人脐带间充质干细胞体外成骨分化对骨折局部BMP-2表达的影响

[目的]探讨体外不同程度诱导人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)成骨分化对大鼠股骨骨折局部骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)表达的影响。[方法](1)选用120只成年Wistar大鼠制作股骨不全骨折模型,随机分为A、B、C、D、E、F六组;(2)利用组织块贴壁法分离培养h UC-MSCs,流式细胞仪鉴定细胞表面抗原,给予体外成骨分化诱导,采用茜素红S染色鉴定,将未诱导和诱导3、7、11、15 d的h UC-MSCs分别注入A、B、C、D、E组实验动物骨折处,F组注射生理盐水作为空白对照组,于移植后1、2、3、4周分别切取标本,采用免疫组化显示BMP-2并行统计学分析。同时检测实验大鼠血常规。[结果]h UC-MSCs成骨诱导3周时细胞内出现大量钙结节。细胞移植各组BMP-2表达在第1、2、3、4周时均明显强于空白对照组。A、B、C、D、E各组BMP-2表达在第1周和第4周时没有显著性差异,在第2、3周时B、C两组显著强于A、D、E三组。BMP-2表达在第2周时出现最高峰,之后下降,在第4周时仅少量表达。六组之间血常规差异无统计学意义。[结论]h UC-MSCs具有较好的免疫相容性,移植前体外诱导h UCMSCs成骨分化能提高骨折愈合早期BMP-2的表达,诱导3、7 d效果最佳。     

人脐带间质干细胞来源的外泌体抑制肝窦内皮细胞毛细血管样改变

目的: 探讨人脐带间质干细胞来源的外泌体(mesenchymal stem cell derived exosomes, MSC Ex)对肝窦内皮细胞(liver sinusoidal endothelial cell, LSEC)毛细血管样改变的影响。方法: 从人脐带组织中分离培养间质干细胞,采用超速离心法提取培养上清液中的MSC-Ex。采用透射电镜、纳米颗粒跟踪分析仪以及蛋白质免疫印迹对MSC-Ex进行形态和表征的鉴定。用TNF-α诱导建立LSEC血管化模型,并加入DIO荧光染料标记的MSC-Ex共培养,观察LSEC对MSC-Ex的摄取能力。采用qRT-PCR检测LSEC中促血管生成素-2(angiopoietin-2,Ang-2)、CD34的mRNA相对表达,采用蛋白质免疫印迹检测LSEC中Ang-2、CD34蛋白表达,采用小管形成实验检测LSEC的管腔形成能力。构建蛋氨酸、胆碱缺乏饮食(methionine and choline deficiency diet,MCD)诱导的ICR小鼠肝纤维化模型,然后尾静脉分别注射MSC Ex(10 mg/kg)和100 μL PBS,每3 d注射1次,共注射5次。采用天狼猩红染色及免疫组织化学染色分别观察肝组织胶原沉积及检测Ang-2蛋白表达。结果: 蛋白质免疫印迹显示MSC-Ex高表达外泌体特征性标志物Alix、TSG101、CD63、CD9,透射电镜显示MSC-Ex为直径约100 nm的盘状囊泡,纳米颗粒跟踪分析仪显示其颗粒浓度约为3.4×1011/mL。MSC Ex可被LSEC摄取,并显著抑制TNF-α诱导的LSEC的管腔形成及Ang-2、血管内皮细胞标志CD34表达。天狼猩红染色和免疫组织化学染色显示,MSC Ex可限制纤维化肝组织的胶原沉积和Ang-2蛋白表达。结论:人脐带MSC-Ex可在体内外抑制LSEC毛细血管样改变。     

人脐带间充质干细胞用于衰老相关疾病治疗的研究进展

随着干细胞移植技术的发展,通过输入干细胞进行抗衰老治疗或治疗退行性疾病成为人们研究的热点。人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUCMSCs)是一种存在于脐带沃顿胶以及血管周围组织中的独特前体细胞,具有自我更新和多向分化潜能。目前大量科学研究显示HUCMSCs通过再生和修复衰老的细胞、组织和器官达到抗衰老作用。该文对HUCMSCs的生物学特性、组织再生修复作用和抗衰老治疗机制的研究进展进行了详细回顾,并对目前HUCMSCs临床前研究现况进行了总结,提示HUCMSCs是一种具有良好应用潜力和价值的干细胞类型。     

不干预法在新生儿脐带护理中的应用研究

目的探究不干预法在新生儿脐带护理中的应用研究。方法对照组常规护理干预,观察组采用不干预法管理,观察对比两组护理效果。结果观察组脐带脱落平均时间为(12.35±2.3)d,明显短于对照组的(16.48±1.39)d;观察组脐部残端修复各分期及完全修复平均时间,均明显短于对照组;两组均未发生脐炎,观察组脐带分泌物、渗血及脐部肉芽肿发生率均低于对照组,两组具有显著差异,P<0.05。结论在新生儿脐带护理中应用不干预法管理,可有效缩短完全修复时间,促进形成脐窝,降低并发症。     

脐带间充质干细胞调节炎性微环境干预急性肾损伤的效应研究

目的：观察移植外源性脐带间充质干细胞（UC-MSCs）对小鼠急性肾损伤（AKI）炎性微环境的影响及对肾组织的修复作用。方法：分离培养孕后期C57BL/6雌性小鼠的UC-MSCs。另取雌性C57BL/6小鼠60只,随机分为正常对照组、AKI组、AKI＋MSC移植组,每组20只。AKI组和AKI＋MSC组用微型动脉夹夹闭小鼠双侧肾蒂45 min复制AKI模型,并于模型制备成功时腹腔内注射生理盐水0.2 ml（AKI组）或1＆#215;106 UC-MSCs（AKI＋MSC组）。于第2天和第7天每组活杀10只小鼠,取眼球血及肾组织,检测血尿素氮（BUN）及血肌酐（SCr）水平;肾组织行HE染色,观察组织病理学变化;ELISA法检测肾组织匀浆中促炎因子IL-1β、TNF-α、干扰素-1（IFN-1）及抗炎因子碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、IL-10、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）的水平。结果：2 d时AKI组小鼠肾小管上皮细胞肿胀,胞质空泡性变,BUN和Cr均显著高于正常对照组,提示造模成功后肾小管受损严重,7 d稍有减轻;AKI＋MSC移植组小鼠肾功能在2 d时较AKI组有所恢复,肾组织病理学变化明显减轻（P＜0.01）,7 d基本恢复正常。ELISA结果显示,与正常对照组比较, AKI组各时间点肾组织匀浆中促炎因子的水平均显著升高（P＜0.01或P＜0.05）,抗炎因子的水平均显著降低（P＜0.01或P＜0.05）,2 d较7 d更加明显。各时间点AKI＋MSC组抗炎因子的水平较AKI组明显升高,促炎因子的水平明显下降,但与正常对照组比较差异均有显著性（P＜0.01或P＜0.05）,7d较2 d改善更明显。结论：MSC可通过减轻AKI肾组织炎症反应,调节损伤肾脏组织微环境中的细胞因子水平发挥保护肾损害的修复作用。     

脐带间充质干细胞治疗再生障碍性贫血18例临床研究

目的 初步观察脐带间充质干细胞（umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSC）治疗再生障碍性贫血（aplastic anemia,AA）患者的疗效和安全性.方法 18例AA患者,中位年龄28（7～49）岁,重型AA 10例,非重型AA 8例;7例曾接受免疫抑制治疗,均无效.从正常足月分娩胎儿的脐带分离培养UC-MSC,静脉输注给患者,每次输注细胞数为1×106/kg,每周输注1～2次.观察治疗前、后患者外周血细胞计数、骨髓细胞学、骨髓活检、外周血CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋T淋巴细胞亚群比例及临床症状等,观察治疗相关不良反应.结果 18例患者接受UC-MSC输注中位次数38 （12～96）次,中位治疗时间8（3～16）月,中位随访时间31 （6～36）月.其中3例患者基本治愈,7例缓解,1例明显进步,2例患者贫血和出血症状好转、输血间隔延长,5例无效;总有效率72.2％.7例既往对免疫抑制剂无效的患者中,4例有效.12例患者在治疗前外周血CD4＋/CD8＋细胞比值倒置,治疗后11例不同程度升高（其中7例恢复正常）.所有患者均未出现明显的治疗相关不良反应.结论 UC-MSC治疗有助于改善AA患者的骨髓造血功能,短期观察未发现不良反应,尤其对免疫抑制治疗无效、不适合移植或不能耐受相关副作用的AA患者具有重要的临床价值.     

改良脐带结扎法在临床中的应用与护理观察

在产科产房接生过程中,脐带结扎处理直接影响新生儿脐部感染的关键环节。是关系到产科产房感染率、新生儿出生死亡率高低的决定因素。国家在《降低孕产妇死亡率,消除新生儿破伤风》中已对其重要性做了详实阐述。     

外用胰岛素配合脐带粉治疗糖尿病并发压疮的研究与应用

目的：探讨外用胰岛素配合脐带粉治疗糖尿病并发压疮的临床效果。方法选取本院收治的80例糖尿病并发压疮患者作为研究对象,随机分为观察组与对照组,各40例,观察组采用外用胰岛素配合脐带粉治疗,对照组采用外用胰岛素治疗,比较两组的压疮愈合时间、临床治疗效果及不良反应发生情况。结果观察组的压疮愈合时间显著短于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;观察组的治疗总有效率显著大于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;两组的不良反应发生率比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论外用胰岛素配合脐带粉治疗糖尿病并发压疮可缩短病程,提高临床治疗效果,促进患者康复。     

人脐带间充质干细胞联用神经节苷酯GM1治疗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤

目的 观察人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells, hUCMSCs)移植及联用神经节苷酯GM1治疗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage, HIBD)的效果。方法 RICE法制备七日龄新生大鼠HIBD模型, 随机分为hUCMSCs移植组(n=15)、hUCMSCs+GM1组(n=15), 72 h后经颈静脉移植等量的hUCMSCs, hUCMSCs+GM1组再腹腔注射GM1, 两组均在移植后第31、32、33、34、35天用Morris水迷宫对两组大鼠行为学测试, 比较两组大鼠脑功能恢复情况。免疫荧光染色观察DiI标记的hUCMSCs移植后在两组大鼠脑中的分布情况;神经元前体细胞标记DCX特异性染色观察hUCMSCs移植后分化成神经元前体细胞的情况。结果 Morris水迷宫测试:hUCMSCs+GM1组逃避潜伏期明显短于hUCMSCs移植组, 差异具有统计学意义(P＜0.05)。移植后hUCMSCs能迁徙到脑组织中, 并分布于缺血区的小血管旁, 能分化成神经元前体细胞。hUCMSCs+GM1组大鼠脑片干细胞分布明显多于hUCMSCs移植组(P＜0.05)。结论 hUCMSCs移植对HIBD新生大鼠脑功能有修复作用, 联用GM1, 有协同作用。     

脐带帆状附着重复胎盘2例

例1：33岁,因“41＋4周妊娠,孕2产0,不规律腹痛6h”入院。入院时体格及产科检查未见异常,常规化验未见异常。入院后紧急B超示羊水过少,胎心监护无反应型。急症手术剖宫产一女婴,Apgar评分为10分,体质量3600 g,3 min后胎盘胎膜剥离并完整娩出,检查发现为双叶构成,大小分别为16 cm ×15 cm×2 cm、15 cm ×14 cm×2 cm;两叶的血管均清晰,两胎盘间有血管交通,脐带附着于两胎盘中央胎膜处,脐带血管无异常（见图1、2）。新生儿出生后查体未见异常,胎盘送病理检查示双胎盘。