雷帕霉素对缺氧损伤视网膜神经节细胞的保护作用及其机制

背景 研究表明雷帕霉素(Rapa)可延缓人大脑细胞的衰老,改善大鼠局灶性脑缺血时脑组织代谢活动,对中枢神经细胞具有保护作用.视神经和视网膜神经节细胞(RGCs)属于中枢神经组织,但Rapa是否可对外伤后RGCs具有保护作用尚不清楚. 目的 探讨Rapa对氯化钴(CoCl2)诱导的缺氧损伤大鼠RGCs的保护作用,并探讨其可能的作用机制,为外伤性视神经病变(TON)的治疗提供新的思路.方法 用含体积分数10％胎牛血清的DMEM培养基培养大鼠RGC-5细胞,倒置相差显微镜下观察培养细胞的形态学变化.将细胞分为正常对照组及50、100、200、400和600 μmol/L CoCl2组,于细胞培养后24 h和48 h采用细胞生长分析系统检测各组细胞存活率.采用200 μmol/L CoCl2处理细胞以诱导建立RGC-5细胞缺氧损伤模型,然后将培养的细胞分为正常对照组、模型对照组和不同浓度Rapa干预组,Rapa干预组在缺氧模型细胞培养液中添加Rapa使其终浓度分别为0.1、0.4、1.6和6.4μmol/L,处理细胞24 h.采用细胞生长分析系统检测各组细胞的存活率;采用AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术检测各组细胞凋亡率;采用JC-1染色技术检测各组细胞线粒体跨膜电位(△ψm)的变化;采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞促凋亡基因bax mRNA的相对表达量. 结果 200 μmol/L CoC12作用RGC-5细胞后24 h细胞相对存活率为(70.51±5.00)％,与正常对照组的(100.00±3.29)％比较,差异有统计学意义(P＜0.01),成功构建细胞缺氧损伤模型.正常对照组、模型对照组和0.1、0.4、1.6、6.4 μmol/L Rapa干预组细胞存活率的总体比较差异有统计学意义(F=167.904,P=0.000),其中0.1μmol/L Rapa干预组细胞存活率明显高于模型对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).正常对照组、模型对照组和0.1μmol/L Rapa干预组细胞凋亡率分别为25.4％、37.7％和25.3％,细胞线粒体膜电位分别下降了0.4％、6.3％和1.4％.正常对照组、模型对照组和0.1 μmol/L Rapa干预组细胞中baxmRNA相对表达量分别为1.01±0.21、3.52±0.30和1.66±0.20,总体比较差异有统计学意义(F=88.034,P=0.000),其中模型对照组细胞中bax mRNA相对表达量均明显高于正常对照组和0.1μmol/L Rapa干预组,差异均有统计学意义(均P＜0.05). 结论 Rapa可对CoC12诱导的缺氧RGC-5细胞发挥保护作用,其主要作用机制是下调细胞中促凋亡分子bax的表达,并提高RGC-5细胞存活率.     

视网膜光凝术联合雷珠单抗治疗新生血管青光眼的临床研究

目的：探讨视网膜激光光凝术联合雷珠单抗(ranibizumab)治疗新生血管青光眼(neovascular glaucoma, NVG)对视功能的改善及不良反应,为临床治疗提供依据。

方法：选择本院2012-01/2014-06 NVG患者100例129眼,随机分为观察组和对照组,对照组50例67眼,应用视网膜激光光凝术治疗; 观察组50例62眼,应用视网膜激光光凝术联合雷珠单抗进行治疗。评估治疗后虹膜新生血管消退情况、视力恢复、眼压及眼底状况,评估患者不良反应。并应用光学相干断层扫描(OCT)检测视网膜神经纤维层(retinal nerve fiber layer,RNFL)厚度及视野缺损值。

结果：观察组患者虹膜新生血管消失率为95.2%(59/62),高于对照组83.6%(56/67); 观察组视力4.3～4.7为62.9%(39/62),高于对照组49.3%(33/67),观察组视力≤4.3为25.8%(16/62),低于对照组43.3%(29/67)(P<0.05); 观察组治疗后视网膜静脉循环时间和眼压分别为8.20±0.41s和18.50±0.48mmHg,低于对照组9.42±0.30s和23.94±0.52mmHg(P<0.05); 观察组虹膜新生血管消退时间6.19±0.27d,低于对照组8.37±0.31d(P<0.05); 观察组治疗后RNFL厚度为91.12±2.05μm,高于对照组治疗后85.06±2.19μm,观察组治疗后视野缺损值为13.44±0.59dB,低于对照组治疗后15.92±0.56dB(P<0.05)。两组患者不良反应结果比较,差异无统计学意义(P>0.05)。

结论：视网膜激光光凝术联合雷珠单抗治疗NVG具有较好的临床疗效,能够显著改善患者视力及视网膜结构和功能,具有较高的安全性。     

地氯雷他定对变应性鼻炎患者白三烯B4与白细胞介素-4的调节作用

目的探讨地氯雷他定治疗AR的临床疗效及对AR患者外周血LTB4、IL-4的调节作用。方法将80例变应性鼻炎病例随机分为治疗组与对照组,每组40例。治疗组给予地氯雷他定10mg,睡前服用,2周为一疗程;对照组给予口服西替利嗪10mg,睡前服用,2周为一疗程。结果治疗前,两组外周血LTB4I、L-4含量基本一致（P〉0.05）。治疗后一疗程与治疗前比较,两组外周血LTB4、IL-4含量均有明显下降（均P〈0.05）,但治疗组LTB4、L-4含量下降比对照组更明显（均P〈0.05）。治疗组显效率42.5%、总有效率100%,均明显高于对照组的15.0%与87.5%（均P〈0.05）。结论地氯雷他定对AR患者的外周血LTB4I、L-4含量有一定的调节作用,治疗AR疗效确切,安全可靠。     

氯雷他定片治疗变应性鼻炎的临床疗效观察

目的:评价氯雷他定片治疗变应性鼻炎的疗效和安全性.方法:将140例变应性鼻炎患者随机分为治疗组、对照组各70例.治疗组给予氯雷他定片(商品名:开瑞坦),对照组给予咪唑斯汀缓释片(商品名:皿治林)治疗.两组均治疗28天后观察疗效.结果:对总体疗效而言,意向性分析(ITT)结果显示两组总有效率(痊愈率+显效率)分别为71.43%、70.00%,方案数据分析(PP)结果显示两组总有效率(痊愈率+显效率)分别为74.24%、76.19%,疗效差异均无统计学意义,P＞0.05,两组具有临床上的非劣性,P＜0.05.ITT分析与PP分析结果一致.临床观察中未发现明显不良反应.结论:氯雷他定片治疗变应性鼻炎安全有效,值得在临床上推广应用.     

几家过敏几家愁

顾客小刘,女,21岁,耳垂部发红、剧痒难忍,来店里购买药物.观察发现其耳垂部佩戴了珍珠耳钉,经询问耳钉是昨天新戴上的. 医师分析:该患者患的是耳钉引发的过敏性皮炎.首先要取下耳钉,然后口服3～5天抗组胺药(例如盐酸西替利嗪、依巴斯汀,氯雷他定,咪唑斯汀,盐酸依匹斯汀等.下同),再外涂激素类软膏3～5天即可(卤米松乳膏,卤米松/三氯生乳膏,糠酸莫米松软膏,复方醋酸地塞米松乳膏,丁酸氢化可的松乳膏等.下同).日后如要佩戴耳钉应更换其他材质的.     

雷帕霉素抑制mTOR活性诱导细胞的生长和下调EBV+人鼻咽癌细胞HIF-1α介导的VEGF表达

目的 观察雷帕霉素(Rap)体外对人鼻咽癌HNE-1EBV+和CNE-1EEBV-细胞乏氧诱导因子1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响及生长抑制作用.方法 采用MTT法检测Rap作用72 h IC50;用RT-PCR和ELISA分别测定Rap作用24 h后,细胞HIF-1α mRNA和培养上清液中VEGF的表达水平.结果 Rap呈剂量依赖性地抑制HNE-1EBV+和CNE-1EBV-细胞的生长,IC50分别为43.9、41.7 μmol·L-1;Rap使HNE-1EBV+细胞HIF-1α mRNA和VEGF表达水平分别下调了24％、55％,但对CNE-1EBV-细胞无明显影响.结论 Rap对两株鼻咽癌细胞具有相当的生长抑制作用,可显著下调HNE-1EBV+细胞HIF-1α介导的VEGF表达,提示Rap对于改善EBV+鼻咽癌的治疗预后具有潜在的作用.     

枸地氯雷他定片联合复方甘草酸苷片治疗慢性荨麻疹的临床疗效

目的研究枸地氯雷他定片联合复方甘草酸苷片对慢性荨麻疹的影响。方法在2017年3月~2019年5月期间,选取124例于某院收治的慢性荨麻疹患者为研究对象,随机分为观察组和参照组,各62例。观察组采取枸地氯雷他定片联合复方甘草酸苷片治疗,参照组采取单纯的枸地氯雷他定片治疗,对比两组患者的治疗总有效率、细胞因子和抗体Ig E水平、治疗结束后6个月和12个月时的复发率。结果经治疗,观察组的治疗总有效率明显高于参照组,数据对比差异具有统计学意义(P<0.05)。另外对两组患者的细胞因子和抗体Ig E水平进行对比,治疗前差异无统计学意义(P>0.05);治疗结束后再次对比,数据有差异(P<0.05)。最后分别对比治疗结束后6个月和12个月时的复发率,数据有差异(P<0.05)。结论采取枸地氯雷他定片联合复方甘草酸苷片治疗慢性荨麻疹的临床疗效极佳,各项实验室指标皆有改善,复发的概率较低,有应用价值。     

基于PI3K/Akt通路探索中医药治疗肝癌机制的研究概述

肝癌的发生发展是一个复杂的多步骤过程,涉及多种基因多条通路。磷脂酰肌醇-3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶（serine/threonine protein kinases,Akt）信号通路作为肿瘤发生过程中常见的信号通路之一,具有抑制癌细胞调亡、促进细胞增殖等作用,其与肝癌发生机制的研究已成目前研究的热点和难点。本文通过归纳与总结相关文献,发现中医药可通过抑制PI3K/Akt信号通路以抑制血管内皮的生成、阻滞细胞周期来影响肝癌细胞的增殖;增加细胞凋亡相关基因半胱氨酸蛋白酶3、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白、细胞色素C等基因蛋白的表达来诱导肝癌细胞的凋亡;增加自噬相关基因Beclin 1和微管相关蛋白1轻链3的表达来诱导肝癌细胞自噬。可见,中医药可抑制PI3K/Akt通路的激活,通过上述机制作用于肝癌细胞,降低相关疗效指标,最终影响肝癌的发展,起到治疗肝癌的目的,这为今后中医药治疗肝癌提供了新的方向与理论依据。     

复方氯雷他定滴鼻液的制备及质量控制

目的研究复方氯雷他定滴鼻剂的制备、质量标准.方法采用β-环状糊精包核,增加氯雷他定在水中的溶解度及稳定性.用HPLC法测定氯雷他定的含量,并对该制剂进行稳定性研究.结果本制剂质量稳定,含量测定方法操作准确、简便.结论此制剂可作为治疗季节性、变异性、慢性过敏性鼻炎等疾病的新剂型.     

氯雷他定的片剂及胶囊在人体内的相对生物利用度

目的建立测定人血浆中氯雷他定浓度的方法,研究氯雷他定的片剂及胶囊在人体内的相对生物利用度。方法23例健康男性志愿者随机三交叉自身对照,分别单剂po受试制剂氯雷他定片剂和胶囊及参比片剂各40 mg后,HPLC测定血浆中氯雷他定的浓度,运用3p97程序计算有关药动学参数。结果氯雷他定的体内过程符合二室模型,受试片剂和胶囊及参比片剂的AUC0-12分别为147.00±102.75、135.41±94.24、139.76±94.76 ng.ml-1.h,Cmax分别为68.20±37.47、57.52±39.17、66.49±41.41 ng.ml-1,Tmax分别为0.78±0.22、0.98±0.24、0.98±0.37 h。受试片剂与参比片剂的相对生物利用度(F)为110.0%±40.0%,胶囊为98%±23%。结论结果显示,受试氯雷他定片剂及胶囊与参比制剂均生物等效。