胞免疫功能的改变及临床意义

目的 了解大面积烧伤脓毒症患者T淋巴细胞免疫功能的变化，探讨其与脓毒症的关系。方法 选择59例烧伤面积≥30％TBSA的患者，分为脓毒症组43例和非脓毒症组16例。采集两组患者伤后1、3、5、7、14、21、28d的外周静脉血，检测T淋巴细胞增殖能力和白细胞介素2（IL-2）的分泌水平，并行相关性分析；通过流式细胞仪检测CD3^＋／CD4^＋ T淋巴细胞的百分率及其凋亡率，并行相关性分析。结果 与非脓毒症组比较，脓毒症组患者伤后l、14、2l、28dT淋巴细胞增殖能力和IL-2的分泌水平均显著下降（P〈0．05或P〈0.01），两指标呈显著正相关（r=0．82，P〈0．01）。伤后1、5、14、21、28d，脓毒症组患者CD3^＋／CD4^＋T淋巴细胞百分率明显低于非脓毒症组，而其凋亡率呈相反趋势（P〈0.05或P〈0．01），两指标呈显著负相关（r=-0.66，P〈0．05）。结论 大面积烧伤脓毒症患者T淋巴细胞免疫功能持续处于抑制状态，T淋巴细胞凋亡参与了脓毒症细胞免疫紊乱的病理生理过程。     

非清除性异基因骨髓移植后输注供者淋巴细胞诱导的GVHD和GVL效应

目的　探讨非清除性异基因骨髓移植后输注逐渐增量的异基因供者淋巴细胞 ,是否能在减轻移植物抗宿主病 (GVHD)的同时保留移植物抗白血病效应 (GVL)。方法　L6 15白血病小鼠(H 2 k)为受者 ,于接种白血病细胞后的第 3d接受60 Coγ射线全身照射 ,总剂量 5Gy ,照射当天移植BALB/c小鼠 (H 2 d)的骨髓细胞 (3× 10 7个 )和脾细胞 (1× 10 7个 ) ,移植后 2d腹腔注射环磷酰胺 2 0 0mg/kg ,并分别于移植后 14d或 14、2 1、2 8d输注 2× 10 7个和 1× 10 7、2× 10 7、4× 10 7个供鼠脾细胞。结果　未处理的对照组受鼠平均存活时间为 (14 .1± 1.1)d ,均死于白血病 ;移植后未接受供鼠脾细胞组的小鼠平均存活 (2 6 .2± 3.6 )d ,均死于白血病复发 ;移植后 14d接受供鼠脾细胞输注的小鼠平均存活 (2 9.3± 3.7)d ,均死于GVHD ;移植后输注逐渐增量的供鼠脾细胞者 ,平均存活 (5 9.4± 5 .6 )d ,6 0 %的受者存活超过 5 0d ,均未发生GVHD。结论　非清除性异基因骨髓移植后输注逐渐增量的异基因供者淋巴细胞可在减轻GVHD的同时保留抗白血病效应。     

131I标记抗胃泌素释放前体单链抗体的制备及其稳定性和免疫活性研究

目的 研究抗胃泌素释放前体(ProGRP(31-98))单链抗体(scFv)的131I标记方法,并对其标记后的稳定性和免疫活性进行分析.方法 采用氯胺-T法碘化标记制备131I-anti-ProGRP(31-98)scFv,凝胶柱层析法分离纯化标记产物,利用纸层析法测定标记物的标记率、放化纯和稳定性,通过细胞结合试验测定131I-anti-ProGRP(31-98)scFv的免疫活性.结果 131I-anti-ProGRP(31-98)标记率为93.35%.标记产物纯化后即刻放化纯为98.49%,在37℃水浴箱中放置24 h后放化纯为94.59%,48h后测定仍大于90%,与正常人血清充分混合24 h后放化纯为85.16%,48 h测定大于80%.131I-anti-ProGRP(31-98) scFv对人小细胞肺癌NCI-H446和肺腺癌A549细胞株的免疫结合率分别为85.36%和21.02%.结论 131I-anti-ProGRP(31-98)scFv的标记率高,且有良好的稳定性和免疫活性,有望成为高表达ProGRP的恶性肿瘤放射免疫显像及治疗药物,值得进一步深入研究.     

结核分枝杆菌Ag85B-ESAT-6融合蛋白重组耻垢分枝杆菌对小鼠的免疫原性研究

目的 评价表达Mtb Ag85B-ESAT-6融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌（Ag85B-ESAT-6-rM.s）在小鼠中的免疫原性。 方法 6周龄BALB/c小鼠经背部皮下注射1×10⁶ CFU（colony-forming unit,菌落形成单位）的Ag85B-ESAT-6-rM.s,同时设M.s免疫组（10只）、BCG免疫组（10只）、Ag85B-ESAT-6融合蛋白免疫组（10只）和生理盐水组（10只）。接种免疫后1～6周,尾静脉采血,检测小鼠外周血CD4⁺和CD8⁺ T细胞所占百分比;免疫后6周,MTS［3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium, inner salt］法检测小鼠脾淋巴细胞增殖和酶联免疫斑点检测（enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT）检测脾淋巴细胞分泌γ干扰素（interferon γ,IFN-γ）、白细胞介素-2（interleukin-2,IL-2）和白细胞介素-4（interleukin-4,IL-4）等细胞因子的水平。 结果 Ag85B-ESAT-6-rM.s免疫小鼠后能够明显刺激小鼠外周血CD4⁺和CD8⁺ T细胞的产生,其所占百分比［（59.6±1.5）%］明显高于BCG免疫组［(48.8±2.3)%］（t=12.252,P<0.05）和原始M.s免疫组［(45.7±1.6)%］（t=20.166,P<0.05）。Ag85B-ESAT-6-rM.s免疫小鼠的脾淋巴细胞增殖指数（3.23±0.31）与BCG免疫刺激的增殖指数（2.95±0.36）相当（t=1.864,P>0.05）,但其诱生IFN-γ的能力［斑点形成细胞(spot forming cells,SFC) ］［(167.5±36.6)SFC/10.6］明显高于BCG［(98.5±26.9)SFC/10⁶ ］（t=4.804,P<0.05）。 结论 Ag85B-ESAT-6融合蛋白在耻垢分枝杆菌中的表达能够明显提高M.s的免疫原性,并能够刺激小鼠机体产生有利于抗Mtb感染的免疫反应,作为TB新型候选疫苗具有一定的研究前景。     

调节性T细胞对肾脏疾病的影响

目的研究调节性T细胞(CD4+CD25+)在肾脏疾病中的作用。方法选择住院患者72例,其中,原发性肾病综合征26例,慢性肾小球肾炎29例,其他原因致慢性肾功能衰竭17例;患者在接受治疗前检测血常规、生化分析、C反应蛋白(CRP)、凝血象和CD4+CD25+。结果肾病综合征组(肾功能正常者),CD4+CD25+%与D-二聚体负相关(P<0.01)。慢性肾小球肾炎组(肾功能正常者),CD4+CD25+%与CRP、PT、PT-INR、TT及D-二聚体正相关(均P<0.01)。慢性肾功能衰竭组,CD4+CD25+%与PT、D-二聚体正相关(P<0.05,0.01)。结论肾病综合征患者CD4+CD25+可减轻肾病综合征的病情发展;但CD4+CD25+对慢性肾小球肾炎和慢性肾功能衰竭患者,有改善机体凝血功能的作用。