有丝分裂原蛋白激酶与糖尿病肾病

糖尿病时 ,多种因素激活肾脏细胞内有丝分裂原蛋白激酶 (MAPK)信号通路。MAPK激活后通过调节下游转录因子活性 ,控制基因表达 ,最终引起肾小球肥大和细胞外基质 (ECM)积聚 ,导致糖尿病肾病 (DN)的发生。     

人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4的原核表达及鉴定

【目的】构建表达人细胞周期蛋白Dl及细胞周期蛋白激酶CDK4融合蛋白的重组体。【方法】用RT-PCR从HL-60细胞中扩增细胞周期蛋白D1及CDK4基因片段，克隆到pGEM-T easy载体上。测序鉴定后切下相应的片段，连接到表达载体pET-22b( )上，重组质粒转化大肠杆菌BL21(DL3)，使之高效表达融合蛋白细胞周期蛋白D1及CDK4。SDS-PAGE电泳及Western blotting鉴定表达蛋白。【结果】 用PCR扩增得到了正确的目的基因片段并构建成pET-cyclinD1和pET-CDK4两个原核表达载体。将其转化大肠杆菌，Western blot检测证实了转化的大肠杆菌能表达细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白。【结论】 本研究成功构建了细胞周期蛋白D1及CDK4原核表达载体，后两在细胞内能正确表达细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白．     

KN-93抑制脊髓背角C-纤维诱发电位LTP的诱导和早期维持

[目的]探讨钙-钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)在脊髓背角C-纤维诱发电位长时程增强(LTP)的诱导和维持中的作用。[方法]用钨丝微电极在脊髓腰膨大部背角浅层神经元细胞外记录C-纤维诱发电位,强直刺激坐骨神经诱导背角C-纤维诱发电位的LTP。在LTP诱导前后,在暴露的脊髓表面局部给予CaMKⅡ的选择性抑制剂KN-93,观察C-纤维诱发电位的变化。[结果]50μmol/L的KN-93不影响脊髓背角C-纤维诱发电位的幅度,但可完全阻断脊髓背角LTP的诱导(n=6)。KN-93呈时间依赖性翻转脊髓背角LTP。在LTP诱导后30min,50μmol/L的KN-93对LTP的早期表达无影响(n=4),而100μmol/L的KN-93在用药后,LTP逐渐降低,于3h降至对照水平(n=6);在LTP诱导后1h脊髓局部给予100μmol/L的KN-93,7例动物中有5例LTP被抑制;但同样浓度的KN-93,在LTP诱导后3h,不能翻转业已建立的LTP(n=5),且增加KN-93的浓度至200μmol/L也不能抑制脊髓背角LTP。[结论]CaMKⅡ参与脊髓背角C纤维诱发电位LTP的诱导和早期维持,但KN-93对晚期LTP无抑制作用。     

磷酸化胰岛素样生长因子结合蛋白-1的临床应用

临床判断宫颈成熟度一般用宫颈评分(Bishop评分)结合孕妇自述作出判断,没有相应的实验室指标。检测宫颈分泌物中磷酸化胰岛素样生长因子结合蛋白-1(IGFBP-1)正是弥补了这一不足之处。     

PCNA及P53蛋白在口腔鳞癌组织中的表达及意义

增殖细胞核抗原(PCNA)也称周期蛋白。是反映细胞增殖分数和所处周期的客观指标，可用于判断肿瘤的恶性程度及预后，亦能较好地反映肿瘤细胞的增殖状态。P^53基因是一种重要的肿瘤抑制基因，其突变与肿瘤的发生发展密切相关。2002年1月至2003年12月，我们用免疫组织化学染色技术对49例口腔鳞癌组织的PCNA和P^53基因蛋白进行检测和分析，旨在探讨两项指标与此类肿瘤的诊断、鉴别诊断及病理分级的关系。     

人食管癌组织中热休克蛋白70和糖调节蛋白94的表达

为探讨人食管癌组织中热休克蛋白 70 (HSP70 )和糖调节蛋白 94( grp94)的表达及意义 ,采用SABC法检测人食管癌组织HSP70和grp94的表达 ,镜下观察HSP70和 grp94在癌组织及癌旁组织中的表达特点。结果 :92 .6%( 5 0 /5 4)食管癌组织中存在HSP70的表达 ,癌细胞存在胞质、胞核表达强度及部位的差异 ;而 grp94的表达阳性率为70 .4% ( 3 8/5 4) ,以胞质表达为主 ,而癌旁组织表达较少。提示 :人食管癌组织存在HSP70和 grp94的表达异质性 ,呈现了胞质、胞核的表达差异 ,HSP70和 grp94在人食管癌组织的表达特点为以后肿瘤抗原肽肿瘤疫苗的提取和实验奠定了基础。     

重症急性胰腺炎大鼠血清高迁移率族蛋白-1水平的时相变化及意义

目的 观察重症急性胰腺炎(SAP)大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素19(IL-19)和高迁移率族蛋白-1(HMGBl)水平的时相变化，探讨HMGBl在SAP病程中的意义。方法采用胰管逆行灌注5％牛磺胆酸钠的方法复制大鼠SAP模型。随机分为正常对照组(N组，n=8)、假手术组(Sham组，n=8)和重症急性胰腺炎组(SAP组，n=80)。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组动物血清TNF-α、IL-1β。用Westernblot法检测血清HMGBl水平。结果 SAP组大鼠血清TNF-α和IL-1β在建模后迅速升高，约在4～6h达高峰，之后迅速下降，在建模12h即降至接近正常水平，一直维持至24和48h。SAP组大鼠血清HMGB1水平在建模后12h开始有明显升高，至24和48h仍维持在较高水平。结论 HMGB1可能作为晚期炎症因子参与了SAP的全身炎症反应。     

炎症是心房颤动的一个危险因子

持续性心房颤动 (AF)病人常伴有C反应蛋白 (CRP)升高 ,说明有周身性炎症。但CRP能否预告AF ?尚未经大的人群队列研究过。CardiovascularHealthStudy选入 5 80 6人测量其基线CRP ,评估心血管情况。随访 6 .9± 1.6 (中值 7.8)年。基线时根据病人自报病历及基线时ECG结果识别出AF