钙调神经磷酸酶在兔胆囊切除术后早期Oddi括约肌改变中的作用

目的观察胆囊切除术后早期Oddi括约肌超微结构改变、肌球蛋白重链（MHC）及钙调神经磷酸酶（CaN）催化亚单位α、β（CnAα、CnAβ）2种亚型的表达变化,探讨胆囊切除术后Oddi括约肌的改变及其可能的机制。方法52只新西兰大白兔,分为4组,A、D组各14只,B、C组各12只;A组仅行开腹术暴露胆囊,术后4周取Oddi括约肌标本;B、C、D组行胆囊切除术,分别于术后2、4、8周切取标本。A、D组各取2只行透射电镜检测。余行RT-PCR、Western blot检测CnAα、CnAβ mRNA和蛋白表达变化,Western blot检测MHC蛋白表达变化。结果①Western blot检测到术后2周、4周、8周MHC蛋白表达逐渐增加（P〈0.01）;透射电镜示术后8周平滑肌细胞内密体增多。②RT-PCR检测到术后4周、8周与对照组比CnAβ mRNA表达增加,8周比4周降低（P〈0.01）。③Western blot检测到术后2周、4周、8周CnAβ蛋白表达逐渐增加（P〈0.01）。④CnAα mRNA及蛋白表达均无显著变化。结论兔胆囊切除术可致Oddi括约肌组织超微结构发生改变、肌球蛋白重链表达增加;肌球蛋白重链表达增加可能与CnAβ表达增高有关,这可能是Oddi括约肌功能紊乱（SOD）多发生于胆囊切除术后患者的分子机制之一,可能在胆囊切除术后SOD的发病过程中起一定的作用。     

Efp、VEGF和bFGF在子宫内膜癌的表达及意义

目的:探讨Efp、VEGF和bFGF在子宫内膜癌组织的表达以及与临床病理参数的关系。方法:采用荧光定量RT-PCR、ELISA和Western blot方法检测Efp、VEGF和bFGF mRNA及蛋白在子宫内膜癌组织的表达。结果:Efp mRNA在子宫内膜癌的表达量为1.12±0.47,低于正常对照组(P(0.05)。VEGF mRNA在子宫内膜癌及不典型增生组的表达量分别为3.20±0.45和2.51±0.37,明显高于正常对照组(P(0.05),bFGFmRNA在子宫内膜癌及不典型增生组的表达量分别为6.43±0.73和3.46±0.62,明显高于正常对照组(P(0.01,P(0.05)。Efp和bFGF mRNA的表达与组织分化程度相关,Efp mRNA在低分化子宫内膜癌的表达低于高分化的表达,而bFGF mRNA的表达则相反。Efp、VEGF和bFGF蛋白的表达与mRNA一致。结论:VEGF和bFGF参与了子宫内膜癌的血管生成,Efp和bFGF在子宫内膜癌的表达变化提示可能与预后有关。     

泌尿生殖系统疾病

原发性遗尿症的112例临床研究；重型遗尿症977例药物治疗分析；新生儿缺氧缺血性肾损害的病理生理学分子机制及早期诊断；转化生长因子-β1和碱性成纤维生长因子与儿童原发性肾小球疾病的相关性研究；紫癜性肾炎患儿单核细胞趋化蛋白-1表达的研究.     

新生儿佝偻病骨代谢转换生化标志物检测的意义

目的探讨骨代谢转换生化标志物血清β胶原分解片断（β-CTx）、骨碱性磷酸酶（BALP）和骨钙素（BGP）测定在新生儿佝偻病诊断中的意义。方法选取30例佝偻病新生儿（病例组）和30例健康新生儿（健康对照组）,每例儿童均采集空腹静脉血2mL,电化学发光免疫分析法检测血清β-CTx,ELISA法测定BALP和BGP水平,并对这三项测定指标的灵敏度、特异度、漏诊率、误诊率、诊断符合率、Youden指数、阳性预测值和阴性预测值进行计算和分析,同时测定其血清钙、磷和AKP水平,并进行左手腕关节X线摄片。结果病例组血清β-CTx、BALP和BGP水平分别为（1.58±0.49）μg/L、（291.5±78.4）U/L和（15.2±5.9）μg/L,健康对照组分别为（1.16±0.38）μg/L、（137.1±64.7）U/L和（10.1±4.3）μg/L,病例组明显高于对照组,二组比较均有极显著性差异（Pa〈0.001）。病例组血清β-CTx、BALP和BGP水平异常者分别为28例（93.3%）、26例（86.7%）和24例（80.0%）,明显高于对照组[2例（6.7%）、2例（6.7%）和3例（10.0%）]（Pa〈0.001）。血清β-CTx的灵敏度、特异度、诊断符合率、Youden指数、阳性预测值和阴性预测值均高于血清BALP和BGP,但无统计学意义,其漏诊率和误诊率显著低于血清BALP和BGP（χ^2=9.7124,11.2913,16.9212,18.3671Pa〈0.01）。结论血清BALP和BGP水平测定是准确反映骨代谢转换的生化标志物,也是诊断新生儿佝偻病特异而敏感的指标;血清β-CTx水平测定是诊断新生儿佝偻病、反映骨吸收活动特异性很高的敏感指标。     

重组人白细胞介素-6对脂肪细胞蛋白质酪氨酸磷酸酶1B、白细胞介素-6及抵抗素基因表达的影响

目的观察重组人白细胞介素-6(rhIL-6)对SW872脂肪细胞蛋白质酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)、抵抗素及IL-6基因表达的影响,探讨rhIL-6对脂肪细胞分泌功能的调节作用。方法体外培养,油酸诱导SW872前脂肪细胞分化为成熟的脂肪细胞,在培养液中加入不同水平rhIL-6(0、1、5、10、20、50μg/L)作用24 h,加入20μg/L rhIL-6后分别作用不同时间(0、4、8、12、24 h)。收集细胞提取总RNA,采用半定量反转录酶聚合酶链反应方法检测SW872脂肪细胞PTP1B、抵抗素、IL-6 mRNA水平。结果rhIL-6 1μg/L作用24 h,对SW872脂肪细胞IL-6 mRNA的表达无影响;随着rhIL-6水平的增加,SW872脂肪细胞IL-6 mRNA的表达水平逐渐增加,但以20μg/L rhIL-6的作用最强(F=233.9 P<0.01);20μg/L rhIL-6作用4 h即可促进SW872脂肪细胞IL-6 mRNA的表达,随着作用时间的延长,其促进作用更加明显(F=247.8 P<0.01)。1μg/L rhIL-6作用24 h,对SW872脂肪细胞PTP1B mRNA的表达无影响;5μg/L rhIL-6即可促进SW872脂肪细胞PTP1B mRNA表达,50μg/L rhIL-6作用24 h,对PTP1B mRNA的表达促进作用更明显(F=515.58 P<0.01);20μg/L rhIL-6作用4 h对脂肪细胞PTP1B mRNA的表达无影响,作用8 h即可促进PTP1BmRNA的表达,随着作用时间的延长其作用更加明显(F=498.62 P<0.01)。不同水平、不同作用时间下,rhIL-6对SW872脂肪细胞抵抗素mRNA的表达无明显影响(F=9.6,10.5 Pa>0.05)。结论rhIL-6以剂量和时间相关的方式促进SW872脂肪细胞PTP1B及IL-6 mRNA表达,对抵抗素mRNA的表达无影响。     

碱性成纤维细胞生长因子在肺炎链球菌脑膜炎大鼠室管膜下区表达的动态变化

目的探讨肺炎链球菌脑膜炎大鼠碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在脑组织神经发生区域室管膜下区(SVZ)表达的特点。方法取3周龄SD大鼠36只,随机分为感染组和对照组,感染组用肺炎链球菌Ⅲ型菌悬液脑池内注射,对照组用等量9g/L盐水脑池内注射,建立肺炎链球菌脑膜炎模型和正常对照模型,分别于接种肺炎链球菌Ⅲ型菌悬液或注射9g/L盐水24、72h和第6天经多聚甲醛灌流内固定后取脑,采用免疫组织化学染色技术和图像分析,观察不同时间点bFGF在SVZ表达的变化。结果肺炎链球菌感染后24h,SVZ区bFGF表达明显增加,表现为bFGF阳性细胞着色较深,数量明显增加,与对照组比较有显著性差异(P<0.01);感染后72h表达逐渐下降,与24h比较差异有显著性(P<0.01),但仍高于对照组。感染第6天bFGF降至正常水平,与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。感染组大鼠侧脑室脉络丛、蛛网膜下腔渗出的中性粒细胞和巨噬细胞也有bFGF表达,对照组未见炎性渗出。结论肺炎链球菌脑膜炎病程中,SVZ区bFGF表达升高可能对促进神经前体细胞增殖、SVZ区神经发生发挥重要作用,有利于脑神经元的再生和修复,可能是脑膜炎脑损伤后机体的自我保护机制之一。     

成年兔雪旺细胞体外培养增殖和纯化的实验研究

目的探讨从成年大白兔周围神经体外分离、纯化、培养的条件，观察雪旺细胞在体外存活、生长情况，目的在于改进雪旺细胞的体外培养条件，寻找一种较好的获取雪旺细胞的方法。方法利用成年兔发生Wallerian变性的双侧坐骨神经，剪碎至1mm的植块，经改良后反复差速贴附法进行培养，应用b-FGF刺激SC增殖；采用相差显微镜下观察雪旺细胞状态计数和S-100细胞免疫组化染色相结合鉴定；绘制生长曲线，按照细胞倍增时间公式计算其倍增时间。结果采用发生Wallerian变性后的兔双侧坐骨神经，经改良后差速贴壁培养方法能够明显抑制成纤维细胞的生长，但对雪旺细胞的生长影响较小，可获得大量高纯度的雪旺细胞，经S-100蛋白免疫组化鉴定，雪旺细胞纯度达94％以上，细胞数量达1×10^6／mL以上；绘制其生长曲线，并计算得出体外培养的第三代雪旺细胞体外倍增时间为3d；一定浓度的b-FGF和NGF可促进雪旺细胞的增殖。结论①联合采用发生Wallerian变性后的神经、改良差速贴壁培养、b-FGF和NGF促进雪旺细胞增殖是一种较经济、简便、实用的方法，可获得较高纯度的雪旺细胞。②本培养方法能够获得大量高纯度的雪旺细胞，可作为周围神经组织工程实验研究的细胞来源。     

针刺组方影响SAMP10脑CaN mRNA特异性表达的实验研究*

[目的]了解不同的针刺配穴组方对快速老化小白鼠(SAMP10)脑钙调神经磷酸酶(CaN)mRNA表达的影响.[方法]用α-32P-dCTP标记探针,Northern杂交法进行mRNA表达水平的半定量分析,分别以取穴水沟、内关的醒脑开窍法(针刺泻实组)和取穴肝俞、肾俞的滋补肝肾法(针刺补虚组)干预8月龄SAMP10(模型组).[结果]与正常组比较,模型组CaN mRNA表达水平下降.醒脑开窍法可提高CaN mRNA表达至接近正常水平(P＜0.05),滋补肝肾法有升高其表达的趋势(P＞0.05),提示醒脑开窍法优于滋补肝肾法.[结论]CaN mRNA表达水平低下可能是脑老化的机制之一,针刺能提高CaN mRNA表达水平,并具有组方配穴的特异性,提示醒脑开窍法可能是干预脑老化的潜在策略.     

养成碱性饮食习惯可防心血管硬化

研究发现,多吃碱性食物可保持血液呈弱碱性,使得血液中乳酸、尿素等酸性物质减少,并能防止其在血管壁上沉积,因而有软化血管的作用,故有人称碱性食物为血液和血管的清洁剂。     

孕母维生素C、钙缺乏对胎儿骨发育的影响

[目的]探讨孕期VitC、钙缺乏对胎儿骨发育的影响.[方法]常规生化方法测定68对母婴血清VitC、ALp和Ca 含量,采用SAS6.12软件包对检测数据进行分析处理.[结果]脐血VitC浓度为:(16.49±5.99)μmol/L.其中38.24%的样本<17μmol/L.ALP活性为:(141.72±41.63)U/L.其中35.29%的样本活性145U/L.Ca 浓度为:(2.43±0.48)mmol/L,其中8.82%样本含量<2.23mmol/L.脐血低VitC的样品的ALP活性比正常样本略有增高,但差异无统计学意义(P>0.05),而低VitC组的Ca 浓度明显低于正常组(P<0.05).低Ca 样本的ALP活性明显高于正常样本(P<0.05).母血VitC浓度为:(9.06±3.68)μmol/L,低于正常者占80.88%.ALP活性为:(117.26±61.43)U/L,其中高于正常者占17.65%.Ca 浓度为:(2.44±0.55)mmol/L,其中低于正常者占20.59%.[结论]母婴普遍存在VitC水平低,提示母孕期应适当增加VitC的摄入量.低血钙与低VitC有关,孕母补充维生素D的同时应考虑VitC的补充.低维生素C组胎儿骨代谢较为活跃.