HBX在肝癌细胞中通过下调miR-199a增强AKT的表达

目的 探讨乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBX)调节miR-199a的表达在HBV相关性肝癌发生中的分子机制.方法 重组HBX腺病毒(Ad-HBX)感染人肝癌HepG2细胞,HBX的siRNA转染稳定表达HBV基因的人肝癌HepG2.2.15细胞,荧光定量PCR方法检测HBV相关性肝癌组织标本和肝癌细胞中HBX、miR-199a、AKT的mRNA表达水平及运用Western blot检测肝癌组织标本和肝癌细胞中HBX、AKT的蛋白表达水平;分别用miR-199a mimics和miR-199a inhibitor的转染肝癌细胞后,荧光定量PCR方法检测肝癌细胞中AKT的mRNA表达水平及运用Westem blot检测肝癌细胞中AKT的蛋白表达水平.结果 miR-199a在HepG2.2.15细胞中表达水平显著低于HepG2细胞,并且证实其表达下调受到了HBX的调控(P＜0.05),HepG2.2.15细胞中AKT表达水平显著高于HepG2细胞(P＜0.05),在HepG2.2.15细胞中过表达miR-199a能明显下调AKT表达水平以及在HepG2细胞中抑制miR-199a能明显上调的AKT表达水平(P＜0.05),此外,miR-199a的表达量在HBV相关性肝癌组织比相应的癌旁组织表达降低.结论 HBX可以通过miR-199a调节AKT导致HBV相关性肝癌发生.     

彩色多普勒超声在剖宫产瘢痕部位妊娠诊断中的价值

剖宫产瘢痕部位妊娠是一种特殊类型的异位妊娠,临床上较为少见,随着剖宫产率升高,子宫瘢痕部位妊娠的发病率有所增高,若在临床诊断不明时,盲目行手术或药物流产可能导致患者大出血,严重时可导致弥散性血管内凝血,甚至危机患者生命。为提高对该病的认识,现对我院近年来诊断剖宫产瘢痕部位妊娠的病例进行分析,探讨彩色多普勒超声在剖宫产瘢痕部位妊娠诊断中的价值。1资料与方法1.1临床资料2006年2月~2014年10月在我院诊断剖宫     

加速康复外科对结直肠癌患者术后胰岛素信号传导通路中TRB3表达

目的 观察加速康复外科(fast-track surgery,FTS)治疗理念对结直肠癌患者术后胰岛素信号传导通路中TRB3表达的影响.方法 选择合适的结直肠癌患者,随机分为FTS治疗组(F组)和传统手术方式治疗组(C组),关腹时采取患者腹直肌,利用RT-PCR和western blot测定腹直肌中TRB3的表达水平;并抽取患者静脉血测定患者术后空腹血糖和胰岛素抵抗指数,统计学分析后进行比较.结果 F组术后空腹血糖水平为(8.73±1.12) mmol/L,C组术后空腹血糖水平为(11.15±1.43) mmol/L,F组明显低于C组(P＜0.05),F组患者术后胰岛素抵抗指数(6.92±0.42),C组术后胰岛素抵抗指数(9.73±0.27),F组术后胰岛素抵抗明显低于C组(P＜0.05).结论 FTS理念治疗结直肠癌患者降低了TRB3表达水平,在胰岛素信号传导通路中,有利于AKT/PKB的磷酸化,从而促进GLUT4对葡萄糖的转运,这可能是FTS理念治疗结直肠癌患者改善了胰岛素抵抗的重要机制之一.     

毛蕊异黄酮对膀胱癌细胞凋亡和 PI3K/Akt 信号通路的影响

目的：探讨毛蕊异黄酮对膀胱癌细胞增殖、凋亡及 PI3K／Akt 信号通路的影响。方法采用0、30、60、120μmol／L 毛蕊异黄酮处理膀胱癌 T24、T739细胞,采用 MTT 法检测此两种细胞接受上述浓度处理0、24、48和72 h 后的细胞增殖情况,流式细胞术检测此两种细胞各浓度处理48 h 的细胞凋亡率,Hoechst 33258荧光染色法检测 T24细胞各浓度处理48 h 的细胞凋亡情况,Real －time PCR 检测 T24细胞各浓度处理48 h 的 Bax 的 mRNA 表达水平,Western blot 法检测 T24细胞各浓度处理48 h 的 Akt 及其磷酸化形式 p －Akt 的蛋白水平和 Bax 蛋白水平。结果毛蕊异黄酮抑制膀胱癌 T24、T739细胞增殖,并呈剂量和时间依赖性（P ＜0.05）,对 T24细胞的抑制增殖效应比 T739明显（P ＜0.05）;0、30、60、120μmol／L 毛蕊异黄酮作用48 h 后 T24细胞凋亡率分别为（2.89±1.11）％、（4.11±1.05）％、（16.92±2.67）％、（27.54±2.43）％,而 T739细胞凋亡率分别为（3.05±1.42）％、（3.99±1.52）％、（13.01±2.68）％、（19.99±3.31）％,与0μmol／L 浓度处理比较,60、120μmol／L 处理后明显升高,差异有统计学意义（P ＜0.05）,而且毛蕊异黄酮对 T24细胞的促凋亡效应比 T739细胞明显（P ＜0.05）;Ho－echst 33258荧光染色法显示随药物浓度增高,T24细胞凋亡明显增多;Real －time PCR 结果显示 T24细胞中 Bax的 mRNA 表达水平在60、120μmol ／L 处理后均明显高于0μmol／L 浓度时的表达水平（P ＜0.05）。 Western blot 法检测的 Bax 蛋白表达水平则在30、60、120μmol ／L 处理后高于0μmol ／L 浓度时的表达水平（P ＜0.05）,p －Akt／Akt 值则降低（P ＜0.05）。结论毛蕊异黄酮能抑制膀胱癌 T24细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能通过抑制PI3K／Akt 通路激活进而促进 Bax 表达实现。     

脂联素受体及其信号传递通路和糖尿病

脂联素(adiponectin)是脂肪细胞分泌的一种细胞因子，它是脂肪组织中最丰富的基因产物，占总血浆蛋白的0.01％，在血中以全长和相对分子质量为25000、27000的球状形式存在，球状脂联素生物活性较高。研究表明脂联素可以增加胰岛素的敏感性，参与抗炎、保护内皮，与糖尿病血管病变密切相关。有的学者认为脂联素通过其特异性受体及不同信号传递通路发挥作用，但是目前对这方面的研究尚少，其机制仍不甚清楚。     

房室通道与旁路同时发生高度传导阻滞、旁路超常传导一例

患者女性 ,33岁 ,因反复心悸、胸闷 17年 ,活动后气急 1年 ,晕厥 1次 ,于 2 0 0 0年 11月 30日入院。 1个月前曾晕厥一次 ,持续数分钟后苏醒。家族中无类似病史。查体 :体温36 2℃ ,心率 6 0次 /min ,呼吸 2 0次 /min ,血压 95 /75mmHg(1mmHg =0 133kPa)。神志清 ,无紫绀 ,心率 6 0次 /min ,律不齐 ,心界向左扩大 ,未闻及病理性杂音 ,双肺呼吸音清 ,腹平软 ,肝、脾肋下未及 ,下肢轻度水肿。入院时 12导联心电图 (图 1)示 :窦性心律 ,心率 71次 /min ,PR间期 0 10s,QRS波宽大畸形 (0 16s) ,起始部可见明显δ波 ,伴继发性ST T改变 ,…     

钾通道阻滞剂抗心律失常的研究进展

在心律失常药物的研究领域 ,关于钾通道阻滞剂的生理学与药理学是一个令人振奋并具有挑战性的研究课题。日新月异的研究成果以及有效药物的开发给临床应用与发展带来了无限生机及希望。本文就其若干进展进行综述。1　与心律失常有关的心肌细胞钾通道[1,2 ]1.1　电压依赖性钾通道 :(1)Ｉｔｏ:复极早期瞬时外向钾电流。包括Ｉｔｏ1(可被 4 氨基吡啶阻断 )及Ｉｔｏ2 (可被咖啡因或Ｃａ2 +阻断并受胞内Ｃａ2 +浓度影响 ) ,主要分布在心房肌 ,在 3相复极期前完全失活。 (2 )Ｉｋ[3,4 ] :外向延迟整流钾电流。是复极化的主要钾电流 ,包括快速激活…     

磁共振化学位移成像评估椎体骨髓脂肪含量的应用

目的探讨磁共振化学位移成像技术评估绝经后女性椎体骨髓脂肪含量的可行性。方法选取56例绝经后女性患者的腰椎1~4椎体(共计224个椎体),所有患者均行磁共振化学位移成像和双能X线吸收法骨密度测定,得出每个椎体信号下降指数和骨密度值,按照骨密度T分数分为骨量正常组,骨量减少组和骨质疏松组,分析三组椎体信号下降指数的差异,探讨不同骨密度组椎体信号下降指数的变化规律。结果 56例患者224个椎体按照T分数进行分组,骨量正常组68个,骨量减少组72个,骨质疏松组84个,骨量正常组,骨量减少组和骨质疏松组椎体信号下降指数的中位数分别是60.57%(67.86%~45.34%),58.22%(69.29%~49.49%),56.80%(67.52%~36.00%),骨质疏松组同正常组、骨量减少组比较具有统计学差异(P<0.05),正常组、骨量减少组比较无统计学差异(P>0.05)。结论磁共振化学位移成像通过测定椎体下降指数可以反映椎体脂肪含量的变化,对骨质疏松做出诊断,具有较高的应用价值。     

尼氟灭酸对CCI模型鼠DRG神经元TMEM16A表达的抑制作用

目的:观察尼氟灭酸(niflumic acid,NFA)干预后,TMEM16A在坐骨神经压榨性损伤(chronic constriction injury,CCI)模型鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)神经元上的表达,研究TMEM16A是否参与神经病理性疼痛。方法:制备CCI模型,热板实验检测热缩足反射潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL)。在模型制备后第1 d开始以腹腔注射形式给予不同浓度的NFA干预14 d,取大鼠L4~6 DRG神经元进行实验。免疫荧光实验明确TMEM16A在DRG神经元中的分布;运用RTPCR技术和Western Blot技术在给予不同浓度NFA干预后,检测CCI模型DRG神经元上TMEM16A的mRNA水平和蛋白的表达。结果:(1)CCI组的TWL较正常组明显缩短,给予10μM、50μM和300μM的NFA干预后,各组TWL较CCI组均明显延长(P<0.01,n=6);50μM的NFA干预组较10μM的NFA干预组TWL也明显延长(P<0.05,n=6);但300μM的NFA干预组与50μM的NFA干预组相比,TWL时间差异无统计学意义。(2)免疫荧光显示TMEM16A主要存在于DRG神经元上;(3)CCI组mRNA水平较正常组明显增高;随着NFA浓度的增加,DRG神经元TMEM16A的mRNA水平较CCI组逐渐降低,差异具有统计学意义(P<0.01,n=6)。(4)CCI组TMEM16A蛋白表达较正常组的明显增高;随着NFA浓度的增加,DRG神经元上TMEM16A蛋白表达较CCI组逐渐减低,差异具有统计学意义(P<0.01,n=6)。结论:尼氟灭酸能抑制神经病理性疼痛大鼠DRG神经元TMEM16A的表达,而且与尼氟灭酸的剂量相关,提示钙激活氯通道可能参与或调控神经病理性疼痛的发生。     

水通道蛋白在腰椎间盘退变过程中作用的研究进展

腰椎间盘退行性疾病是临床引起腰腿痛的常见疾病,严重危害人类健康,目前认为其发病机制主要包括分子生物学因素、遗传学因素、生物力学因素、营养因素等[1-4]。椎间盘退变时出现的一个特征性改变是椎间盘含水量的下降[5]。以前多认为营养物质和水分是通过渗透作用进出椎间盘,但自从水通道蛋白(aquaporins,AQPs)被发现后,外界认为水的跨膜转运有2种基本形式,一种是简单扩散,另一种是AQPs的水