酸性成纤维细胞生长因子在宫颈癌中的表达及其信号传导途径

目的探讨酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)在宫颈癌发生发展中的作用及其信号传导机制.方法应用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)对36例宫颈癌组织aFGF 及其受体FGFR1的表达进行了分析;并以不同浓度的aFGF 和酪氨酸蛋白激酶(TPK)抑制剂genistein诱导宫颈癌细胞株HeLa细胞,[γ-32P]ATP掺入外源性底物的方法,液体闪烁测定蛋白激酶C(PKC)及细胞外信号调节激酶(ERK)的活性.结果 aFGF mRNA 和FGFR1 mRNA在宫颈癌组织中的半定量检测结果分别为(1.233±0.064)和(1.168±0.103),与正常宫颈组织相比,差异有显著性(P<0.05),且在Ⅲ～Ⅳ期宫颈癌中的表达水平明显高于Ⅰ～Ⅱ期(P<0.05);随着aFGF浓度的增加,HeLa细胞PKC及ERK 活性随之升高,与aFGF浓度呈剂量依赖效应;genistein抑制细胞内PKC及ERK 活性,与genistein 浓度亦呈剂量依赖效应.结论提示aFGF 与宫颈癌的发生、发展、浸润呈正相关,其受体具有TPK活性,TPK激活后可进一步激活PKC和ERK,进一步证明PKC及ERK确是TPK的下游信号分子.     

三七总皂甙对淀粉样β25～35肽诱导的NG108-15细胞老年性痴呆模型的保护作用

背景：阿尔茨海默病(Alzheimer disease，AD)的病理病因虽然还没有完全清楚，但目前认为β-淀粉样肽(amyloid β-peptide，Aβ)是引起AD的胆碱能神经功能紊乱的主要成分。因此，Ag的产生及其对神经细胞的影响，以及寻找该病的发病机制、治疗方法及其有效的治疗药物成了医药界的研究热点。目的：观察三七总皂甙(PNS)对NG108-15细胞老年性痴呆模型的影响，为寻找该病的发病机制提供佐证，为研究和开发中药的新成分提供理论依据。设计：体外平行对照实验。单位：广西中医学院新药开发中心，广西中医学院生物化学教研室。对象：实验在广西中医学院新药开发中心完成。NG108-15细胞：中国科学院上海细胞研究所提供。PNS：云南玉溪维和制药厂生产。Aβ25～35片段：德国Sigma公司产品，批号：042K49501。MTT(四甲基噻唑蓝)，德国Sigma公司产品，批号：020609。cAMP(环-磷酸腺苷)日本ャマサ酱油株式会社产品，批号：00207。胚胎牛血清(FBS)：由美国Hyclone公司提供，批号：0405。DMEM培养基：美国GIBCO公司产品，批号：0311。干预：NG108-15细胞培养法：含50mL／L胚牛血清、10g／LHAT、10g／L青霉素和链霉素(1：1)的DMEM培养液，置100mL／LCO2、37℃用的培养箱内培养殖，每隔一天换一次液，4d传代一次。主要观察指标：利用MTT法、细胞计数法和细胞形态学检测法观察PNS对NG108-15细胞存活率和细胞突起的改变。结果：PNS能增加Aβ25～35片段神经毒性诱导的NG108-15细胞存活率[增殖状态：(311&;#177;21)％，分化状态：(113&;#177;31)％，P&;lt;0．05，F=5．567]、细胞突起率[增殖状态：(25．66&;#177;3．65)％，分化状态：(67．97&;#177;2．47)％，P&;lt;0．05，F=6．471]和细胞突起平均长度[增殖状态：(25．66&;#177;3．09)μm，分化状态：(25．66&;#177;3．65)μm，P&;lt;0．001，F=12．641]。结论：PNS具有减轻细胞对Aβ的神经毒性反应和促进细胞突起生长的作用，表明PNS能对老年性痴呆的病理发展有拮抗作用。     

嗅鞘细胞移植在大鼠脊髓损伤处能够迁移和促进神经轴突生长吗?

目的：探讨嗅鞘细胞（olfactory ensheathing cells,OEC）移植在大鼠损伤脊髓后是否有独特的迁移和轴突生长导向特性。方法：将表达绿色荧光蛋白基因的OEC注入到C4脊髓损伤大鼠距离损伤部位头端1mm及尾端1mm背柱白质处,注射后1、3、12、24h及3、7、28d灌注固定取材,冰冻切片和免疫组化分析。用骨髓基质细胞和成纤维细胞移植到同样的损伤部位做为对照进行同样的分析。另将OEC注射到距离损伤部位头尾侧1mm处脊髓灰质内、小剂量注射在白质内、在损伤前3d或损伤后9d注射、注射到未损伤脊髓白质中,观察细胞迁移情况。结果：OEC在细胞注射后1h内即形成由注射压力造成的从注射部位向损伤处的被动性延伸带,并且不断地从注射部位向损伤处延伸扩散,在形态学方面好象起到＂桥接＂损伤处的作用。对照组骨髓基质细胞和成纤维细胞注射后也迅速形成细胞＂桥接＂带,并扩散至损伤空腔。将OEC注射到脊髓灰质内或小剂量注射或注射到未损伤的脊髓白质内、在脊髓损伤3d前或9d后注射细胞均没有见到细胞带延伸进入损伤部位。OEC在注射部位、细胞带以及损伤部位有增殖现象。28d后,共焦免疫酶标法证实细胞带取代了脊髓原有星形胶质细胞,但是下行或上行长束轴突没有优先延伸至该细胞带,也没能起到维持皮层脊髓轴突的桥接作用。结论：OEC在植入大鼠损伤脊髓后没有独特的迁移特性,与骨髓基质细胞或成纤维细胞相比没有明显促进轴突生长的作用,也没有支持皮层脊髓轴突在脊髓损伤处形成桥接的作用。     

肿瘤干细胞与肝癌干细胞

肿瘤起源于干细胞的假说正在各种人类肿瘤中得到证实,肿瘤不单是一种基因病,而且是一种干细胞病,基因突变作用于干细胞,干细胞突变成为肿瘤干细胞,这是肿瘤发生、再生、转移和复发的关键。肝细胞癌是最常见的恶性肿瘤之一,其中是否存在“肝癌干细胞”的问题一直倍受人们关注。该文介绍肿瘤干细胞与肝癌干细胞的研究情况。     

星形神经胶质细胞对PC12神经元突起生长发育的影响

背景星形细胞对神经元有提供营养、支持及调节突触活性作用,但它对神经元发育的影响还尚不清楚.目的探讨体外培养的Sprague Dawley大鼠大脑皮质星形细胞对PC12神经元突起生长发育的作用.设计完全随机设计,对照实验研究.方法以培养的星形细胞与PC12神经元按不同细胞数目比例(501～11)共同培养,并用其制备的条件培养液培养PG12细胞.主要观察指标用快速灵敏的MTT'比色法测定PC12神经元的细胞活力,用光学相差显微镜观察PC12细胞形态学变化.结果①星形细胞条件培养液可增强PG12细胞活力(MTT测定的A值由0.255±0.012提高到0.510±0.036,P＜0.001),却不能促使PC12神经元突起的生出.②当将星形细胞与PC12细胞按301～11的比例共同培养时,既可提高PC12细胞折光性和光晕又可促使其突起的生长;但按501～401的比例共同培养时,只观察到提高PC12细胞折光性和光晕,而无促使其突起生长发育的作用.结论PC12神经元细胞活力的提高与星形细胞分泌到条件培养液中的可溶性因子有关,而PC12神经元突起生长发育可能是和与星形细胞的直接接触以及二者的细胞数目比有关.     

基质金属蛋白酶-2，9及细胞外基质金属蛋白酶诱导因子与骨肉瘤患者性别、年龄、预后的关系

目的：检测基质金属蛋白酶-2(Matrix MetalloProteinase-2，MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(Matrix MetalloProteinase-9，MMP-9)及细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(Extracellular Matrix MetatloProteinase Inducer，EMMPRIN)在骨肉瘤组织中的表达，并判断其与骨肉瘤患者性别、年龄、肿瘤的部位、病理分型和复发、转移的关系，寻找有利于保肢治疗的良好时机。方法：收集1996-05／2003-05临床病理资料完整、获得随访的骨肉瘤患者60例，对其手术标本中具有诊断意义的部位进行免疫组织化学染色(S-P法)，观察MMP-2,9及EMMPRIN在骨肉瘤中的表达，并对其与患者性别、年龄、肿瘤的部位、病理分型和复发、转移的关系进行统计学分析。结果：在60例骨肉瘤标本中，MMP-2阳性率77％(46／60)，MMP-9阳性率78％(47／60)，EMMPRIN阳性率72％(43／60)，三者与患者的性别、年龄、肿瘤的部位、病理分型均无显著性相关关系(P&;gt;0．05)。MMP-2，9的表达与肿瘤的复发有显著性相关关系(P&;lt;0．05)，但和肿瘤的转移无显著性相关关系(P&;gt;0．05)。EMMPRIN的表达不但与肿瘤的复发有显著性相关关系(P&;lt;0．05)，而且和肿瘤的转移也有显著性相关关系(P&;lt;0．05)。EMMPRIN与MMP-2的相关系数为0．626(P&;lt;0．05)，与MMP-9的相关系数为0．504(P&;lt;0．05)。结论：EMMPRIN的表达与MMP-2，9的表达呈正相关，与肿瘤的复发及转移呈显著性相关。MMP-2，9及EMMPRIN在骨肉瘤中的表达高于正常组织，与患者的性别、年龄、肿瘤的部位和组织学类型无显著性相关，而与肿瘤的预后有明显的关系。     

印戒细胞癌皮肤转移误诊固定性药疹2例

1 病例报告 例1:男,70岁.因腹泻1 d,自服泻痢停后脐周皮肤发现暗红色斑,微痒,于2002-07到我科就诊.查体:脐周皮肤见约有12 cm×10cm大小暗红斑,褐色表面无渗出无结节丘疹,无苔藓样变,伴毛孔轻度扩大,质地稍硬的轻度水肿的红斑.门诊拟诊固定性药疹,并给予炉甘石洗剂、倍氯美松霜外擦,抗过敏口服赛庚定片和维生素C片,症状略有减轻,1个月后病情无好转再次复诊,追问病史,患者5a前曾患胃癌做过胃大部切除术.     

肿瘤相关抗原p16的表达和纯化及其在癌症检测中的应用

肿瘤抑制蛋白p16是一个细胞cyclin依赖的细胞激酶抑制因子，具有调节细胞分裂周期的重要功能，p16基因的突变与肿瘤发生密切相关。以往的研究表明与细胞恶性转变有关联的一些蛋白如p53，c—mye，p62和survivin等可以诱发机体产生自身抗体，而这些自身抗体可以作为监测肿瘤发展的标志。是否血清中p16抗体也可作为一个肿瘤诊断的标志仍需要进行评价。本研究用GST融合蛋白纯化系统对体外表达的p16重组蛋白进行纯化，并进一步将其用做肿瘤抗原对癌症病人血清中存在的p16抗体进行检测。初步结果表明在多种肿瘤病人的血清中都可检测到p16抗体。由于本研究使用的样本数有限，是否p16抗体可以作为肿瘤的一个诊断标志仍需要做进一步的研究证实。