动脉壁的硫酸乙酰肝素蛋白聚糖与动脉粥样硬化

一、前言 蛋白聚糖(proteoglycan,PG)为一大类结构特殊的糖蛋白,其糖链部分称糖胺聚糖(glycosaminoglycan,GAG)。GAG是硫酸化或非硫酸化的带负电的重复二糖单位所组成的直链。动脉壁PG中的GAG已知的有硫酸软骨素(chondroitin sulfate,CS),硫酸皮肤素(dermatan sulfate,DS),硫酸乙酰肝素(heparan sulfate,HS)及透明质酸(hyaluronic acid,HA)。除HA外,其余的GAG在体内都是以O-糖苷键连接到蛋白(核心蛋白)上,以PG大分子形式广泛存在于哺乳类动物几乎所有组织的细胞外基质(ECM)及基底膜。目前PG的命名仍根据其所含GAG的种类。动脉壁的PG为内皮细胞(EC)及平滑肌细胞(SMC)所合成的,已知的至少有HA,HSPG,CSPG及DSCSPG(为一杂聚体)。PG的核心蛋白上除连接有GAG外,尚有O-及N-连接寡糖。有的PG还可     

硫酸乙酰肝素蛋白聚糖对乳腺癌细胞的抑制与诱导凋亡作用

目的：观察两种硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）对MDA-MB-231乳腺癌细胞生长的影响及机制。方法：利用MTT 法和生长曲线的绘制检测不同浓度的HSPG在不同时间对MDA-MB-231细胞的抑制作用, 流式细胞术结合Annexin V-FITC 及PI双标记染色检测分析HSPG 对MDA-MB-231细胞凋亡的影响。结果： MTT法测得不同浓度MCF-7 type HSPG作用于MDA-MB-231后24h、48h、72h均可明显抑制肿瘤细胞生长，并且呈现出剂量依赖性；生长曲线结果显示不同浓度MCF-7 type HSPG可明显抑制MDA-MB-231的生长；流式细胞术显示MCF-7 type HSPG诱导MDA-MB-231细胞凋亡增加；MDA-MB-231 type HSPG对其源细胞（MDA-MB-231）则无明显的生长抑制作用，对其凋亡率无明显影响。结论：MCF-7 type HSPG对MDA-MB-231细胞生长具有显著的抑制作用，其机制可能与诱导细胞凋亡有关。     

云芝多糖B对巨噬细胞膜硫酸软骨素-蛋白聚糖结合氧化修饰低密度脂蛋白的影响

目的探讨野生云芝多糖水溶性新组分CVPS-B对RAW264.7巨噬细胞膜硫酸软骨素-蛋白聚糖(CS-PGs)结合氧化修饰低密度脂蛋白(Ox-LDL)的影响。方法分别用溴化氰活化的Sepharose CL-4B亲和层析及体外结合CS-A的方法分别测定CS/PGs与Ox-LDL的结合率;用离子交换层析提取RAW264.7巨噬细胞膜PGs;用1,9-二甲基亚甲基蓝(DMMB)分光光度法测定糖胺聚糖。结果在17μmol MDA·g-1protein Ox-LDL水平,不同剂量CVPS-B(10、50及100μg)在体外降低Ox-LDL(200μg)与CS-A(100μg)结合,分别降低14%、29%(P<0.05)及43%(P<0.01)。不同剂量CVPS-B(10、50及100μg)在体外降低Ox-LDL(17μmol MDA·g-1 protein)与巨噬细胞膜表面PGs结合,分别降低8%、27%(P<0.05)及38%(P<0.01)。不同剂量CVPS-B可抑制Ox-LDL(50mg·L-1,17μmol MDA·g-1 protein)诱导泡沫细胞的形成。结论CVPS-B可体外抑制巨噬细胞膜CS-PGs结合Ox-LDL。     

硫酸乙酰肝素蛋白聚糖与病毒感染

目的综述硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（heparan sulfate proteoglycan,HSPG）与病毒感染的关系。方法查阅近年文献,进行整理和归纳。结果细胞表面HSPG可作为病毒感染的初始结合受体,并对病毒有储存和保护作用,另外HSPG也参与病毒的侵入过程并与病毒转录反式激活有关。结论细胞表面HSPG与病毒感染有着密切的关系。通过对HSPG在病毒感染过程的机制研究,一方面为开发抗病毒药物提供新的思路,另一方面可以通过提高病毒载体的靶向性和感染率,从而提高基因治疗的效果。     

不同代次兔髓核细胞的形态学特征和生物学性状

背景：椎间盘退变是个慢性、复杂的过程,然而椎间盘退变其发生机制尚未完全阐明,很难自行修复。近年来研究细胞移植治疗椎间盘退行性变尚处在实验室阶段。研究髓核细胞的生物学性状可为研究椎间盘退变机制、组织工程构建椎间盘、基因治疗等提供理论依据。 目的：研究兔不同代次髓核细胞的生物学特性,旨在找出合适的种子细胞去治疗椎间盘退变性疾病。 方法：从新西兰大耳白兔椎间盘髓核组织中,分离并培养髓核细胞同时进行培养传代,对原代及第3,4代髓核细胞进行苏木精-伊红染色观察细胞形态学变化;甲苯胺蓝染色和免疫细胞化学法检测髓核细胞内聚集蛋白聚糖和Ⅱ型胶原的表达;反转录PCR法测定Ⅱ型胶原和聚合蛋白聚糖mRNA的表达水平,观察各代髓核细胞生物学特性的变化。 结果与结论：兔椎间盘髓核细胞可以在体外培养并进行传代,原代髓核细胞一般需7 d左右贴壁,形状呈类圆形或多角形,原代和第3代髓核细胞都呈圆形或多角形,活力较强,苏木精-伊红染色后细胞核被染成均一蓝黑色,胞浆呈现淡粉色;髓核细胞经过甲苯胺蓝染色后,胞浆内呈现天蓝色,通过Ⅱ型胶原免疫组织化学染色后,胞浆内表现为黄褐色沉淀。到第4代细胞出现退变,Ⅱ型胶原和聚合蛋白聚糖mRNA的表达水平较前几代细胞显著下降。前3代的髓核细胞代谢旺盛,表型一致,聚集蛋白聚糖和Ⅱ型胶原表达正常,传第4代后髓核细胞开始出现衰老、退变。     

肌营养不良蛋白聚糖的研究现状

肌营养不良蛋白聚糖是一种跨膜糖蛋白,广泛表达于各种组织的基底膜和细胞膜交界面。肌营养不良蛋白聚糖基因在骨骼肌等多种类型的细胞中表达,虽然肌营养不良蛋白聚糖基因突变本身未发现与疾病有关。但是,肌营养不良蛋白聚糖翻译后加工(主要是糖基化)水平的改变会导致肿瘤等疾病。文中对肌营养不良蛋白聚糖的结构和作用、肌营养不良蛋白聚糖与疾病的关系、肌营养不良蛋白聚糖的研究进展进行综述。     

Syndecan-1与VCAM-1在多发性骨髓瘤中的表达及意义探讨

目的本研究旨在探讨多聚体蛋白聚糖(Syndecan-1)和血管细胞黏附分子-1 (VCAM-1)在MM患者骨髓单个核细胞(BMMCs)中表达水平,初步探讨Syndecan-1和VCAM-1对MM的发生、发展及预后的意义.方法收集45例MM患者及10例正常对照的骨髓标本,获取BMMCs,采用实时荧光定量PCR (Real time PCR)的方法检测BMMCs中Syndecan-1和VCAM-1 mRNA的表达,并同步抽取血浆,检测β2微球蛋白(β2-MG)分泌水平,按照Durie-Salmon (D-S)分期标准对MM患者进行临床分期.结果 (1) Syndecan-1和VCAM-1 mRNA在MM组中表达升高,与对照组比较差异有统计学意义,治疗后缓解或平台期Syndecan-1 mRNA表达水平明显减低(P＜0.05);(2)复发/难治性多发性骨髓瘤患者Syndecan-1和VCAM-1 mRNA的表达水平较正常对照组及平台期患者明显升高(P＜0.05),初发组与复发/难治组之间表达无显著差异.Syndecan-1和VCAM-1 mRNA表达与患者病程D-S分期和β2-MG水平有相关性.结论 MM患者Syndecan-1和VCAM-1 mRNA表达水平升高,并且MM初治组、复发/难治组Syndecan-1和VCAM-1 mRNA表达水平均高于平台组,提示Syndecan-1和VCAM-1可能参与MM的发生、发展的病理机制;Syndecan-1和VCAM-1 mRNA表达水平与MM肿瘤负荷呈正相关,说明Syndecan-1和VCAM-1可以作为评判MM患者预后的新指标.     

硫酸软骨素蛋白聚糖对MC3T3-E1细胞株矿化的影响

目的:观察硫酸软骨素蛋白聚糖(chondroitin sulfate proteoglycan,CSPG)对前成骨细胞株MC3T3-E1矿化过程中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和钙离子沉积量的影响。方法:MC3T3-E1细胞株在含不同浓度CSPG(0、5、10、15 mg/L)诱导液中培养,不加CSPG组为对照组,其余3组为实验组,细胞诱导14 d时行ALP染色和活性检测,21 d时行茜素红染色和钙离子沉积量检测。结果:与对照组比较,各实验组ALP和茜素红染色面积随CSPG浓度增加逐渐减小,颜色变浅;定量分析结果显示,钙离子沉积量整体差异有统计学意义(P<0.05),ALP活性整体差异无统计学意义。结论:在本实验周期内,CSPG以剂量依赖方式抑制MC3T3-E1细胞株钙离子的沉积。     

补阳还五汤抑制脊髓损伤区内硫酸软骨素蛋白聚糖表达的实验研究

目的:研究补阳还五汤对大鼠脊髓损伤区硫酸软骨素蛋白聚糖(CSPGs)表达的抑制作用。方法:利用脊髓半横断损伤大鼠模型,将SD大鼠随机分为正常组、空白对照组和补阳还五汤治疗组、阳性对照组(激素组),每组再随机分为7d、15d、30d等3个时间点,通过免疫组织化学染色检测各组脊髓损伤区硫酸软骨素蛋白聚糖表达的差异;结果:补阳还五汤组(0.85±0.03)与空白对照组(1.62±0.06)相比,脊髓损伤区内硫酸软骨素蛋白聚糖表达受到明显抑制,差异有极显著性差异(P<0.01),激素组(1.76±0.04)与空白对照组(1.62±0.06)相比差异无显著性(P>0.05);结论:补阳还五汤可以抑制脊髓损伤区胶质瘢痕内CSPG的表达,从而抑制CSPG对轴突再生的抑制作用,可能是其促进脊髓损伤后后神经功能恢复的机制之一。     

缺氧诱导因子1α经多配体蛋白聚糖1调控缺氧胶质瘤细胞增殖及替莫唑胺抵抗机制初探

目的初步探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)与多配体蛋白聚糖1(SDC1)在缺氧胶质瘤细胞增殖及替莫唑胺(TMZ)化疗抵抗调控中的相互作用。方法将U87细胞分为常氧组、常氧+TMZ组、常氧空载组、常氧空载+DMSO组、常氧空载+TMZ组、常氧SDC1过表达组、常氧SDC1过表达+TMZ组, 缺氧组、缺氧+TMZ组、缺氧空载组、缺氧敲除HIF-1α组、缺氧敲除HIF-1α组+TMZ、缺氧SDC1干扰组、缺氧空载+DMSO组、缺氧空载+TMZ组、缺氧SDC1干扰+TMZ组。采用低氧探针检测细胞缺氧情况;TMZ处理72 h后, 采用CCK-8法检测细胞增殖、流式细胞术检测细胞凋亡情况;敲除HIF-1α后, 于缺氧条件下培养细胞并给予TMZ处理2 、4 、6 、8 d, 检测细胞的乳酸脱氢酶(LDH)释放及细胞凋亡。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹(WB)法检测细胞HIF-1α、SDC1基因和蛋白质的表达量;采用染色质免疫共沉淀(ChIP)-qPCR(ChIP-qPCR)法检测HIF-1α与SDC1启动子结合情况。分析中国脑胶质瘤基因组图谱(CGGA)数据库(32...