兔舌癌哨位淋巴结微转移模型的建立

目的:建立兔舌癌哨位淋巴结(sentinel lymph node,SLN)微转移模型,为进一步研究舌癌区域淋巴结转移的发生、发展机制及防治提供实验平台。方法:先正位、多循环移植Vx-2癌瘤于兔舌,每次8只兔,筛选出高淋巴转移潜力移植瘤;再将其移植到40只兔的舌部,分别于移植后第8、10、12、14和16天各随机处死8只,取出兔舌Vx-2移植瘤SLN,经连续切片和免疫组织化学检测其微转移形成情况。应用SPSS 17.0软件包对结果进行统计学分析。结果:经3次正位循环移植后,所得Vx-2移植瘤舌移植后SLN转移率达100%(8/8);该高淋巴转移潜力移植瘤移植兔舌后10~12 d,所获移植瘤SLN微转移发生率为100%(8/8)。结论:应用本研究筛选的高淋巴转移潜力Vx-2瘤移植兔舌后10~12 d,可获得较稳定的兔舌癌SLN微转移模型。     

Rac1基NRNAi慢病毒载体的构建与鉴定

背景：Rac1是通过信号转导来调节癌细胞的侵袭、增殖,它在各种肿瘤中都有表达。目的：构建RAC1基因RNA干扰慢病毒载体,并检测其干扰效率。方法：应用Western blot检测Rac1基因在舌癌细胞中的表达。针对筛选确定的Rac1基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经AgeI和EcoRI双酶切后的pMagic4.1载体连接产生短发卡RNA慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定后将质粒分别和包装质粒混合物共转染293T细胞,采用Real-Time PCR筛靶,将筛靶成功的质粒进行慢病毒包装,再感染Tca8113细胞。荧光定量PCR和Western blot检测鉴定Rac1基因表达的干扰效果以确定其生物活性。结果与结论：成功构建了RAC1干扰载体,Western blot检测显著抑制Rac1蛋白表达,经Real-time PCR检测pLVT447的抑制率达70%。成功的构建了Rac1基因RNAi慢病毒载体,为RNAi用于靶向Rac1的基因治疗舌癌（Tca8113）提供了有效的siRNA靶序列。     

透明质酸合酶-2在癌相关成纤维细胞促进舌癌细胞侵袭中的作用

目的:检测透明质酸合酶2 (hyaluronan synthase 2,HAS2) 在正常成纤维细胞(normal zone fibroblasts,NFs)及癌相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)中的表达,并探讨其在CAFs介导的舌鳞癌细胞系Cal27侵袭行为中的作用?方法:分别从同一舌癌患者手术切除标本的癌组织及癌旁组织获取CAFs和NFs?免疫细胞化学?Western blot法鉴定细胞表型?实时定量RT-PCR及Western blot检测透明质酸合酶在两种细胞中的表达?利用Transwell小室共培养模型,观察CAFs及NFs对舌癌细胞系Cal27侵袭能力的影响?利用siRNA抑制CAFs 中的HAS2,并分析其对Cal27侵袭能力的影响?结果:α-SMA表达于CAFs,NFs中几乎无表达?Cal27在CAFs组中的侵袭力显著高于NFs组及空白对照组(P < 0.01)?实时定量RT-PCR结果显示HAS2在CAFs中的表达是NFs的7倍(P < 0.01),蛋白水平则为NFs的3倍(P < 0.01);Cal27在HAS2干扰组的侵袭力显著低于CAFs组及无关序列组(P < 0.01)?结论:CAFs具有促进舌癌细胞侵袭能力的作用,高表达HAS2可能是其作用机制之一,抑制肿瘤微环境中CAFs的HAS2功能可能是一条新的抗肿瘤侵袭转移的途径?     

siRNA抑制人舌癌细胞VEGF表达对MMP-9蛋白表达的影响

目的利用小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）抑制人舌癌Tca883细胞血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达,观察其对培养细胞和移植瘤基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）蛋白表达的影响。方法以稳定转染携带VEGF—siRNA真核表达载体的人舌癌Tca8113细胞（VEGF—siRNA1、VEGF—siRNA2）为实验组,以转染空载体人舌癌Tca8113细胞及未转染的人舌癌Tea8113细胞为实验对照组和空白对照组,将各组细胞分别接种于裸鼠皮下,用免疫细胞／组织化学法分别测定各组培养细胞和移植瘤VEGF及MMP-9的蛋白表达。结果在培养细胞和移植瘤中,与实验对照组和空白对照组相比,VEGF—siRNA1组和VEGF—siRNA2组VEGF染色平均灰度值高,差异有统计学意义（P〈0．05）;各组培养细胞中均未见MMP-9表达;各组移植瘤MMP-9染色平均灰度值之间的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论以siRNA干扰沉默人舌癌Tca8113细胞VEGF基因,可明显抑制细胞及移植瘤内VEGF蛋白表达,但是对MMP-9蛋白的表达无明显影响。     

舌癌VEGF-C表达与颈淋巴结转移的关系及其临床意义

目的 :研究淋巴管生长因子 (VEGF C)表达与舌癌颈淋巴结转移的关系及其临床意义。方法 :收集一期行颈淋巴清扫术的舌癌病例 74例 ,行原发灶的VEGF C免疫组化染色及颈淋巴结的细胞角蛋白 (Cytokeratin ,CK)AE1/AE3免疫组化染色 ,观察原发灶的VEGF C表达情况及颈淋巴结转移情况。结果 :74例患者中 ,VEGF C高表达 39例 (5 2 .7% ) ,VEGF C低表达 35例 (47.3% ) ,有颈淋巴结转移者 38例 (5 1.4 % )。Fisher’s精确概率检验表明T1、T2期舌癌VEGF C表达和颈淋巴结转移密切相关。单因素Logistic回归表明T1、T2期舌癌淋巴结转移与VEGF C表达、T分期及N分期相关 ,而多因素Logistic回归表明T1、T2期舌癌淋巴结转移仅与VEGF C表达相关(P <0 .0 1)。结论 :VEGF C表达对评估早期舌癌颈淋巴结转移有重要意义。     

醋酸棉酚对人舌鳞癌Tca8113细胞hMLH1蛋白及mRNA表达的影响

目的：研究醋酸棉酚（gossypol acetic acid,GAA）对人舌鳞癌Tca8113细胞hMLH1蛋白及mRNA表达的影响,探讨GAA的抗肿瘤作用机制．方法（1）应用Western-blot法检测Tca8113细胞在GAA作用48 h后hMLH1基因的蛋白表达变化;（2）应用实时荧光定量（RFQ-PCR）法检测Tca8113细胞在GAA作用48 h后hMLH1基因mRNA 的表达变化．结果（1） Western-blot检测显示：分别用终浓度5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L的GAA作用人舌鳞癌Tca8113细胞48 h后,hMLH1基因的蛋白表达比对照组明显增高（＜0.05）;（2） RFQ-PCR检测显示：以终浓度5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L的GAA作用于Tca8113细胞48 h后hMLH1基因的mRNA表达水平高于对照组（＜0.05）．结论一定浓度的GAA能够使人舌鳞癌Tca8113细胞系hMLH1基因的蛋白及mRNA表达上调,这可能是GAA抗肿瘤作用机制之一．     

舌癌全切术后全口义齿修复1例报告

<正>1临床资料1.1一般资料患者,女性,48岁。于2008年12月在北京协和医院被诊断为舌癌遂行舌全切手术,2010年12月来本院修复口腔牙列缺失。检查:患者下颌颜面皮肤正中瘢痕,皮肤、肌肉运动受限;开口度2指,上下颌牙槽嵴顶3指;口裂间距离4~6 cm;左侧下颌关节开闭略偏斜,影响不大,前伸牙合0.8 mm。上下颌牙列缺失,45、46缺失处牙槽嵴相对正     

舌癌颈淋巴结转移的术式选择

目的 为了探讨舌癌颈淋巴结转移的部位及外科手术术式选择。方法 对我科１９７８～１９９８年手术治疗的６８例舌癌病人进行性分析。结果 舌癌沿淋巴道转移到颈部,转移率为４０．９８％,且沿颈淋巴系统垂直链颈上－颈中－颈下淋巴结逐步扩散。舌癌颈淋巴结转移选择性根治术复发率为１２．５％（５／４０）,而选择性舌骨下清扫术复发率３０．８％（４／１３）,结论 舌癌颈淋巴结转移应扩大选择性颈淋巴结清扫术的适应证;肩肿     

丙泊酚与七氟醚对舌癌根治术患者NK细胞和B淋巴细胞的影响

目的比较丙泊酚与七氟醚对舌癌根治术患者外周血NK细胞和B淋巴细胞的影响。方法选择择期行舌癌根治术患者40例,男25例,女15例,年龄44~67岁,ASAⅠ或Ⅱ级。随机分为两组:丙泊酚组(P组)和七氟醚组(S组),每组20例。P组采用丙泊酚2.0~2.5mg/kg、瑞芬太尼1~2μg/kg、顺苯磺酸阿曲库铵0.15mg/kg静脉麻醉诱导,丙泊酚4~6mg·kg-1·h-1及瑞芬太尼0.2~0.3μg·kg-1·min-1静脉输注维持麻醉;S组采用8%七氟醚、新鲜气体流量5L/min吸入,瑞芬太尼1~2μg/kg、顺苯磺酸阿曲库铵0.15mg/kg静脉注射诱导,瑞芬太尼0.2~0.3μg·kg-1·min-1静脉输注及2%~3%七氟醚吸入维持麻醉。分别在麻醉诱导前30min(T0)、麻醉后1h(T1)、3h(T2)、5h(T3)、手术结束时(T4)、手术结束后24h(T5)、48h(T6)、72h(T7)采集外周静脉血,采用流式细胞仪测定外周血NK细胞(CD3-CD16+56+)及B淋巴细胞(CD3-CD19+)百分比。结果与T0时比较,T1~T5时两组CD3-CD16+56+和CD3-CD19+百分比明显降低(P0.05),T6时S组CD3-CD16+56+百分比明显降低(P0.05);T2~T6时S组CD3-CD16+56+百分比明显低于P组(P0.05),两组各时点CD3-CD19+百分比差异无统计学意义。结论与七氟醚比较,丙泊酚可维持较高的NK细胞百分比,有利于维持舌癌根治术患者免疫功能。     

带蒂胸大肌肌皮瓣修复舌癌术后缺损的护理

通过总结带蒂胸大肌肌皮瓣移植治疗舌癌术后缺损患者15例的护理经验,提出术前完善的准备、术后精心的护理措施,尤其是对术后移植皮瓣的观察和血管危象的观察,做到早发现、早处理,保障了带蒂胸大肌肌皮瓣移植修复舌癌术后缺损术的成功开展.