SA脂质体介导GFP/bFGF基因在豚鼠耳蜗中的表达

目的观察天然碱性脂(Stearylamine,SA)脂质体介导绿色荧光蛋白/碱性成纤维细胞生长因子(GFP/bFGF)基因于不同时间段豚鼠耳蜗中的表达,为进一步研究耳聋的基因治疗提供实验基础.方法取豚鼠16只,分成4组,每组4只.其中3只右耳圆窗内注入SA-GFP/bFGF复合物,1只同法注入生理盐水作为对照.分别于术后第2、7、14、21天取材.在荧光显微镜下观察GFP的表达,用免疫组化法检测bFGF的转导情况.结果荧光显微镜下见双侧耳蜗于术后第2天开始部分细胞发出绿色荧光,第7天达到高峰,支持细胞及内外毛细胞均显荧光,细胞轮廓清晰;第14天开始减弱,第21天消失.免疫组化染色显示,除血管纹外,耳蜗各回Corti器、螺旋韧带、螺旋缘及螺旋神经节细胞均有高浓度的表达产物,对照动物呈阴性表达.结论SA脂质体介导的GFP/bFGF基因单耳给药双侧耳蜗均有高效表达,为进一步研究基因治疗耳聋提供了可能.     

孕妇铁蛋白、骨钙素水平的动态观察

目的 动态观察孕妇钙，铁代谢情况。方法 随机检测不同孕期孕妇的血清铁蛋白（SF）、红细胞内铁蛋白（EF）、骨钙素（BGP）。结果 妊娠20-40周，SF、EF值逐渐降低；BGP水平高于正常组，但其值随时间渐降低。结论 从孕中期起，随孕期的增加孕妇铁营养状况逐渐变差。采用预防性补铁措施十分迫切，BGP可作为反映孕期钙代谢的指标之一。     

昆明种小鼠胚胎干细胞的培养及鉴定

目的 从昆明种小鼠的早期胚胎中获取并培养胚胎干细胞.方法 收集小鼠3.5 d的囊胚培养,用小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层,形成的ES细胞样集落,72 h后分离隆起生长的内细胞团并继续培养,观察集落的生长状态,并通过碱性磷酸酶染色进行鉴定.结果 ES细胞有其典型的形态学特征:集落呈鸟巢状,边缘清楚,表面平滑,结构致密,隆起生长,细胞之间界限不清楚;单个细胞体积小、核大;对ES 细胞碱性磷酸酶进行检测,在AKP底物作用下,未分化的ES 细胞显微镜下为棕褐色,分化的不着色.结论 昆明种小鼠囊胚在小鼠胚胎饲养层细胞上可以发育为胚胎干细胞.     

急性淋巴细胞白血病患者血清碱性成纤维细胞生长因子水平的检测

目的:探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患者血清碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)水平及其临床意义.方法:应用酶联免疫法(ELISA)检测31例ALL初发未治患者及6例复发患者化疗前后血清bFGF的水平,并与正常对照组比较.结果与结论:ALL患者存在bFGF的异常高表达,检测血清bFGF对ALL的疗效观察和预后判断有一定的临床价值.     

健骨颗粒对大鼠成骨细胞OCN、Cbfa1的影响

骨质疏松症主要是由于骨形成、骨吸收偶联的破坏，使骨形成减少．骨量降低所导致。成骨细胞是骨形成的关键细胞，而成骨细胞的分化成熟、功能活性与骨形成密切相关。前期在体、体外实验表明．补肾健脾中药健骨颗粒能明显增强成骨细胞的功能活动。为进一步探讨健骨颗粒的作用机制，我们在前期研究的基础上，从成骨细胞分化的角度切入。旨在观察健骨颗粒对成骨分化的敏感指标骨钙素（osteocalcin，OCN）、核心结合因子（core binding factor apha 1，Cbfa 1）的影响，探讨健骨颗粒对成骨细胞的分化作用，以揭示健骨颗粒有效防治骨质疏松症的作用机制。     

健骨颗粒对大鼠成骨细胞OCN、Cbfal的影响

骨质疏松症主要是由于骨形成、骨吸收偶联的破坏,使骨形成减少,骨量降低所导致.成骨细胞是骨形成的关键细胞,而成骨细胞的分化成熟、功能活性与骨形成密切相关.前期在体、体外实验表明.补肾健脾中药健骨颗粒能明显增强成骨细胞的功能活动.     

碱性成纤维细胞生长因子对癫痫大鼠海马神经元Caspase-3表达的影响

目的研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对癫痫大鼠海马神经元的神经保护作用及可能的机制。方法戊四氮诱发大鼠癫痫发作后,腹腔分别注射生理盐水(B组)和bFGF(C组),与空白对照组(A组)按一定时段断头取脑,进行HE染色和Caspase-3免疫组织化学染色。观察各组大鼠海马神经元的损伤以及Caspase-3的表达。结果HE染色:B组神经元形态散乱,大量神经元凋亡、坏死;C组可见散在的神经元凋亡,变性坏死少见。Caspase-3免疫组化染色:B组6 h可见海马CA1、CA3和齿状回门区部分细胞的胞浆和核内有棕黄色沉淀物,24 h阳性细胞数及着色深度达到高峰,持续至72 h,120h后表达减弱。C组阳性细胞数及染色度与B组有相似的时间依赖性,但总体表达较B组弱,组间各时间点中12～72 h的差异均有统计学意义(P<0.01),6 h及120 h的差异则无统计学意义(P>0.05)。结论bFGF能显著减轻癫痫所致的大鼠海马神经元损伤。     

钙调神经磷酸酶在兔胆囊切除术后早期Oddi括约肌改变中的作用

目的观察胆囊切除术后早期Oddi括约肌超微结构改变、肌球蛋白重链（MHC）及钙调神经磷酸酶（CaN）催化亚单位α、β（CnAα、CnAβ）2种亚型的表达变化,探讨胆囊切除术后Oddi括约肌的改变及其可能的机制。方法52只新西兰大白兔,分为4组,A、D组各14只,B、C组各12只;A组仅行开腹术暴露胆囊,术后4周取Oddi括约肌标本;B、C、D组行胆囊切除术,分别于术后2、4、8周切取标本。A、D组各取2只行透射电镜检测。余行RT-PCR、Western blot检测CnAα、CnAβ mRNA和蛋白表达变化,Western blot检测MHC蛋白表达变化。结果①Western blot检测到术后2周、4周、8周MHC蛋白表达逐渐增加（P〈0.01）;透射电镜示术后8周平滑肌细胞内密体增多。②RT-PCR检测到术后4周、8周与对照组比CnAβ mRNA表达增加,8周比4周降低（P〈0.01）。③Western blot检测到术后2周、4周、8周CnAβ蛋白表达逐渐增加（P〈0.01）。④CnAα mRNA及蛋白表达均无显著变化。结论兔胆囊切除术可致Oddi括约肌组织超微结构发生改变、肌球蛋白重链表达增加;肌球蛋白重链表达增加可能与CnAβ表达增高有关,这可能是Oddi括约肌功能紊乱（SOD）多发生于胆囊切除术后患者的分子机制之一,可能在胆囊切除术后SOD的发病过程中起一定的作用。     

Efp、VEGF和bFGF在子宫内膜癌的表达及意义

目的:探讨Efp、VEGF和bFGF在子宫内膜癌组织的表达以及与临床病理参数的关系。方法:采用荧光定量RT-PCR、ELISA和Western blot方法检测Efp、VEGF和bFGF mRNA及蛋白在子宫内膜癌组织的表达。结果:Efp mRNA在子宫内膜癌的表达量为1.12±0.47,低于正常对照组(P(0.05)。VEGF mRNA在子宫内膜癌及不典型增生组的表达量分别为3.20±0.45和2.51±0.37,明显高于正常对照组(P(0.05),bFGFmRNA在子宫内膜癌及不典型增生组的表达量分别为6.43±0.73和3.46±0.62,明显高于正常对照组(P(0.01,P(0.05)。Efp和bFGF mRNA的表达与组织分化程度相关,Efp mRNA在低分化子宫内膜癌的表达低于高分化的表达,而bFGF mRNA的表达则相反。Efp、VEGF和bFGF蛋白的表达与mRNA一致。结论:VEGF和bFGF参与了子宫内膜癌的血管生成,Efp和bFGF在子宫内膜癌的表达变化提示可能与预后有关。     

泌尿生殖系统疾病

原发性遗尿症的112例临床研究；重型遗尿症977例药物治疗分析；新生儿缺氧缺血性肾损害的病理生理学分子机制及早期诊断；转化生长因子-β1和碱性成纤维生长因子与儿童原发性肾小球疾病的相关性研究；紫癜性肾炎患儿单核细胞趋化蛋白-1表达的研究.