吴门调脂颗粒对大鼠平滑肌细胞自噬的干预研究

目的:探究吴门调脂颗粒对大鼠平滑肌细胞(VSMCs)的自噬在细胞、蛋白质、基因等水平的影响。方法:运用血清药理学方法,以调脂颗粒含药血清、6-氨基-3-甲基嘌呤(3-MA)、雷帕霉素(Rapamycin)诱导处理VSMCs,通过MTT检测调脂颗粒含药血清对细胞生长增殖的影响,Western blotting检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的相对表达量变化,免疫荧光法检测细胞内自噬小体的数目变化,Real time PCR检测自噬相关基因表达变化。结果:调脂颗粒含药血清处理VSMCs后,细胞生存率无明显改变,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的相对表达上调,自噬小体数量增多,自噬相关基因表达上调(P0.05)。雷帕霉素联合调脂颗粒含药血清处理VSMCs后,细胞生存率下降,较雷帕霉素组LC3-Ⅱ的相对表达下降,自噬小体数量显著减少,自噬相关基因表达下调(P0.05或P0.01)。结论:吴门调脂颗粒可以通过多个层面抑制平滑肌细胞的异常增殖及过度自噬,促进平滑肌细胞适度自噬。     

静磁场对预防自发性高血压(SHR)大鼠中风的影响

目的研究静磁场对SHR大鼠中风的影响。方法本研究起止年月为2014年4月3日~2014年6月28日,实验地点为浙江省中医药研究院基础实验研究所。将20只SHR大鼠适应性喂养14d后,给予1%氯化钠盐水高渗饮水,用以加速血压升高,随机分成两组,每组10只,雌雄各半。其中一组在饲养笼底部放入和也牌磁健康床垫磁板模型作为磁板组,另一组则不放磁板作模型组,另设Wistar大鼠正常组做对照。每周固定时点测量血压和体重一次。从置入磁板开始,实验周期为60d。结果模型组的10只大鼠中死亡2只,而磁板组和正常组则无大鼠死亡;磁板组和模型组大鼠的脑重量与脑系数都大于正常组,但磁板组大鼠的脑重量和脑系数与模型组相比较都相对较小(P0.05);雄性SHR大鼠血压明显下降,与模型组比较有显著性差异(P0.05),但对雌性大鼠血压没有明显影响;磁板对雄性SHR大鼠血流变高切和血浆粘度有明显降低作用,与模型组比较有显著差异(P0.05),但对雌性SHR大鼠作用不显著。病理检查显示,磁板组大鼠1只出现了脑水肿现象,而模型组有3只大鼠出现了脑出血现象,1只有脑水肿现象,其中2只为实验期间中风死亡大鼠。结论可见使用磁板可降低SHR大鼠中风死亡率,对SHR大鼠脑重量和脑系数有一定降低作用,对雄性SHR大鼠血压、血流变高切和血浆粘度有明显降低作用,说明磁板(静磁场)可能对高血压引起中风及脑水肿有一定的抑制作用。     

大鼠皮肤类过敏试验的组织学机制

目的探索大鼠皮肤类过敏试验的组织学机制。方法大鼠背部脊柱两侧分别皮内注射C48/80、吐温-80、碘海醇注射液、紫杉醇注射液、注射用血塞通(冻干)、喜炎平注射液后,立即尾静脉注射0.5%伊文思蓝溶液,15 min后麻醉处死,剪取背部皮肤,测量蓝斑直径,取蓝斑皮肤观察肥大细胞形态,计算脱颗粒率。再采用Pearson检验进行相关性分析。结果皮内注射C48/80、吐温-80、碘海醇注射液、紫杉醇注射液、注射用血塞通(冻干)后,蓝斑直径、肥大细胞脱颗粒率与药物质量浓度(体积分数)均呈正相关,两者之间亦然,但肥大细胞数均无明显变化[除0.8、1.6 mg/mL注射用血塞通(冻干)外];皮内注射喜炎平注射液后,蓝斑直径、肥大细胞数、脱颗粒率均无明显变化(除质量浓度5 mg/mL时蓝斑直径外)。结论大鼠皮肤类过敏试验组织学机制是类过敏阳性物质致皮肤肥大细胞脱颗粒,其脱颗粒率与阳性物质浓度、皮肤蓝斑直径呈高度正相关,可作为药物类过敏性及其反应强度评判的一项补充指标。     

全膝关节表面置换术在晚期骨关节炎治疗中的临床应用效果观察

目的探讨全膝关节表面置换术在晚期骨关节炎治疗中的应用效果。方法选取2016年1月～2018年12月我院骨外科收治的晚期骨关节炎患者30例,根据其所选手术方式的不同将患者分为对照组和观察组各15例。对照组患者采用关节镜下膝关节清理术,观察组患者采用全膝关节表面置换术,比较两组患者的术后膝关节功能恢复情况以及治疗优良率。结果两组患者术前膝关节功能测评比较,差异无统计学意义(P0.05),术后6个月,观察组患者HSS评分高于对照组,WOMAC骨关节炎指数低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);治疗后,观察组患者的治疗效果优良率为86.68%,高于对照组的53.33%,差异有统计学意义(P0.05)。结论将全膝关节表面置换术应用于晚期骨关节炎患者的治疗,可以明显改善患者的膝关节功能,提升治疗优良率,效果显著,值得临床推广应用。     

何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺p16/Rb细胞转导通路相关蛋白的影响

目的观察何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺p16/Rb细胞信号转导通路相关蛋白的影响。方法选用8周龄SD雌性大鼠50只,随机分为何首乌饮干预预防和治疗性实验两大部分,分为五组,每组5只,用D-半乳糖制造衰老大鼠模型,Western印迹法检测p16、非磷酸化Rb蛋白含量。结果预防各组间p16和非磷酸化Rb蛋白表达均以模型组最高,正常组最低,各预防组处于中间水平,其中以预防中剂量组(Pm)最低(P0.01)。治疗各组间p16和非磷酸化Rb蛋白表达均以自然恢复组(S-R)最高,阴性对照组最低,各治疗组中以治疗中剂量组(Tm)最低(P0.01)。结论何首乌饮延缓下颌下腺细胞衰老的作用可能与激活Rb/p16通路有关。     

髌骨内推对兔膝骨关节炎(KOA)关节液IL-1β、iNOS和NO的影响及对KOA的效果

目的研究髌骨内推(patellar inward pushing method,PIPM)对兔膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)模型关节液中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、诱导型一氧化氮合成酶(Inducible nitric oxide synthase,i NOS)和一氧化氮(nitric oxide,NO)含量的影响,探讨髌骨内推对膝骨关节炎的治疗作用及机制。方法新西兰兔30只,随机分成5组,即空白组(control)、模型组(model)、盐酸氨基葡萄糖组(GH)、髌骨内推组(PIPM)和髌骨内推联合盐酸氨基葡萄糖组(PIPM+GH),每组均为6只,除空白组外其余4组采用改良Hulth法建立KOA模型,各组采取相应的处理措施,连续治疗8周,观察各组实验兔膝关节活动、关节液中IL-1β、i NOS和NO的水平及关节软骨病理学形态变化。结果 PIPM+GH组与模型组相比,活动度增加,差异具有统计学意义(P<0.05);PIPM组、PIPM+GH组与模型组相比,兔膝关节液IL-1β、i NOS、NO含量及关节软骨观察评分均降低,差异有统计学意义(P<0.05);PIPM组与GH组相比,活动度增加、关节液IL-1β、i NOS、NO含量及关节软骨观察评分降低,但差异均没有统计学意义(P>0.05);PIPM+GH组与GH组相比,关节液i NOS、NO含量及关节软骨观察评分均降低(P<0.05),差异具有统计学意义。结论髌骨内推能降低兔KOA关节液中IL-1β、i NOS和NO含量,减少细胞炎症因子释放,促进关节软骨损伤的修复,对KOA均具有良好的治疗作用,其治疗效果与盐酸氨基葡萄糖胶囊没有明显差异,但两者联合治疗较单独运用效果更好。     

幼鼠内耳单个器官培养步骤及分类方法

内耳离体培养在研究内耳细胞功能、内耳组织发育再生、细胞损伤退化等方面具有重要价值。但由于内耳的组织结构微小复杂,其取材和培养具有较大难度,使该技术的普及和应用受到一定限制。本文在简要点评不同内耳离体培养方法优劣的基础上,结合本实验室多年来积累的实践经验,详细介绍了新生大鼠各个内耳终器取材及培养的具体步骤。从解剖迷路到分离终器,从凝胶制备到标本铺放,都有详细的操作指南,本文还针对各环节中的技术动作和关键事项进行了具体探讨并配以指导图例,希望这些内容能够弥补以往文献中抽象简略的条款式步骤所造成的实验困难,为开展内耳器官培养研究的初学者提供一定的帮助。