软骨组织工程用羧甲基壳聚糖/氧化海藻酸钠 复合水凝胶的制备及体外评估

目的 优化羧甲基壳聚糖/氧化海藻酸钠（CMCS/OSA）复合水凝胶制备工艺,并应用于软骨组织工程。方法 制备氨基与醛基比例分别为2:1、1:1、1:2的CMCS/OSA复合水凝胶,并通过扫描电子显微镜观察、流变学检测、黏附拉力测试、溶胀率分析及细胞实验等方法评价复合水凝胶的微观形态、物理特性以及生物相容性,以制备满足软骨再生领域需求的水凝胶。结果 氨基与醛基比为1:1时,制备出的水凝胶具有良好的孔隙率、适宜的成胶时间、较强的黏附力及稳定的溶胀率等性质,对细胞有良好的生物相容性。结论 氨基与醛基比为1:1时制备出的CMCS/OSA复合水凝胶是软骨组织工程优异的支架材料。     

hHGF基因修饰的hUC-MSCs移植在急性心肌梗死模型心肌损伤修复中的作用

目的观察人肝细胞生长因子（hHGF）基因修饰的人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）移植在急性心肌梗死模型心肌损伤修复中的作用。方法用携带hHGF基因的腺病毒基因表达载体以150感染强度（MOI）转染hUC-MSCs,获得hHGF基因修饰的hUC．MSCs。30只广西巴马小型猪制作急性心肌梗死模型。造模成功后的24只猪随机分为A、B、c、D组各6只。C组采用微量注射器将hUC-MSCs悬液经心外膜呈矩阵分布多点注入梗死组织,D组以同样方法注入hHGF基因修饰的hUC．MSCs悬液,B组注入等量PBS,A组只造模。术后6周,经核素心肌灌注显像法检测心肌灌注与心脏功能变化;Masson三色法检测存活心肌,免疫组化法检测新生血管光密度。结果A、B、C、D组灌注质量缺损百分率差值（AMDP）分别为4．33％±1．86％、3．67％±1．21％、-0．83％±1．17％、-0．17％4-1．33％,左室射血分数差值（ALVEF）分别为-9．17％4-2．48％、-9．33％±2．73％、1．00％±3．22％、0．50％±2．26％,C、D组与A、B组的AMDP、ALVEF比较,P均〈0．001。A、B、c、D组在梗死交界区域存活的心肌累计光密度（IOD）值分别为313914±4794、31520±4164、72271±4844、79862±3603,新生血管IOD值分别为1363±157、1380±95、4271±398、4782±225,C、D组与A、B组比较,P均〈0．001;D组与C组比较,P〈0．05。结论hHGF基因修饰的hUC-MSCs可在急性心肌梗死模型的梗死区域内部分存活,在促进血管新生的同时减轻心肌纤维化,改善梗死区域的心肌存活和收缩功能,抑制心室重塑的发生。     

人脐带间充质干细胞不同部位移植对压力性尿失禁治疗作用的研究

目的研究尿道周围及坐骨神经近端移植人脐带间充质干细胞（hUCMSCs）是否可以提高压力性尿失禁大鼠的尿道闭合压。改善其储尿能力。方法模拟绝经和产伤构建压力性尿失禁大鼠模型,并用漏尿点压力（LPP）、最大膀胱容积（MCC）及“模拟喷嚏”实验进行检测。将hUCMSCs分别注射移植到压力性尿失禁大鼠的尿道周围及坐骨神经近端。1个月后再次检测漏尿点压力及最大膀胱容积。结果移植后1个月,尿道周围治疗组与尿道周围模型组MCC差值差异无统计学意义（P〉0．05）;而尿道周围治疗组LPP增高,尿道周围模型组LPP降低,两组差值差异有统计学意义（P〈0．01）。移植后1个月．坐骨神经治疗组MCC和LPP与坐骨神经模型组相比,其差值差异均无统计学意义（P值均〉0．05）。结论人脐带间充质干细胞注射移植到尿道周围可以提高压力性尿失禁大鼠的尿道闭合压,但不能改善其储尿能力;而移植到坐骨神经近端短期内不能改善压力性尿失禁大鼠的储尿能力。     

六个转录因子将人脐带间充质干细胞高效重编程为诱导性多能干细胞的实验研究

目的 建立人脐带间充质干细胞(HuMSCs)来源的诱导性多能干细胞(iPSC)系.方法 以慢病毒载体将OCT4、SOX2、KLF4、c-Myc、NANOG、LIN-28 6个转录因子转入HuMSCs使其重编程为iPSC.通过形态学观察、多能细胞特异性标志检测、碱性磷酸酶(AKP)染色、核型分析、拟胚体形成、体内成瘤实验鉴定获得的iPSC.结果 慢病毒感染后第4天,HuMSCs逐渐变成类圆形,第10天开始出现不规则细胞团,第14天出现较大的细胞团,约1.25％的细胞重编程为iPSC.建系后iPSC呈典型的克隆状生长,边缘清晰,内部细胞细小,排列紧密;AKP染色阳性;表达多能性相关基因及胚胎干细胞特异性蛋白;细胞核型正常(46,XY);体内外均能向3个胚层方向分化.结论 慢病毒携带OCT4、SOX2、KLF4、c-Myc、NANOG、LIN-28 6个因子能将HuMSCs高效诱导为完全重编程的iPSC.     

妊娠晚期脐带异常的监护及紧急应变护理

脐带是母体与胎儿间氧与营养物质的输送传递通道,脐带异常引起功能障碍而影响胎儿所获得氧气及营养物质,导致胎儿窘迫甚至危及胎儿生命.我们对孕晚期B超提示胎儿颈旁见脐带压迹、胎儿监护图型分析,提示脐带受压的孕妇做好产前监护及护理.结果 分娩证实,1607例脐带异常中,胎儿窘迫167例(10.38%).产前产时做好胎儿宫内监测,一旦发现异常,及时、恰当地进行干预,有助于降低新生儿窒息的发生率.     

人脐带间充质干细胞的生物学特性及应用前景

问充质干细胞（mesenchymal stem ceHs,Mscs）是来源于发育早期中胚层的具有高度自我更新能力和多向分化潜能的多能干细胞,可在体外培养扩增,并能在特定条件下分化为神经细胞、成骨细胞、软骨细胞、肌肉细胞、脂肪细胞等,在细胞替代治疗及组织工程等方面具有极大的应用价值。骨髓、胎儿、外周血及脐带血来源的MSCs都有其自身的劣势,而人脐带来源的MSCs有着无法比拟的优势：来源广泛、采集方便、无伦理法律限制、扩增迅速、免疫原性低、支持造血、多向分化等,在细胞治疗、基因治疗、组织工程等方面有着广阔的应用前景。     

白细胞介素12基因修饰的人脐带间充质干细胞联合miR-127基因在卵巢癌类器官中的作用研究

目的 探讨白细胞介素（IL）-12基因及微小RNA(miR)-127基因共转染后的人脐带间充质干细胞（hUCMSCs）是否拥有更为持久、稳定的抗肿瘤作用。方法 选取2021年7月至2021年9月就诊于厦门大学附属第一医院分娩产妇的人脐带组织及卵巢癌患者的卵巢癌组织,贴壁法分离hUC-MSCs;慢病毒转染IL-12基因及miR-127基因;定量反转录聚合酶连锁反应（qRT-PCR）、免疫印迹实验（Western-Blot）、侵袭、迁移、酶联免疫吸附试验（ELISA）等明确IL-12基因修饰的h UC-MSCs联合miR-127基因在卵巢癌中发挥的作用。结果 在人卵巢腺癌（OVCAR3）细胞增殖方面,h UC-MSC组的OVCAR3细胞较空白（Mock）对照组增加[OD450:(2.26±0.13)vs.(2.71±0.14),P<0.01],hUC-MSC/IL-12+miR-127组较h UC-MSC/NC组减弱[OD450:(2.62±0.12)vs.(2.25±0.13),P<0.01];在细胞迁移方面,h UC-MSC组的OVCAR3细胞较Mock对照组增强[迁移数量...     

神经元素3过表达对诱导人脐带间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化的影响

目的 探讨神经元素3(Ngn3)的过表达能否促进人脐带间充质干细胞(HUCMSCs)向胰岛素分泌细胞(IPCs)的诱导分化.方法 分离培养HUCMSCs,流式细胞术鉴定其表面分子表达,成脂细胞、成骨细胞诱导鉴定其多向分化潜能;分阶段诱导HUCMSCs分化为IPCs,该过程包括低糖诱导和高糖诱导两阶段共21 d;实验分为...